荧光定量RT-PCR技术检测健康人外周血γδT细胞细胞受体分子Vδ1~8亚群分布

目的：：检测和分析健康成人外周血中γδT细胞的T细胞受体( TCR)分子Vδ1~8亚群分布情况。方法：采集16名健康成人外周血,荧光定量反转录聚合酶链式反应检测其γδT细胞TCR分子Vδ1~8亚群的基因相对表达量,计算各亚群所占百分比。结果：健康成人外周血γδT细胞TCR分子Vδ1~8亚群的比例分别为：Vδ1(7.19±0.33)%、Vδ2(54.27±7.9)%、Vδ3(20.23±0.03)%、Vδ4(3.80±0.02)%、Vδ5(2.08±0.02)%、Vδ6(0.81±0.25)%、Vδ7(7.21±0.02)%、Vδ8(4.41±0.04)%。 Vδ2亚群均明显高于其他亚群(P<0.01)。结论：我国健康成年人外周血γδT细胞TCR分子Vδ1~8亚群分布由多到少依次为Vδ2>Vδ3>Vδ1>Vδ8>Vδ7>Vδ4>Vδ5>Vδ6。     

PBL教学法在免疫生物学教学中的初步探索

为了加强本校学生对免疫生物学知识的理解,提高学生综合学习能力,本教研室在2010级生物科学专业《免疫生物学》课程授课中引入PBL教学法。教学实践证明,此种教学模式可以增强学生自主学习能力、团结协作精神,对培养教师的综合素质也起到了积极的推动作用,是适应我国当前医学院校医学教育改革要求的一种有效的教学方法,值得进一步探索。     

槲皮素对LPS诱导中性粒细胞活性化效应的抑制作用

目的研究槲皮素(Quercetin，Que)对细菌脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)诱导的中性粒细胞(Polymorphonuclear，PMN)活化效应的影响。方法运用免疫荧光法和流式细胞术，对接受1h LPS刺激的PMN表面黏附分子(CD62L，CD11b／CD18)的表达进行测定，同时应用MTT法对不同状态下的PMN活性进行测定。结果Que对LPS诱导的中性粒细胞活化效应有明显抑制作用，表现为抑制细胞表面黏附分子CD62L的表达和促进CD11b／CD18的表达，同时Que对LPS增加细胞活性的效应有抑制作用。结论槲皮素通过对抗LPS对PMN黏附分子CD62L，CD11b／CD18的表达的影响，抑制LPS诱导的中性粒细胞活化效应，从而阻止PMN对血管内皮细胞的黏附，减少炎症细胞向炎症局灶的浸润，这可能是槲皮素发挥抗炎作用的一个重要机制。     

槲皮素对LPS延迟中性粒细胞自发性凋亡效应的抑制作用

目的：研究槲皮素对接受细菌脂多糖(LPS)刺激的中性粒细胞(PMN)自发性凋亡的影响，探讨槲皮素的抗炎作用机制。方法：以人外周血PMN为研究对象，选择光镜和流式细胞术检测细胞凋亡情况，对裂解的片段化DNA进行定量(二苯胺测定法)和定性(琼脂糖凝胶电泳)分析。结果：槲皮素(1～100μmol／L)对PMN的自发性凋亡率并无影响，但却能部分恢复由LFS所延迟的PMN自发性凋亡进程。当槲皮素的浓度为40μmol／L时，其恢复作用达到最大。结论：槲皮素对LPS延迟PMN自发性凋亡的效应产生了抑制作用，减轻了因预激因子活化PMN而加重的炎症反应，部分揭示了槲皮素的抗炎作用机制。     

抗类风湿病药金诺芬对中性粒细胞自发性凋亡的影响

目的 研究抗类风湿病药金诺芬(AF)对中性粒细胞自发性凋亡的影响。方法 运用流式细胞技术和MTS细胞活性测定技术对不同浓度的金诺芬影响下的中性粒细胞活性及其凋亡进行观察，并用低分子质量DNA“梯形条带”(DNA ladder)检测技术对其凋亡进行鉴定。结果 低浓度金诺芬(1μmol／L)可通过延迟中性粒细胞的自发性凋亡而增加其生命期限；但当金诺芬浓度大于5μmol／L时，中性粒细胞的坏死则明显增加，因而缩短了其生命期限。结论 金诺芬临床治疗量时的血清浓度一般在0．7μmol／L左右，在此浓度下，中性粒细胞通过延迟自发性凋亡来延长其功能性生命期限，所以金诺芬对类风湿关节炎患者的抗炎、抗风湿作用不可能通过直接清除炎症局部的中性粒细胞来完成；金诺芬的抗炎、抗风湿作用可能存在更为复杂的作用机制。     

中性粒细胞产生IL-6的研究概述

中性粒细胞 (ＰＭＮ)是机体最重要的炎性细胞 ,它对炎症的发生、发展及转归起了关键的作用。ＰＭＮ是有丝分裂后期细胞 ,由造血干细胞粒系发育而来 ,在骨髓中经过约 2周的时间从髓前细胞发育、分化、成熟 ,2天后进入血流。ＰＭＮ是血细胞中寿命最短的细胞 ,平均生命期限为 48小时左右 ,至分化成熟 ,ＰＭＮ就开始启动其自发性凋亡的机制 ,凋亡的ＰＭＮ最终被吞噬细胞吞噬处理掉。机体在遭受创伤或感染时 ,ＰＭＮ在各种刺激因子的作用下被激活 ,经过与血管内皮细胞的粘附、定位、跨膜迁移 ,并在趋化因子的引导下到达炎症局部 ,发挥效应作用[1 …     

槲皮素对细胞凋亡的"干涉"作用

槲皮素(1,3,4,5,7-五羟基黄酮,Quercetin)是自然界分布最广的生物类黄酮化合物,广泛存在于蔬菜和水果中,同时它也是多种中草药的成分.槲皮素具有抗肿瘤、降血压、降血脂、抗炎、抗过敏、抗病毒等多种生物学活性,所以对人类肿瘤、衰老、感染、心血管疾病的治疗和预防具有重要意义[1].最近的研究表明,槲皮素一方面可以诱导多种肿瘤细胞凋亡[2～6],另一方面又可以阻止一些非肿瘤细胞凋亡的发生[7～8].关于这两方面内容的阐述,对进一步了解槲皮素的作用机制,掌握其多种生物学活性,更加科学、合理地开发利用这一天然植物药提取物,具有重要意义.     

《流式细胞术》课程分层次教学探索与实践

目的:建立分层次《流式细胞术》教学模式,并评价其教学效果.方法:针对低年级本科生、研究生和继续教育学员等不同层次学生,在教学过程中采用不同的实验教学内容、方法和方案.各不同层次学生随机分成观察组和对照组实施教学,分析其学业成绩和问卷调查结果,评价教学效果情况.结果:实施《流式细胞术》分层次教学,3个层次的观察组学生在考试成绩、实践动手和创新能力3个方面均优于对照组(P<0.05～P<0.01).结论:分层次《流式细胞术》教学模式,为学生提供了符合自身条件和特点的学习条件,有效提高了不同知识背景学生群体的学习效果.     

急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能降低

目的 探讨急性肺损伤（ALI）小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的变化及其影响因素。方法 昆明种小鼠随机分为正常对照组、ALI模型组,脂多糖经气道滴入激发构建ALI模型小鼠;通过支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞（AM）,流式细胞术及荧光显微镜观察ALI小鼠AM吞噬功能的变化;免疫印迹与ELISA检测ALI小鼠肺组织白介素-33（IL-33）的表达和分泌情况;ELISA检测不同浓度脂多糖刺激肺泡上皮细胞株MLE-12细胞IL-33分泌的情况;采用不同浓度的脂多糖和IL-33作用正常组AM,观察这些刺激因素对AM吞噬荧光微球的影响。结果 与正常小鼠AM（75.1%±3.0）%相比,ALI小鼠AM吞噬荧光微球百分率（57.0±4.3）%明显降低,但ALI小鼠肺组织IL-33的表达和支气管肺泡灌洗液中IL-33的分泌均明显升高（P<0.05）;脂多糖（100~1000 ng/mL）促进肺泡上皮细胞IL-33分泌增加（P<0.01）;脂多糖（10~500 ng/mL）和IL-33（100 ng/mL）均明显抑制了AM的吞噬功能（P<0.05）。结论 ALI小鼠AM吞噬功能降低,这可能是由于脂多糖直接刺激AM引起,或者脂多糖激发肺泡上皮细胞产生的预警素IL-33也可抑制AM吞噬功能。