西宁地区儿童急性呼吸道感染病毒病原学检测分析

目的:探讨西宁市儿童常见呼吸道病毒感染的病原学特点和分布特征。方法:采集141例急性呼吸道感染住院患儿的咽拭子标本,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行合胞病毒(RSV),流感病毒A、B型(IFV A、B),副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型(PIVⅠ、Ⅱ、Ⅲ),腺病毒(ADV),冠状病毒(HCoV)OC43/HKU1、229E/NL63,博卡病毒(HBoV),偏肺病毒(hMPV)检测。结果:从141份鼻咽拭子样本中检测出呼吸道病毒阳性22例,阳性率为15.6%。检出4种呼吸道病毒,其构成比分别为ADV 45.5%、PIVⅡ26.1%、HCoV-229E/NL63 17.4%、IFV A 13.0%。不同性别间患儿呼吸道病毒阳性率无统计学差异(P>0.05)。<6个月组阳性率最低(6.3%),3～6岁年龄组阳性率最高(29.2%)。结论:西宁地区急性呼吸道感染病毒病原检出率低于全国水平,ADV为西宁地区急性呼吸道感染的首位病毒病原体,HCoV-229E/NL63是该地区急性呼吸道感染的病原之一。     

青海省1999年脊髓灰质炎Ⅰ型野毒株的分子病毒学分析

自中国脊髓灰质炎 (脊灰 )监测网络建立以来 ,有报告的脊灰暴发和流行主要由脊灰Ⅰ型野病毒引起。 1993年在新疆维吾尔自治区分离到 1株Ⅲ型野病毒 ,但未发现Ⅱ型野病毒。此外 ,1995年、1996年在云南省发现 2例Ⅰ型〔1〕、2例Ⅲ型境外输入野毒病例〔2〕。 1994年 10月以来我国本土未发现脊灰野病毒。但是 ,1999年 10月从青海省循化撒拉族自治县分离到 2株脊灰Ⅰ型野病毒 ,1株来自 1位 16月龄的病例 ,另 1株来自该病例的接触者。应用基因测序法对该毒株做了VP1片段序列的测定 ,并与疫苗株SabinⅠ型参考株、国内曾经流行的脊灰Ⅰ型野病毒代表株、我国周边国家部分脊灰Ⅰ型野毒株的序列作了基因同源性比较 ,并由计算机用NeighborJoining和BootstrapTest方法分析处理 ,构建出它们之间的关系树 ,初步揭示了该毒株很可能是由境外传入我国     

青海省1996～1999年脊髓灰质炎病毒学监测

目的：掌握消灭脊灰工作进展情况和不同人群中脊灰野病毒和消亡状态，为制定有效免疫策略提供依据。方法：在1996－1999年所有AFP病例和AFP病例密切接触，重点地区5岁以下健康儿童中，采集粪便标本776份检测脊灰病毒，应用2种以上敏感传代细胞培养，用基因序列分析方法判断病毒型别。结果：共检测脊灰病毒24株，非脊灰肠道病毒81株，分离率分别为3．09％与13．53％，经国家脊灰实验室和美国CDC最终鉴定：脊灰野病毒Ⅰ型2株，与印度1998年Ⅰ型野病毒符合率＞98％，判定由印度传入野病毒，其它脊灰病毒均为疫苗病毒。结论：1994年以来全省无本土脊灰野病毒流行，各项监测指标达到和接近国家要求，主实我省已阻断本土脊灰野病毒传播，达到无脊灰标准。传入野病毒的及时发现，反映出AFP病例监测系统敏感性和及时性较高，但该病例的发生提示局部地区存在着脊灰疫苗免疫空白或低接种率水平。     

28例AFP病例实验室监测结果分析

ＷＨＯ提出２０００年在全球消灭由脊髓灰质炎野毒株引起的脊髓灰质炎（简称脊灰）病例，中国要在１９９５年消灭由脊灰野病毒引起的脊灰病例，而我省是全国首批“无脊灰区”之一，据疫情资料，我省１９８７年发病２０例，１９８８年—１９９１年无病例报告，从１９９２年...     

青海省分离到肠道病毒71型及其VP1区基因特征分析

目的 研究2008年青海省手足口病（Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD）的致病病原体中肠道病毒71型（Human Enterovirus 71,HEV71）的VP1区基因特征.方法 采集青海省HFMD患者的粪便、疱疹液和咽拭子标本共335份,并进行病毒分离,然后对阳性分离株病毒进行肠道病毒血清型别的分子定型.对分离到的HEV71阳性分离株进行VP1编码区基因扩增,核苷酸序列测定和同源进化分析.结果 在335份临床标本中,共分离到45株阳性病毒分离物,其中30株鉴定为HEV71（占66.7%）,是主要病原体.对30株HEV71进行VP1区核苷酸序列测定后,分析发现它们在VP1区核苷酸水平和氨基酸水平上有一定差异,同源性分别在95.2%～100.0%和96.6%～100%之间.它们与1998年以来在我国分离的HEV71在核苷酸和氨基酸水平上的同源性都较高.与其他35株各基因型和基因亚型的HEV71代表株构建的亲缘进化树中显示,青海省HEY71分离株与C4亚型代表株聚为一簇,属于C4基因亚型C4a进化分支.结论 青海省从HFMD病例中分离到HEV71,也确认了青海省HFMD的病原体HEV71流行株的基因型为C4基因型中的C4a进化分支,并且存在多个传播链.     

青海省2011-2012年乙型流感病毒HA1基因特性研究

目的 了解2011-2012年青海省乙型流感病毒HA1基因变异情况。方法 随机选择2011-2012年流感病原监测中分离到的乙型流感毒株,提取病毒RNA,通过RT-PCR法扩增病毒HA1基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,采用DNA Star 5.0 MegAlign和MEGA4.0生物软件对测序结果进行分析处理,推导出氨基酸序列并进行基因特性分析。结果 12株Victoria系乙流感病毒HA1区域核苷酸序列与2009-2011年WHO推荐疫苗株B/Brisbane/60/2008同源性为88.6%~95.7%,氨基酸替换数在2~5个,所有分离株均在1个相同的氨基酸位点发生了相同的替换,部分分离株在320位减少了一个糖基化位点。5株Yamagata系乙型流感病毒HA1区域核苷酸序列与2011-2012年WHO推荐疫苗株B/Wisconsin/01/2010HA1区相比较同源性为97.7%~99.3%,氨基酸替换数在2-3个,所有分离株均在2个相同的氨基酸位点发生了相同的替换(N116K,D196N),在196位增加了一个糖基化位点。结论 青海省2011-2012年乙型流感病毒HA1基因特性正在逐渐发生变异,但尚未形成抗原漂移,今后在流感监测工作中要加强流感病原学的监测,及时发现新的乙型流感病毒变异株。     

2009—2010年青海省新甲型H1N1流感流行特征分析北大核心

目的分析2009—2010年新甲型H1N1流感在青海省的流行情况。方法收集"中国流感监测信息系统"中青海省报告的甲型H1N1流感病原学监测数据和全国第6次人口普查人口数据资料,采用Excel 2003软件建立数据库进行统计分析。结果全省确诊甲型H1N1流感2 034例,发病高峰在2009年9—10月。西宁市标化发病率为78.48例/10万,为全省各地最高。男性甲型H1N1流感发病率高于女性,差异有统计学意义(χ2=1 190.9150,P<0.0001)。在控制了性别因素的影响后,甲型H1N1流感发病率随年龄增加而降低,差异有统计学意义(χ2=36.5890,P<0.0001)。结论青海省甲型H1N1流感发病高峰在2009年9月份出现,较往年普通季节性流感提前,病例主要集中在西宁地区,发病率男性较女性高并随年龄增加而降低。     

不同细胞对脊髓灰质炎病毒敏感性的测定

目的：脊灰病毒在不同细胞株中的增殖情况和敏感性测定;方法：用微量板法测定脊灰Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型病毒在接种RD,Hep-2,L20B细胞后不同时间的病毒滴定,绘制出增殖曲线图;结果：（1）各型脊灰病毒在3种细胞中增殖情况基本一致;（RD,Hep-2细胞对脊灰病毒敏感 性一致,L20B细胞的敏感性相对于RD,Hep-2细胞低一些,结论：在脊灰病毒分离工作中要使用多种敏感,才能提高病毒分离率,防止脊灰病毒漏检。