NRG1在肝细胞肝癌中杂合性丢失和蛋白表达的研究

目的：分析在肝细胞性肝癌中NRG1基因的两个多态性位点D8S278和D8S499杂合性丢失（loss ofheterozygosity,LOH）情况及其与NRG1蛋白表达水平之间的关系,探讨NRG1在肝细胞肝癌发生发展中的作用。方法：酚氯仿抽提经石蜡包埋的肝癌和癌旁正常组织DNA,进行PCR扩增,扩增出来的产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳并分析两位点杂合性丢失情况;用免疫组织化学方法检测肝癌组织和癌旁正常组织中NRG1的表达情况。结果：D8S278和D8S499的LOH率分别为32.43%（24/74）、37.86%（26/69）,总频率为48.65%（36/74）;NRG1在肝癌组织中的阳性表达率为67.57%（50/74）,显著低于在正常组织中的表达水平（97.30%,72/74）（P〈0.05）,这种降低与NRG1基因多态性位点的LOH有关;NRG1表达下调与肿瘤大小、Edmondson分级相关,而与年龄、性别、HBsAg、AFP、肝硬化和肝内外转移无明显相关。结论：NRG1基因可能是肝细胞肝癌的一个候选抑癌基因,在肝癌发生发展中起一定的作用;可为临床诊断、治疗及预后评估提供理论依据。     

雌激素受体α与β表达的研究进展及其在疾病预后判断中的作用

目的:研究雌激素受体分布和表达及其在雌激素相关性疾病预后判断中的作用。资料来源:应用计算机检索PubMed1986-01/2003-12相关雌激素受体α与β的文章,检索词“Estrogen,steroidreceptor,prostategland”,并限定文章语言种类为英文。同时计算机检索《中国临床康复》杂志2002-01/2004-08相关文章,限定文章语言种类为汉语,检索词“雌激素”。资料选择:资料纳入标准为①雌激素受体α和β在子宫、卵巢、乳腺、前列腺、神经系统及肿瘤中的表达。②有关雌激素受体α和β的结构、功能及转录、调节。资料提炼:共有26篇文章符合纳入标准。资料综合:分别对雌激素受体α和β的结构、功能等及其在子宫、卵巢、乳腺、前列腺、神经系统及肿瘤中的表达及研究进展进行综述。结论:雌激素受体的两种亚型,由于基因、结构、功能、作用机制、分布的不同,对雌激素靶器官和组织的生理、病理产生不同的影响。     

NF-κB,Gadd45γ蛋白在肝癌中的差异表达及其意义

目的：分析NF-κB,Gadd45γ蛋白在肝细胞性肝癌中的差异表达,探讨其在肝癌尤其是HBV感染型肝癌发生发展中的意义。方法：应用免疫组化方法检测NF-κB,Gadd45γ蛋白在64例肝癌和48例癌旁组织中的表达情况,并结合HBV感染状态与临床病理资料进行分析。结果：NF-κB在感染型肝癌组织中的表达率高于癌旁组织和非感染型肝癌。Gadd45γ在感染型肝癌组织中的表达率低于癌旁组织和非感染型肝癌组织,差别具有统计学意义（P〈0.05）。NF-κB的表达与肝癌的分化程度,转移能力有关;NF-κB,Gadd45γ表达呈负相关（P〈0.05）。结论：HBV感染型肝癌组织中NF-κB的高表达,Gadd45γ的低表达并NF-κB部分介导的Gadd45γ表达下调共同参与了肿瘤的发生发展。     

NF-κB,Gadd45γ蛋白在肝癌中的差异表达及其意义

目的:分析NF-κB,Gadd45γ蛋白在肝细胞性肝癌中的差异表达,探讨其在肝癌尤其是HBV感染型肝癌发生发展中的意义.方法:应用免疫组化方法检测NF-κB,Gadd45γ蛋白在64例肝癌和48例癌旁组织中的表达情况,并结合HBV感染状态与临床病理资料进行分析.结果:NF-κB在感染型肝癌组织中的表达率高于癌旁组织和非感染型肝癌.Gadd45γ在感染型肝癌组织中的表达率低于癌旁组织和非感染型肝癌组织,差别具有统计学意义(P＜0.05).NF-κB的表达与肝癌的分化程度,转移能力有关;NF-κB,Gadd45γ表达呈负相关(P＜0.05).结论:HBV感染型肝癌组织中NF-κB的高表达,Gadd45γ的低表达并NF-κB部分介导的Gadd45γ表达下调共同参与了肿瘤的发生发展.     

乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞MKK3,p38MAPK表达的影响

目的：观察乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞中丝裂原活化蛋白激酶（MKK3）及其下游分子p38丝裂酶原活化的蛋白激酶（p38MAPK）的表达的影响,探讨相关的信号转导机制,及其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法：分别将质粒pCDNA3.1及pCDNA3.1-HBx重组质粒经脂质体介导转染人肝癌细胞株HepG2,G418筛选培养,并用反转录PCR和Western blot鉴定,获得表达X蛋白的稳定细胞株HepG2-HBx和阴性对照细胞株HepG2-pCDNA3.1,以HepG2细胞株作空白对照。通过RT-PCR和Western blot检测上述三种细胞株中MKK3,p38MAPK在mRNA水平和蛋白水平的表达变化,并用细胞免疫荧光法检查磷酸化p38MAPK蛋白在细胞浆及细胞核中的变化;通过MTT实验检测三种细胞株的增殖情况。采用SPSS 12软件进行统计学分析。结果：MKK3在mRNA和总蛋白水平的表达在HepG2-HBx中均高于其他两组,其他两组无明显差异;p38MAPK在mRNA和总蛋白水平三组无明显差异,而其蛋白磷酸化水平和在核蛋白中的表达在HepG2-HBx中较其他两组升高;HepG2-HBx较其他两组细胞有更强的增殖能力。结论：HBx可以通过上调肝癌细胞中MKK3的表达,促进p38MAPK磷酸化和入核,从而进一步激活下游分子发挥生物活性。p38MAPK通路在HBx促进肝癌细胞的增殖中发挥重要作用。可能是导致HBV相关性肝癌与非HBV相关性肝癌临床特点及肿瘤生物学差异的机制之一。     

哲学素养——医学研究生必备的素质

针对医学研究生的特点 ,分析了哲学素养对医学研究生全面发展的重要性。加强哲学素养是医学研究生适应医学模式转变的需要 ,是提高思维能力的需要 ,也是提高研究生道德水平的需要     

非放标AR基因多态性分析探讨子宫平滑肌瘤的克隆性

目的：根据女性体细胞中两条X染色体上雄激素受体（AR）基因的限制性片段长度多态性进行非放标克隆性检测，以探讨子宫平滑肌瘤的克隆组成。方法：自新鲜子宫平滑肌瘤组织中提取基因组DNA，经HhaⅠ消化后，PCR扩增，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染显示单股DNA片段长度，结果：在检测的54例子宫平滑肌瘤标本中，32例（59．3％）具有这种AR位点的多态性；其中3例标本X染色体失活发生了严重偏移，不适用于这种克隆性分析，对29例共68个平滑肌瘤结节的分析均显示AR位点长度多态性丢失，提示全部为单克隆细胞组成，其中8例结节个数≥3佣的多发性子宫平滑肌瘤中，6例标本的不同瘤结节均具有相同的X染色体灭活带型，另外，发现1例具有X染色体失偏移的标本其肿瘤组织中有额外条带出现，而且两个瘤结节具有相同改变，结论：此研究为国内开展非放标AR克隆性检测奠定了基础，同时还证实我们以前的研究结果，部分子宫平滑肌瘤不同瘤结节之间可能有共同的克隆起源。     

VEGF、COX-2在HBV感染型和非HBV感染型肝细胞癌中的表达差异及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达水平和肿瘤血管形成在肝细胞癌(HCC)中表达的临床病理意义.方法:利用血清学指标检测56例HCC的乙型肝炎病毒(HBV)感染情况,采用快速免疫组化法检测肝细胞癌中VEGF、COX-2的蛋白表达,抗CD105单克隆抗体显示血管内皮细胞,根据CD105阳性的血管内皮细胞计数测定肿瘤微血管密度(MVD).结果:HBV感染组中VEGF、COX-2蛋白以及MVD的阳性表达率均高于非HBV感染组,有统计学差异(P＜0.05).VEGF和COX-2表达呈正相关(r=0.429,P＜0.05).结论:HBV可能通过上调VEGF、COX-2等血管形成因子上调表达,共同促进了肿瘤血管的生成,从而促进HCC的生长、浸润和转移.     

S100B和EGFR在特异性肺癌脑转移细胞中的表达和意义

目的：分析S100B和EGFR在特异性肺癌脑转移细胞株中的表达，探讨肺癌脑转移的机制。方法：免疫组化和western blotting检测特异性肺癌脑转移细胞株PC14／B中S100B、EGFR的表达情况，并与原株PCI4、非脑转移肺癌细胞株A549比较。结果：PC14／B中特异性表达2种由S100B参与形成的蛋白聚合体，且这两种蛋白在A549和PCI4中未见表达。EGFR在A549中的表达水平明显高于在PC14和PC14／B中的表达水平。结论：一些含有S100B的蛋白聚合体可能促进了肺癌脑转移的发生，EGFR可能同肺癌的脑转移行为呈负相关。