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人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
目的:进行人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定,为组织工程的进一步研究提供实验依据。方法:将剪碎的人脂肪组织加入Ⅰ型胶原酶消化,离心。将细胞悬液置于6孔培养板中,37℃、5%CO2培养箱中培养,细胞达80%融合时进行传代。选取第3代细胞,进行免疫组织化学染色,检测细胞表面抗原标记物;选取第3代细胞,分为成骨诱导组和成脂诱导组,每组又分为诱导组(加入相应诱导培养基)及对照组(未经诱导的细胞)。成骨诱导72 h后进行碱性磷酸酶(AKP)含量检测,8 d后进行茜素红染色,检验细胞内是否出现钙沉积;成脂诱导2周后进行油红O染色,检测细胞内是否形成脂滴。结果:培养细胞均有CD44、CD49d抗原阳性表达,不表达CD45、CD106抗原;成骨诱导72 h后,诱导组细胞内AKP含量(0.488 3 U•g-1prot)较对照组(0.063 2 U•g-1prot)明显增高(P<0.05);8 d后诱导组茜素红染色阳性,对照组阴性;成脂诱导2周后油红O脂肪颗粒染色为阳性,对照组为阴性。结论:利用原代细胞培养技术可成功地从人脂肪组织中分离出脂肪干细胞。 相似文献
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聚左旋乳酸可吸收微型接骨板的体内降解特性 总被引:2,自引:1,他引:2
背景:国外聚左旋乳酸微型接骨板和螺钉的价格昂贵,限制了其存国内的广泛应用.目的:观察国产聚左旋乳酸微型接骨板在家犬体内的力学衰减过程及其降解特性.设计、时间及地点:随机对照动物体内实验,于2005-0112006-12在吉林人学第一医院整形外科实验室完成.材料:聚左旋乳酸接骨板和螺钉由中国科学院长春应用化学研究所研制,初始分子质量约7.5×104,杨氏模量3.3~3.6GPa,强度48-55 MPa.方法:在12只成年杂种犬下颌骨建立双侧骨折模型,采用聚左旋乳酸接骨板螺钉固定系统行骨折内固定.然后按取材时闻随机分为术后1,3,6,12个月4个时间点,每个时间点3只.主要观察指标:观察各时间点接骨板大体降解情况,测试接骨板三点弯曲强度,检测接骨板黏均分子质量并计算其降解率.结果:12只犬均进入结果分析.降解过程中接骨板最人抗弯强度随时间的延长呈逐步下降的趋势,术后6个月,衰减率已达到初始强度的82.31%.各个时间点间均存在显著差异(P<0.05).随着降解时间的逐渐延长,接骨扳黏均分子质量呈现下降趋势.至术后12个月,分子质量降解率已达91.80%,各时间点间均存在显著差异(P<0.05).将接骨板最大抗弯强度衰减率与接骨板黏均分子质量降解率间进行双变量相关性分析,显示两者呈正相关性(r=0.876,P<0.05).结论:随时间的变化聚左旋乳酸微型接骨板逐渐降解,其力学强度逐渐减弱,分子质量逐渐降低,其降解过程与下颌骨骨折的愈合过程基小相符合. 相似文献
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聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝纳米羟基磷灰石复合材料对成骨细胞黏附和增殖能力的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
背景:聚乳酸类高分子聚合物与羟基磷灰石复合材料的研究是目前骨修复材料的研究热点.聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的纳米羟基磷灰石(PLLA/PLLA-gHAP)为具有独立知识产权的新型骨修复材料,具有较好的力学强度,其与骨修复的功能细胞成骨细胞间的相互作用尚无相关报道.目的:观察新型骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP对成骨细胞黏附、增殖功能的影响.设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2006-03/2007-03在东北师范大学细胞与遗传研究所完成.材料:①将骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP及PLLA制备成2 cm×2 cm×0.5 mm的板,浸泡、冲洗、消毒灭菌后备用.②将PLLA/PLLA-gHAP、PLLA两种板剪成0.5 cm×0.5 cm×0.5 mm的小块,加入DMEM培养液,配成10,100 g/L两种质量浓度的浸提液,于37℃孵箱中浸提72 h,4℃保存备用.方法:取孕19~20 d的Wistar大鼠胎鼠的颅骨进行成骨细胞体外培养.①光镜下观察成骨细胞形态,应用碱性磷酸酶染色、钙结节染色对其进行鉴定.②将成骨细胞分别接种在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料板上,24 h后应用细胞技术器检测细胞黏附数量,扫描电镜观察细胞形态.③MTT法测定成骨细胞在不同质量浓度(10,100 g/L)PLLA,PLLA-gHAP材料浸提液中的增殖情况,并与PLLA材料进行对比.主要观察指标:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料上的黏附数量和形态.②成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料浸提液中的增殖情况.结果:①在PLLA/PLLA-gHAP表面黏附的细胞数略多于PLLA材料,且黏附于PLLA/PLLA-gHAP材料表面的成骨细胞直径较大,伸出的伪足与材料间形成一种牢固的锚状结构.而在PLLA表面的细胞细胞直径较小,多为球形,很少伸出伪足.②10 g/L PLLA/PLLA-gHAP浸提液组的细胞活性明显高于10 g/LPLLA浸提液组和空白对照组;两种材料100 g/L质量浓度组的细胞活性均低于空白对照组,但PLLA/PLLA-gHAP组的细胞活性仍高于PLLA组.结论:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP材料表面较PLLA材料表面显示更好的黏附能力.②成骨细胞在PLA/PLLA-gHAP材料浸提液中较在PLLA材料浸提掖中显示更好的增殖能力.③新型PLLA/PLLA-gHAP材料具有较好的成骨细胞相容性,可能作为骨修复材料使用. 相似文献
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人参皂苷Rg3对人成纤维细胞增殖和凋亡影响的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨人参皂苷Rg3对人成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法自瘢痕疙瘩患者手术切取的瘢痕组织分离、培养得到成纤维细胞。收集处于指数生长期的成纤维细胞接种于96孔板,加入GS-Rg3,终浓度为25、50、100、200μg/ml,对照组加入等量的培养液,放入37℃、5%CO2、孵箱内分别培养24、48、72 h。用MTT法计算抑制率。应用流式细胞术进行测定,记录细胞周期各时相以及AP区亚峰细胞百分率。结果 GS-Rg3对体外成纤维细胞的抑制率随浓度和时间的增加而增强,最大抑制率为92.8%,最佳抑制浓度为100μg/ml。结论 GS-Rg3对人成纤维细胞增殖有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡。 相似文献
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1999年4月-2006年7月本科应用超薄真皮下血管网法手术治疗腋臭41例,现报道如下。 相似文献
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目的:观察国产新型聚左旋乳酸(PLLA)微型接骨板行下颌骨骨折内固定的效果。方法:将12只犬随机分为1、3、6和12月组,每组3只,建立犬双侧下颌骨骨折的实验动物模型,实验侧采用PLLA微型接骨板螺钉固定,对照侧用金属钛板固定。在术后1、3、6、12月分别处死动物,通过大体及X线片观察局部骨折愈合情况及骨折处组织病理学改变。结果:所有实验用家犬在术后全部成活,未见骨折移位、接骨板外露等情况;大体观察:术后1月组实验侧和对照侧可见骨折缝隙,有部分外骨痂,两侧差别不明显;术后3月组,两侧骨折处均骨性愈合,骨折固定无移位;术后6月组,两侧骨折处完全骨性愈合;术后12月组,两侧骨折处难于辨别骨折线。X线片观察:术后1月组,两侧均可见清晰骨折线和钉孔;术后3月组,骨折线变模糊,但仍可辨认;术后6月组,实验侧骨折线难于辨认,对照侧骨折线消失;术后12月组,两侧骨折线均消失。组织病理学观察:术后1月组,双侧骨折断端均可见大量胶原纤维,少量新生骨小梁,对照侧骨小梁多于实验侧;术后3月组,两侧均可见大量新生骨小梁,但实验侧多于对照侧;术后6月组,骨小梁改建完全,两侧均接近正常骨组织;术后12月组,两侧均与正常骨组织无异。结论:该国产新型PLLA接骨板在下颌骨骨折固定中的固定效果可靠,PLLA接骨板能够维持骨断端的稳定性,能够完成下颌骨骨折的愈合过程。 相似文献
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