ELISA抑制法检测霍乱抗毒素影响因素的探讨

本文对ELISA抑制法检测霍乱抗毒素的影响因素进行了探讨，确定了抗体的包被浓度，时间和温度，选择了合适封闭剂，并对酶标板的再生方法进行了讨论。     

El-Tor生物型霍乱弧菌可溶性血凝素的纯化

用改进的Finkelstein的方法从Wg2(El-Tor 生物型)弧菌菌株中提纯的可溶性血凝素有下列特点:(1)纯化的血凝素(SHA)具有凝集红细胞的作用,且对不同来源的红细胞的敏感性不同。(2)纯化的SHA具有蛋白酶的水解活性。(3)经免疫双扩散、免疫电泳检测,纯化的SHA,粗制SHA与纯SHA抗血清反应均呈单一沉淀线。与霍乱肠毒素无反应。(4)聚丙烯酰胺凝胶电泳,SDS-凝胶电泳的结果与文献报道基本一致。     

霍乱弧菌外膜抗原免疫性的研究

人体感染霍乱弧菌后,可获得有效的保护性免疫。但是究竟霍乱弧菌表面的哪种成份在保护性免疫中起主要作用,至今尚未完全清楚。因此深入研究此问题对霍乱免疫机制的探讨以及制造高效霍乱疫苗都是十分重要的。为此我们提取了霍乱弧菌外膜成份,并对其免疫化学性,抗原性和免疫保护作用进行了研究。本文用4M尿素提取霍乱弧菌外膜,SDS—PAGE图谱显示11条蛋白区带,主要外膜蛋白分子量在40k～45k之间;     

Purification of a Choleragenoid by Ion-exchange Chromatography

ＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａＣｈｏｌｅｒａｇｅｎｏｉｄｂｙＩｏｎ－ｅｘｃｈａｎｇｅＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＬｉｎＨｏｕｙｉ（林厚怡）ＳｏｎｇＬａｎｚｈｅｎｇ（宋兰珍）ＳｈｅＸｕｅｘｕａｎ（佘雪轩）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｙ...     

加热霍乱类毒素的制备及其抗原性的研究

粗制霍乱肠毒素经60℃水浴，5分钟后其毒性丧失99％，抗原结合性保留87．5％。PAGE显示：毒素已成为大分子提合物，将这种聚合物经口免疫小鼠，产生良好的肠道抗毒免疫和一定程度的血清抗体反应。     

用ELISA替代家兔皮肤限量兰斑试验标定霍乱毒素

比较霍乱毒素标定的两种方法:酶联免疫吸附试验(ELISA)抑制试验和兔皮肤限量兰斑试验。根据数批毒素测定结果,ELISA抑制试验比皮肤限量兰斑试验更为满意。前者稳定、可靠、简便、快速、经济,有推广采用的价值。     

小鼠肠道抗霍乱毒素浆细胞的诱生及其检测

报道一种诱导及检测小鼠肠道抗霍乱毒素免疫反应的方法。小鼠经粗制霍乱毒素(CrT)口服免疫3次后,用免疫荧光法染色小鼠肠组织切片,发现固有层中有大量抗霍乱毒素浆细胞(ACC)存在。免疫反应的高峰为末次免疫后第6天,此时,经肠段结扎试验证实,小鼠获得完全保护力。统计学结果表明,免疫小鼠空肠固有层中ACC量与保护性免疫力间呈高度显著的相关性(r=0.88,P<0.01)。本研究提示,用免疫荧光法计数肠固有层中的ACC,能从细胞水平上较准确、客观地测知肠道局部免疫力。     

霍乱弧菌外膜抗原免疫性的初步研究

用4M尿素提取霍乱弧菌外膜,电镜下呈双层膜性结构。经肌肉免疫家兔,抗血清具有较强的杀弧菌作用和凝集作用;经口免疫,能刺激小鼠产生良好的肠道抗菌保护和一定程度的血清抗体反应。     

离子交换柱层析分离霍乱类毒素

用超滤、离子交换层析等方法从霍乱弧菌培养液中提取霍乱类毒素,经免疫电泳、SDS-凝胶电泳、等电点聚焦电泳等方法检测表明此法纯化的霍乱类毒素是纯的,家兔蓝斑试验与杀弧菌抗体均为阴性。