阿司匹林在乳腺癌防治中应用研究进展

目的 总结国内外对阿司匹林与乳腺癌防治研究的最新进展,并就阿司匹林抗乳腺癌的机制、安全性及风险获益分析进行综述.方法 应用PubMed、Web of Science及CNKI期刊全文数据库检索系统,以“阿司匹林(aspirin)、非甾体类抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)、癌(cancer,tumor,neoplasm,carcinoma)、乳腺癌(breastcancer)”等为关键词,检索2000-2016的相关文献,共检索到英文文献1 759条,中文文献231条.纳入标准:(1)阿司匹林或非甾体类抗炎药与癌症防治或乳腺癌防治相关的基础研究、临床研究、荟萃分析等;(2)长期服用阿司匹林的安全性、风险获益分析;(3)发表年限较近的文章.剔除标准:(1)文献中所研究的非甾体类抗炎药不包含阿司匹林;(2)发表年限较久远的文章;(3)重复性文献.根据纳入及排除标准,最后纳入分析40篇文献.结果 阿司匹林主要通过抑制体内环氧化酶活性发挥抗乳腺癌作用,长期服用阿司匹林增加了溃疡、出血等风险,但对于低出血风险及高乳腺癌风险的患者来说获益大于风险.大量研究证明,阿司匹林具有抗乳腺癌作用,但目前各研究结果结论不一,其是否可以降低乳腺癌的发病率和死亡率以及抑制乳腺癌的复发和转移尚存在争议.结论 阿司匹林是癌症防治的新策略,有望成为乳腺癌的有效防治措施,但仍需要更多大型多中心临床研究进行进一步研究和论证.     

突变型p27kip1过表达对胆管癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨外源性突变型p27^kip1高表达，对人源性胆管癌细胞增殖及凋亡的影响。方法通过携带人突变p27^kip1基因的重组腺病毒载体Ad-p27mt和重组腺病毒Ad-LacZ，转染人胆管癌细胞系QBC9。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印记，检测p27^kip1在胆管癌细胞系中mRNA和蛋白的表达水平；噻唑蓝（MIT）比色法、克隆形成试验及流式细胞术（PCM），检测p27^kip1过表达对胆管癌细胞生长抑制、细胞周期和凋亡的影响。结果Ad-p27mt能显著抑制胆管癌细胞的生长，诱导G0／G1期阻滞和细胞凋亡。结论携带人突变p27^kip1基因的重组腺病毒对QBC939细胞的增殖有明显的抑制作用，并诱导强烈的G1期阻滞和细胞凋亡，是胆管癌基因治疗的新途径。     

反义MBD1基因真核表达载体转染对人胆管癌细胞MBD1基因表达的影响

目的：探讨反义MBD1基因真核表达载体转染对人胆管癌QBC 939细胞中MBD1基因表达的影响，为进一步研究该基因的作用提供依据。方法：构建反义MBD1基因真核表达载体，通过脂质体转染入人胆管癌细胞株QBC 939中，以G418进行筛选得到稳定转染细胞株，用PCR鉴定外源性neoR基因在转染细胞中的表达以确定转染成功。半定量RT PCR观察转染前后MBD1基因mRNA水平的变化，流式细胞术检测转染前后MBD1蛋白的变化。 结果：人胆管癌QBC 939细胞中MBD1基因的mRNA水平从0.912±0.022降低至0.215±0.017，转染前后的差异有显著性(P＜0.01)；MBD1蛋白水平从(80.19±5.05)％降低到(35.11±4.05)％，转染前后的差异有显著性(P＜0.01)。 结论：反义MBD1基因转染能降低人胆管癌QBC 939细胞中MBD1基因的表达水平，提示MBD1基因在胆管癌的发生发展中具有重要作用，反义MBD1基因转染有可能成为胆管癌治疗的一种新方法。     

PTEN和mTOR信号转导通路在胆管癌发展中作用的研究

目的: 研究PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中mTOR和PTEN蛋白在胆管癌中的表达及其在胆管癌发生、发展中的作用。方法:用免疫组织化学方法和RT-PCR法，检测胆管癌中mTOR 和PTEN 的表达。结果:与正常组织相比，免疫组化法和RT-PCR两种方法结果均显示，胆管癌中的mTOR表达明显增加，而PTEN的表达明显下降;两者呈负相关（r=-0.862,P<0.01）。结论:PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中重要的调节位点和节点PTEN在胆管癌中的表达明显降低，而mTOR的表达明显增高。〖KG(*8〗提示该信号转导通路在介导胆管癌的发生、发展的过程中起重要作用。     

反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体联合转染对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞株QBC-939的增殖能力和细胞凋亡的影响。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将二者先后转染入QBC-939,经G418筛选和荧光细胞克隆挑选得到稳定转染细胞株,并用Western blot检测转染前后的蛋白表达变化;用MTT法和软琼脂克隆形成试验观察各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞生长周期及凋亡率的变化。结果Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,并以前者为甚;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因的细胞克隆形成率分别为(6.78±0.89)%和(14.86±2.13)%,明显低于未转染组;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,细胞凋亡率从(1.63±0.27)%分别增加到(18.47±1.46)%和(6.19±0.78)%;在上述效应检测中,单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,能抑制胆管癌细胞的生长和增殖,并促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DNMT1反义基因;在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,二者通过甲基化途径对胆管癌的发生发挥作用。     

p27kip1基因在人胆管癌细胞化疗增敏效应中的作用

目的 探讨外源性p27^kip1在人胆管癌细胞系QBC939中高表达对胆管癌细胞化疗敏感性的影响。方法 通过携带人p27^kip1基因的重组腺病毒载体Ad-p27mt转染人胆管癌细胞系QBC939。经逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot检测p27^kip1在胆管癌细胞中的表达；经MTT比色法及流式细胞术检测5-氟尿嘧啶（5-FU）、丝裂霉素（MMC）、环磷酰胺（CTX）对转染p27^kip1前后的QBC939细胞生长抑制及凋亡的影响。结果 Ad-p27mt转染后5-FU、MMC和CTX对QBC939细胞生长抑制率，分别由转染前的41．89％、45．59％和38．91％显著增加为56．15％、55．65％和51．69％；凋亡率也由13．76％、11．76％和10．46％，明显升高为41．39％、35．94％、34．46％，差异均有显著性意义（均P〈0．05）。结论 p27^kip1在QBC939细胞中高表达，能显著增强胆管癌细胞对化疗药物的敏感性，为基因联合化疗药物治疗胆管癌提供了参考依据。     

ER、PR和HER-2在乳腺髓样癌中的表达及其临床意义

目的 探讨乳腺髓样癌的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)的表达情况及其临床意义.方法 收集16例临床病理资料完整的乳腺髓样癌病例,采用MaxVisionTM试剂盒行免疫组化两步法检测16例乳腺髓样癌组织中ER、PR、HER-2的表达情况并分析其结果,取同期的53例乳腺浸润性导管癌作对照研究.结果 乳腺髓样癌的免疫组化显示乳腺髓样癌组ER阳性率为3/16(18.75%)、PR阳性率为4/16(25.00%)、HER-2阳性率为5/16(31.25%)、三阴性乳腺癌为8/16(50.00%);乳腺浸润性导管癌组ER阳性率为35/53(66.04%)、PR阳性率为32/53(60.38%)、HER-2阳性率为20/53(37.74%)、三阴性乳腺癌为6/53(11.32%);乳腺髓样癌组ER的阳性表达率明显低于乳腺浸润性导管癌组(2 =11.107,P<0.01),乳腺髓样癌组中的PR的阳性表达率明显低于乳腺浸润性导管癌组(2=6.164, P<0.05).乳腺髓样癌组中的HER-2阳性表达率与乳腺浸润性导管癌组差异无显著性(2=0.224,P>0.05).结论 乳腺髓样癌的三阴性乳腺癌所占比例较高,激素受体阳性率低,该类型乳腺癌患者预后是否良好,需待进一步随访观察.     

青年乳腺癌中ER、PR、HER-2及VEGF表达及其临床病理学意义

目的 探讨青年患者乳腺癌雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2（HER-2）及血管内皮生长因子（VEGF）表达情况以及与临床特点和病理学特征的关系。方法 收集63例临床病理资料完整的青年乳腺癌病例(年龄在35岁以下) ,采用Envision试剂盒行免疫组化两步法检测癌组织中ER、PR、HER-2及VEGF表达情况,并与患者TNM分期、腋淋巴结转移状况进行比较分析,选取同期35岁以上中老年妇女乳腺癌患者390例进行对照。结果 青年组乳腺癌ER、PR、HER-2及VEGF阳性表达率分别为41.27％、39.68％、68.25％、61.90％,中老年组分别为63.08％、52.31％、42.56％、43.33％,青年组ER阳性率低于中老年组（χ2=10.751,P＜0.01）,HER-2及VEGF阳性率高于后者（χ2=14.404,P＜0.01;χ2=7.533,P＜0.01）;青年组ER、PR与TNM病理分期、腋淋巴结转移无相关性（P＞0.05）,HER-2、VEGF与TNM分期、腋淋巴结转移呈正相关（r=0.421,P＜0.01;r=0.368,P＜0.01）,随着TNM分期增加及淋巴结转移数目的增多,二者阳性表达率明显升高。结论 青年乳腺癌较中老年乳腺癌侵袭性强、预后差;乳腺癌组织中HER-2、VEGF表达与乳腺癌的TNM分期、腋淋巴结转移情况存在一定的相关性,可作为乳腺癌风险评估的重要指标。     

面向B超图像分割的动态权重因子水平集方法

目的研究和改进水平集方法,实现B超图像中病灶区域的准确快速分割。方法分析已有水平集方法在B超图像处理中
的局限,基于区域水平集的优点,将信息论中的熵引入图像处理,定义动态权重因子,准确反映局部灰度阶梯变化状况,定量度
量轮廓线像素点分别受到趋向目标、背景区域的两种作用力的动态权重,将其融合到区域水平集中,迭代引导曲线形变和位
移。由于B超图像病灶分割属于指定区域的局部分割,所以将计算约束到局部范围,从而明显降低运算代价。结果动态权重
因子水平集方法能够较好分割B超图像中的病灶区域,与几种主流水平集方法相比,本文方法精度更高,时间复杂度更小。结
论动态权重因子方法能够更合理准确地判断病灶边界像素点,局部计算策略有效地提高了分割效率。
     

D2-40标记人乳腺癌淋巴管密度的临床病理意义

目的 探讨D2-40标记人乳腺癌组织微淋巴管密度（LMVD）的可行性及其临床病理意义。方法 采用免疫组织化学SABC法检测50例乳腺癌和15例乳腺良性病变组织中D2-40的表达,观察其染色情况,并计数D2-40阳性微淋巴管,分析其与乳腺癌病理参数的关系。结果 乳腺癌组织中的LMVD明显高于良性病变组(P<0.01),肿瘤边缘区LMVD均值显著高于肿瘤中心区(P<0.01);肿瘤边缘区LMVD与乳腺癌的肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移状态相关(P<0.05),与年龄、组织学分型、ER、PR及Her-2受体状态无关(P>0.05);癌瘤中心区LMVD与上述临床病理参数均无明显相关(P>0.05)。结论：D2-40 可以特异性识别人乳腺癌组织中微淋巴管内皮细胞;其标记的微淋巴管主要分布于癌周组织;LMVD 与乳腺癌的肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移状态密切相关,可用来评估乳腺癌淋巴转移风险。