热休克蛋白70促进急性肺损伤小鼠肺部炎症反应

目的 探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠发病的影响及其相关机制.方法 构建ALI模型小鼠,免疫印迹法检测肺组织中HSP70的表达情况,酶联免疫法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fl...     

YAP干扰下调 MARCO 受体表达抑制肺泡巨噬细胞的吞噬功能

摘要:目的 探讨 Yes相关蛋白(Yes-associatedprotein,YAP)对肺泡巨噬细胞(alveolarmacrophages,AMs)吞噬功 能的影响及相关机制。方法 通过鼻滴脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建急性肺损伤(ALI)小鼠模型,24h后经支气 管肺泡灌洗获取原代 AMs,采用 Westernblot检测原代 AMs中 YAP的表达;使用200ng/mL的 TNF-α刺激肺泡巨噬 细胞株 MH-S,24h后检测 YAP蛋白表达情况。MH-S细胞经 YAPsiRNA 干扰表达或经 Verteporfin抑制 YAP活性 48h后再与FITC-E.coli共孵育1h,流式细胞术检测 MH-S细胞吞噬率变化。MH-S细胞经 MARCO 阻断抗体(MARCOAb)作用6h后,检测其吞噬E.coli能力的变化。YAPsiRNA 干扰 MH-S细胞 YAP表达48h后,检测 MARCO 受 体的表达情况。结果 与对照组相比,ALI小鼠 AMs总蛋白(P<0.05)和胞质蛋白(P<0.01)中 YAP的表达均下降; TNF-α刺激后的 MH-S细胞,其总蛋白和胞质蛋白中 YAP蛋白水平均下降(均 P<0.05)。与干扰对照组(ScsiRNA 组)相比,YAPsiRNA 组 MH-S细胞吞噬能力降低(P<0.01);与对照组相比,YAP活性抑制组 MH-S细胞的吞噬率明 显下降(P<0.01)。用 MARCO Ab阻断 MARCO 受体后,MH-S吞噬率降低(P<0.01)。与 ScsiRNA 组相比,YAP siRNA 组 MH-S细胞 MARCO 受体表达降低(P<0.01)。结论 ALI小鼠 AMs中 YAP蛋白表达下降,YAP的下调可 以导致 AMs表面 MARCO 受体表达降低和吞噬E.coli能力减弱。