一种基于OmpA的分泌型原核表达载体的构建及应用

目的 构建大肠杆菌周质分泌型表达载体并验证其表达效果.方法 以pUC18-lpp为基础载体,构建含有核糖体结合元件(RBS)、信号肽(OmpA)、多克隆位点(MCS)的分泌型表达载体pUC-OmpA;通过分子克隆获得含有密码子优化的人生长激素(hGH)编码序列的pUC-OmpA-hGH,转化大肠杆菌JM109菌株并验证周质分泌性质.结果 经IPTG诱导后,SDS-PAGE、Western印迹分析结果显示周质空间有hGH重组表达产物,分子量约为22 kD,大小与预期一致,周质hGH约占菌体总hGH的43％.结论 成功构建了基于OmpA信号肽的周质分泌型表达系统,为实现生物活性蛋白的原核表达奠定了基础.     

消毒供应中心与临床科室沟通存在的问题研究

分析消毒供应中心与临床科室沟通存在的问题,结合实际情况确定合适的对策。方法:在本次研究中结合实际情况对消毒供应中心与临床科室沟通存在的问题进行详细分析。结果:消毒供应中心和临床科室管理中存在不同的问题。结论:消毒供应中心与临床科室沟通中存在很多问题,需要从提升工作人员对消毒知识的了解、做好消毒供应中心管理工作、做好临床科室管理工作等方面入手,做好具体管理工作。     

影响周围神经选择性再生的因素

周围神经损伤后,神经支配区的运动、感觉、营养等功能障碍,表现为运动功能丧失,肌肉萎缩,感觉减退等。尽管周围神经具有再生能力,功能恢复并不理想,这主要是由于神经再生时缺乏选择性,形成无效靶器官连接,最终影响功能重建。本文对近年来相关文献进行综述,从神经营养因子、黏附分子、雪旺细胞和导向分子等多方面探讨影响周围神经再生选择性因素和可能机制。为进一步了解选择性再生的分子基础,促进有效的功能修复奠定基础。     

高职高专护生评判性思维能力现状及影响因素分析

目的调查高职高专护理专业学生评判性思维能力现状并分析其影响因素。方法采用一般资料调查表和中文版批判性思维态度倾向性测量表(CTDI-CV),对某高职院校护理专业210名护生评判性思维能力进行调查。结果共发放问卷210份,回收有效问卷204份,有效回收率97.1%,其中高中起点大专护生112人,中专起点高职护生92人。护生评判性思维能力总分为(283.34±23.77)分,≥280分表示具有正性评判性思维,高中起点护生评判性思维能力总分为(281.52±19.27)分,中专起点护生评判性思维能力总分为(288.15±32.33)分,两者比较无显著性差异(P>0.05)。运用二分类Logistic回归进行影响因素分析,性别、年龄、父母是否指导学习与生活、是否积极参加社团活动、是否喜欢护理专业是护生正性评判性思维的影响因素。结论高职高专护生评判性思维能力整体较差,教育部门、学校和家庭应加强联系与合作,重视并培养护生评判性思维能力。     

纤维支气管镜下注药联合氩气刀治疗支气管结核的临床研究

目的 探讨纤维支气管镜(简称纤支镜)下局部注药联合氩气刀治疗支气管结核的临床疗效.方法 46例确诊为支气管结核的患者,根据患者意愿,在全身化疗的基础上,22例单纯采用纤支镜下局部注药治疗支气管结核2～3次(对照组),24例在纤支镜下局部注药的基础上联合氩气刀治疗2～3次(治疗组),比较两组的疗效.结果 治疗组咯血、呼吸困难症状改善率均显著高于对照组,差异有统计学意义[100.00％(12/12)比60.00％(6/10),100.00％(12/12)比60.00％(6/10)](P＜0.05).治疗组纤支镜下改变显效率高于对照组,差异有统计学意义[75.00％(18/24)比36.36％(8/22)](P＜0.01).治疗组2例操作中出现胸部不适,未经特殊处理,观察1～2d后症状自行消失,未发生出血及穿孔.结论 纤支镜下局部注药联合氩气刀治疗支气管结核治愈率高,能解除支气管阻塞,止血效果好,安全性高,并发症少,值得临床推广应用.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在B淋巴瘤细胞株中的敏感性及诱导细胞凋亡机制

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在B淋巴瘤细胞株中的敏感性及TRAIL通过线粒体信号通路诱导人B淋巴瘤细胞株Ramos凋亡的机制.方法 采用CCK-8法检测肿瘤细胞增殖,流式细胞术分析细胞线粒体膜电位、细胞表面受体DR4/DR5表达及细胞凋亡率变化,并用Western Blot测定Ramos细胞经TRAIL作用24 h后相关凋亡蛋白的表达水平.结果 供试的4株B淋巴瘤细胞中,Ramos细胞为TRAIL敏感株,Ramos细胞表面受体DR4/DR5表达水平明显高于TRAIL耐药株;TRAIL抑制Ramos细胞增殖通过诱导细胞凋亡介导;细胞调亡伴随线粒体膜电位明显变化;Western Blot免疫印迹结果显示,药物作用后,细胞内相关凋亡信号分子包括Caspase-9,Caspase-3,PARP蛋白等均明显活化.结论 4株B淋巴瘤细胞株对TRAIL敏感性不同,并与DR4/DR5表达相关;TRAIL抑制Ramos细胞增殖,诱导细胞凋亡,引起线粒体膜电位明显下降,活化Caspase-9及下游凋亡蛋白;线粒体调亡途径是介导TRAIL诱导Ramos细胞凋亡的途径之一.     

纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探

目的 建立纳豆激酶(nattokinase,NK)酶联检测体系,探讨其跨膜转运机制.方法 采用杂交瘤技术筛选抗NK的单克隆抗体,竞争抑制法鉴定单抗识别的抗原表位,Western Blot测定单抗特异性,双抗夹心ELISA法进行单抗灵敏度测定,Caco-2细胞模型探讨NK跨膜转运机制,生物信息学预测NK穿膜相关序列.结果 筛选得到稳定分泌抗体且特异性识别NK的杂交瘤细胞6株,其中3株单抗识别相近的抗原表位,其余单抗识别不同的抗原表位;6株单抗检测NK的最小灵敏度分布为0.78～20.00 ng/mL;Caco-2细胞模型显示,胞吞作用不是NK跨膜转运的主要途径;生物信息学提示,NK中含有3段穿膜相关序列.结论 基于NK单抗建立的酶联检测体系,可有效监控NK跨膜转运过程,NK可能是依据蛋白转导结构域直接介导而实现其肠道吸收转运.     

大中专实习护生养老护理从业意愿及影响因素的研究

目的了解大中专实习护生对养老护理从业意愿的现状,并分析其影响因素。方法采用大中专实习护生一般资料调查问卷和养老护理认知调查表对429名大中专实习护生进行调查。结果大中专实习护生养老护理认知得分为(3.58±0.36)分,处于中等水平;大中专实习护生从事养老护理照护意愿的主要影响因素为性别、正式编制、公立养老机构和职业发展认知。结论大中专实习护生养老护理认知现状处于中等水平,政府部门、社会各界、民间团体等应在养老护理人才培养方面给予更多的保障措施,增强其养老护理参与意愿,进而提升养老护理服务质量。