| 反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体联合转染对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 左石,邹声泉,刘民锋,董泾青,郭伟,罗剑,徐立宁.反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体联合转染对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响[J].华中科技大学学报(医学版),2006,35(1):5-9. |
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| 作者姓名： | 左石 邹声泉 刘民锋 董泾青 郭伟 罗剑 徐立宁 |
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| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科,武汉,430030;贵阳医学院附属医院肝胆外科,贵阳,550004
2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科,武汉,430030 |
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| 摘 要： | 目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞株QBC-939的增殖能力和细胞凋亡的影响。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将二者先后转染入QBC-939,经G418筛选和荧光细胞克隆挑选得到稳定转染细胞株,并用Western blot检测转染前后的蛋白表达变化;用MTT法和软琼脂克隆形成试验观察各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞生长周期及凋亡率的变化。结果Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,并以前者为甚;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因的细胞克隆形成率分别为(6.78±0.89)%和(14.86±2.13)%,明显低于未转染组;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,细胞凋亡率从(1.63±0.27)%分别增加到(18.47±1.46)%和(6.19±0.78)%;在上述效应检测中,单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,能抑制胆管癌细胞的生长和增殖,并促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DNMT1反义基因;在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,二者通过甲基化途径对胆管癌的发生发挥作用。
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| 关 键 词： | DNMT1基因 DNMT3b基因 反义RNA 胆管癌 DNA甲基化 细胞凋亡 |
| 修稿时间： | 2005年4月26日 |
Effects of Co-transfection of Antisense DNMT1 and DNMT3b Gene Eukaryotic Expression Vector on the Proliferation and Apoptosis of Human Cholangiocarcinoma Cell Line QBC-939 |
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| Zuo Shi.Effects of Co-transfection of Antisense DNMT1 and DNMT3b Gene Eukaryotic Expression Vector on the Proliferation and Apoptosis of Human Cholangiocarcinoma Cell Line QBC-939[J].Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences),2006,35(1):5-9. |
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| Authors: | Zuo Shi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | DNMT1 gene DNMT3b gene antisense RNA biliary tract carcinoma DNA methylation apoptosis |
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