猫儿眼植物酸对人BEL-7402细胞抑制作用的实验研究

目的：分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人BEL-7402细胞抑制作用机制。方法：采用流式细胞仪、噻唑蓝(简称MTT)法和锥虫蓝染色法对猫儿眼植物酸抗肿瘤细胞作用进行分析。结果：MTT法显示，给予0．1，1．0和10．0mg／L猫儿眼植物酸48h，其对人BEL-7402细胞的抑制率分别为52％，54％和57％；锥虫蓝染色法显示，给药后48h，猫儿眼植物酸对细胞生长抑制率分别为72％,81％和84％；凋亡率分别为24％，26％和33％。结论：猫儿眼植物酸对人BEL-7402细胞生长具有显的抑制作用，其效果随给药浓度的增加和作用时间的延长而递增。     

猫儿眼植物酸对人HL-60细胞抑制作用的机制

目的:分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人HL-60细胞抑制作用机制。方法:实验于2003-07/2004-07在甘肃省医学科学研究院药理毒理学实验室完成。采用流式细胞仪、克隆形成和噻唑蓝(简称MTT)法对猫儿眼植物酸抗肿瘤细胞增殖作用进行分析。结果:分别给予人HL-60细胞猫儿眼植物酸0.1,1.0和10.0ng/L,MTT法测定,对人HL-60细胞增殖的抑制率分别为24.6%,69.6%,83.1%;克隆形成抑制率分别为29.3%,55.8%和71.4%;凋亡率分别为6.4%,8.8%和21.8%。结论:猫儿眼植物酸对人HL-60细胞增殖具有明显的抑制作用。     

猫儿眼植物酸对人HL-60细胞抑制作用的机制

目的：分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人HL-60细胞抑制作用机制。方法：实验于2003-07／2004-07在甘肃省医学科学研究院药理毒理学实验室完成。采用流式细胞仪、克隆形成和噻唑蓝(简称MTT)法对猫儿眼植物酸抗肿瘤细胞增殖作用进行分析。结果：分别给予人HL-60细胞猫儿眼植物酸O．1，1．0和10．0ng／L，MTT法测定，对人HL60细胞增殖的抑制率分别为24．6％，69．6％，83．1％；克隆形成抑制率分别为29．3％，55．8％和71．4％；凋亡率分别为6．4％，8．8％和21．8％。结论：猫儿眼植物酸对人HL-60细胞增殖具有明显的抑制作用。     

复方丹参药物血清对人BEL-7402细胞的抑制作用

目的:丹参提取物可诱导肿瘤细胞分化和凋亡,观察复方丹参药物血清对人BEL-7402细胞增殖的影响。方法:实验于2003-06/2004-04在甘肃省医学科学研究院药理毒理学实验室完成。药物:复方丹参药物血清。细胞系:人BEL-7402细胞系。采用流式细胞仪、噻唑蓝法和克隆形成法对复方丹参药物血清抗肿瘤细胞作用进行分析。分别给予3.6,7.2和15g/kg体质量药物血清48h,用噻唑蓝法测定其对人BEL-7402细胞的抑制率、克隆形成抑制率、凋亡率。结果:①分别给予3.6,7.2和15g/kg体质量药物血清后,对人BEL-7402细胞的抑制率为26.4%,35.6%,51.7%。②分别给予3.6,7.2和15g/kg体质量药物血清后,克隆形成抑制率为42.8%,47.9%,74.8%。③分别给予3.6,7.2和15g/kg体质量药物血清后,凋亡率为18.6%,22.4%,28.8%。结论:复方丹参药物血清对人BEL-7402细胞增殖具有明显的抑制作用。     

复方丹参药物血清对人BEL-7402细胞的抑制作用

目的：丹参提取物可诱导肿瘤细胞分化和凋亡，观察复方丹参药物血清对人BEL-7402细胞增殖的影响。方法：实验于2003-06／2004-04在甘肃省医学科学研究院药理毒理学实验室完成。药物：复方丹参药物血清。细胞系：人BEL-7402细胞系。采用流式细胞仪、噻唑蓝法和克隆形成法对复方丹参药物血清抗肿瘤细胞作用进行分析。分别给予3．6，7．2和15g／kg体质量药物血清48h，用噻唑蓝法测定其对人BEL-7402细胞的抑制率、克隆形成抑制率、凋亡率。结果：（1）分别给予3．6，7．2和15g／kg体质量药物血清后，对人BEL-7402细胞的抑制率为26．4％，35．6％，51．7％。②分别给予3．6,7．2和15g／kg体质量药物血清后，克隆形成抑制率为42．8％，47．9％，74．8％。③分别给予3．6，7．2和15g／kg体质量药物血清后，凋亡率为18．6％，22．4％，28．8％。结论：复方丹参药物血清对人BEL-7402细胞增殖具有明显的抑制作用。     

链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其分子机制

目的:从分子水平观察链球菌蛋白质对人肝癌Bel-7402细胞的生长增殖的抑制作用。方法:实验于2005-10/2006-11在首都医科大学病原生物学系实验室完成。①链球菌32080株购自中国医学细菌保藏管理中心,人肝癌Bel-7402细胞株由首都医科大学细胞生物学系惠赠。②常规培养链球菌并按照Winters方法提取细菌蛋白。③用0,10,20,100mg/L细菌蛋白作用于单层培养的Bel-7402细胞24,48,72h,采用MTT法检测链球菌蛋白对细胞的增殖抑制作用。④Bel-7402细胞经10mg/L或50mg/L细菌蛋白分别作用48,72h后,流式细胞术检测细菌蛋白对癌细胞生长周期时相分布。⑤Bel-7402细胞经50mg/L的细菌蛋白分别作用24,48,72h后,Annexin-v PI双染法检测Bel-7402细胞凋亡率。⑥用50mg/L的链球菌蛋白分别作用于Bel-7402细胞0,24,48,72h后,Western Blot检测链球菌蛋白对Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的影响。结果:①链球菌蛋白对Bel-7402细胞的抑制作用:链球菌蛋白能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖,100mg/L细菌蛋白作用于细胞24,48,72h的抑制率分别为15.6%,35.6%,50%,呈剂量和时间依赖关系。②细菌蛋白对肝癌细胞生长周期时相分布及细胞凋亡率的影响:经链球菌蛋白(10,50mg/L)作用后,G2/M期Bel-7402细胞比率较正常对照组增加,差异有显著性(P<0.05);流式细胞术检测显示,经50mg/L链球菌蛋白作用后,实验组Bel-7402细胞凋亡率明显高于对照组细胞(P<0.01)。③Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的变化:Bel-7402细胞经50mg/L链球菌蛋白分别作用24,48,72h后,细胞色素C的释放逐渐增多,Procaspase-3及Bcl-2蛋白水平降低。结论:链球菌32080株蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用存在着剂量和时间依赖性,并能将细胞的生长周期阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡,影响Bcl-2,procaspase-3和细胞色素C等重要的凋亡相关蛋白水平。     

甘肃猫儿眼甲基酯类化合物对人LGC-7910细胞毒性作用

目的:观察甘肃猫儿眼甲基酯类化合物对人LGC-7910细胞毒性作用及其对细胞增殖的影响,为甘肃猫儿眼甲基酯类化合物的应用和开发提供实验依据。方法:实验于2006-06在甘肃政法学院公安分院实验中心完成。①体外培养人LGC-7910细胞48h,分为3组:甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组:给予不同浓度(0.2,0.8和3.2mg/L)甘肃猫儿眼甲基酯类化合物;5-氟尿嘧啶组:给予10mg/L5-氟尿嘧啶;对照组:加等量的磷酸盐缓冲液。②用MTT法检测细胞生长抑制情况,用流式细胞仪测定细胞分裂周期中各期细胞数及凋亡率,用电镜扫描法观察细胞形态结构。③采用DUNNETT单因素方差分析对数据进行统计处理。结果:①MTT法测定甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组(0.2,0.8,3.2mg/L)和5-氟尿嘧啶组对人LGC-7910细胞增殖抑制率分别为32.6%,65.7%,80.7%,46.5%,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01),5-氟尿嘧啶组、3.2mg/L甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组与0.8mg/L甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组比较,差异有显著性(P<0.05)。②流式细胞仪测定,甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组(0.2,0.8,3.2mg/L)和5-氟尿嘧啶组有61.6%,66.3%,70.6%,61.2%,滞留于G0G1期,在G2M期的细胞有11.9%,7.5%,4.8%,15.4%;凋亡率分别为11.6%,15.7%,26.2%,13.4%。③电镜扫描显示,对照组细胞膜完整,表面有很多微绒毛,甘肃猫儿眼甲基酯类化合物组细胞表面微绒毛断裂,出现孔洞,膜破裂,线粒体结构损伤,细胞出现凋亡、死亡。结论:甘肃猫儿眼甲基酯类化合物对人LGC-7910细胞具有明显的细胞毒作用,其机制与抑制分裂,破坏细胞形态和线粒体结构,诱导细胞凋亡有关。     

尼美舒利联合阿霉素对胃癌MGC803细胞的体外作用

目的:探讨尼美舒利联合阿霉素对胃癌MGC803细胞的协同作用。方法:通过MTT法和流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI荧光染色法检测不同浓度的尼美舒利及其与阿霉素联合对胃癌MGC803细胞的生长抑制作用和凋亡率。结果:25μmol/L尼美舒利作用24h、72h细胞生长抑制率为10.90%和32.52%;浓度400μmol/L时,抑制率升为39.90%和91.78%。单用阿霉素(0.25mg/L)作用48h抑制率为28.56%,合用25、400μmol/L尼美舒利抑制率升为68.50%和89.30%。100μmol/L尼美舒利作用6h时细胞的凋亡率为5.67%,作用24h时凋亡率升为29.60%。结论:尼美舒利能抑制胃癌MGC803细胞的增殖并诱导其凋亡,与阿霉素具有协同作用。     

重组人血管内皮抑素抗白血病作用的初步研究

目的 探索重组人血管内皮抑素(rhES,商品名恩度)体外对急性白血病细胞生长的抑制作用.方法 应用锥虫蓝拒染法、MTT法、透射电子显微镜(电镜)及Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术等方法 检测rhES体外对正常人及急性白血病患者骨髓原代细胞增殖和凋亡的影响.结果 50、100和200μg/ml rhEs作用HL-60细胞72 h,细胞增殖抑制率分别为11.6%、30.4%和33.5%;100和200μg/ml rhES作用NB4细胞72 h,细胞增殖抑制率分别为12.4%和16.4%,其抑制急性白血病细胞株增殖作用呈浓度及时间依赖性;rhES体外浓度0～400μg/ml对正常人骨髓单个核细胞的生长活性无明显抑制作用;50～200 μg/ml rhES对急性白血病患者原代细胞有抑制生长活性的作用,并且其抑制作用呈浓度及时间依赖性.rhES在体外浓度为100 μg/ml时,与HL-60和NB4细胞作用72 h,透射电镜观察可见典型的细胞凋亡的表现,流式细胞术检测凋亡率分别为19.6%和20.8%.结论 rhES在体外有抑制急性白血病细胞增殖和诱导凋亡的作用,是治疗急性白血病潜在的有效药物.     

尼美舒利联合表阿霉素对人膀胱癌EJ细胞的体外作用

目的:探讨尼美舒利对人膀胱癌EJ细胞的体外作用及其与表阿霉素的协同抗肿瘤作用。方法:通过MTT法检测尼美舒利及其与表阿霉素联合对EJ细胞的生长抑制作用,流式细胞仪Annexin V-FITC/PI荧光染色法检测EJ细胞在尼美舒利作用下的凋亡率,免疫组化SP法检测尼美舒利对EJ细胞中Bcl-2和Bax表达的影响。结果:40μmol/L尼美舒利作用24、48、72h细胞生长抑制率分别为15.18%、30.79%和43.50%;浓度360μmol/L时,抑制率分别升为50.45%、70.98%和88.67%。单用表阿霉素(0.2mg/L)作用48h抑制率为25.51%;合用40、120、400μmol/L尼美舒利抑制率升为58.52%、69.38%和80.30%。40、120、400μmol/L的尼美舒利作用12h时细胞的凋亡率为2.41%、8.27%和15.05%,作用36h时凋亡率分别升为13.32%、27.60%和42.48%。随着尼美舒利浓度增加,EJ细胞中Bcl-2表达下调,Bax的表达上调(P<0.05)。结论:尼美舒利可能通过下调Bcl-2表达和上调Bax表达来抑制人膀胱癌EJ细胞的增殖并诱导其凋亡,...