不同控制水平哮喘患儿血清25（OH）D3、CC16 水平和FeNO 的变化及临床意义*

目的 探讨不同控制水平哮喘患儿血清 25-羟维生素D3 ［25（OH）D3］、Clara 细胞分泌蛋白 16 （CC16）水平和呼出气一氧化氮（FeNO）的临床意义。方法 选取郑州大学附属儿童医院106例哮喘患儿为研究对象,依据哮喘控制水平分级标准分为良好控制组、部分控制组及未控制组。选取同期该院50例健康体检儿童为对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组儿童血清25（OH）D3、CC16、白细胞介素-4（IL-4）、血管内皮生长因子（VEGF）水平,并行FeNO测定,运用受试者工作特征（ROC）曲线评价血清25（OH）D3、CC16、IL-4、 VEGF及FeNO对哮喘未控制的诊断价值。结果 良好控制组、部分控制组及未控制组患儿血清25（OH）D3、 CC16水平低于对照组（P <0.05）,未控制组低于部分控制组及良好控制组（P <0.05）;良好控制组、部分控制组及未控制组患儿血清IL-4、VEGF水平和FeNO值高于对照组（P <0.05）,未控制组高于部分控制组及良好控制组（P <0.05）;血清25（OH）D3与CC16呈正相关（P <0.05）,与IL-4、VEGF及FeNO呈负相关（P <0.05）;ROC曲线结果显示血清25（OH）D3、CC16诊断哮喘未控制的曲线下面积分别为0.902［（95%CI：0.809,0.966）,P =0.001］和0.764［（95% CI：0.621,0.907）,P =0.003］,截断值分别为18.523 ng/ml、10.741 μg/L,特异性分别为 83.6%和76.4%,敏感性分别为89.2%和82.7%。结论 哮喘患儿血清25（OH）D3、CC16与哮喘控制水平相关,检测哮喘患儿血清25（OH）D3及CC16水平,同时动态监测FeNO,对评估哮喘控制水平及调整治疗方案具有指导意义。     

KLF4在LPS诱导的心肌细胞损伤中的作用研究

背景:KLF4作为一种转录因子在保持血管内皮功能中发挥重要作用,然而其是否能够保护心肌细胞免受脂多糖诱导的损伤尚不清楚。目的探讨KLF4在脂多糖诱导的心肌细胞损伤中的作用。方法:分离培养原代大鼠乳鼠心肌细胞,将其随机（随机数字法）分为5组：空白组,阴性对照组（NC组）,NC+脂多糖刺激组（NC+LPS组）,KLF4过表达组,KLF4过表达+LPS组。采用MTT法检测细胞活性,采用试剂盒检测细胞活性氧（ROS）,超氧化物歧化酶（SOD2）,谷胱甘肽过氧化物酶（Gpx）和丙二醛（MDA）的水平;采用酶联免疫吸附法（Elisa）检测细胞中肿瘤坏死因子（TNFa）,白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-6的水平。采用Tunel染色检测细胞凋亡。采用免疫印迹检测TLR4和核因子E2相关因子2（NRF2）的蛋白水平。结果:心肌细胞转染KLF4过表达腺病毒后,细胞中KLF4的表达明显高于NC组（ P<0.05）。NC+LPS组细胞活性明显低于NC组（ P<0.05）,KLF4过表达+LPS组细胞活性高于NC+LPS组（ P<0.05）。与对照组相比,NC+LPS组中的心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平明显升高（ P<0.0001）,KLF4过表达+LPS组心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平则显著降低（ P<0.0001）。NC+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平明显高于NC组,而SOD2和Gpx的活性低于NC组（ P<0.0001）;KLF4过表达+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平的水平明显降低,而SOD2和Gpx的活性明显升高（ P<0.0001）。LPS组心肌细胞凋亡数量明显高于NC组,KLF4过表达+LPS组心肌细胞凋亡数量明显降低（ P<0.001）。LPS组心肌细胞TLR4总蛋白水平高于NC组,NRF2的核蛋白水平低于NC组;KLF4过表达+LPS组心肌细胞TLR4的总蛋白水平降低,NRF2的核蛋白水平显著增高（ P<0.001）。 结论：:KLF4可抑制LPS诱导的心肌细胞损伤,其作用机制可能是通过抑制LPS诱导的心肌细胞中TLR4的表达,促进NRF2向细胞核转移来抑制炎症因子释放,减轻氧化应激损伤及抑制细胞凋亡。     

HPK1过表达对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的：构建造血祖细胞激酶1（HPK1）慢病毒载体,探讨HPK1过表达对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的作用,阐明其可能的机制。方法：通过过表达HPK1的慢病毒感染细胞,获得稳定表达HPK1的细胞系（MCF-7-HPK1和MDA-MB-231-HPK1）,将2个细胞系分别分为3组,即空白组、对照组（空载体组）和过表达组;分别采用RT-PCR法和Western blotting法检测乳腺癌细胞中HPK1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,Transwell法分析细胞的迁移能力,Western blotting法检测caspase 3、PTEN、MMP-9、MMP-2、Ki-67和HPK1蛋白表达水平。结果：与空白组和对照组比较,乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞过表达组中HPK1 mRNA和蛋白表达水平升高（P < 0.05）,细胞增殖率明显降低（P < 0.05）,细胞凋亡率明显升高（P < 0.05）,穿越Matrigel的细胞数明显减少（P < 0.05）,MCF-7细胞周期阻断在G₁期;过表达组细胞中caspase 3、PTEN蛋白表达水平上调（P < 0.05）,MMP-9、MMP-2、Ki-67蛋白表达水平降低（P < 0.05）。结论：HPK1过表达可抑制乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的增殖及迁移并诱导凋亡,其可能与caspase 3、PTEN蛋白的表达上调及MMP-9、MMP-2和Ki-67蛋白的表达降低有关。     

肾综合征出血热55例临床特征分析

目的　总结肾综合征出血热（HFRS）的临床特征,提高对本病的认识,减少漏诊。方法　回顾性分析2010年1月—2016年12月郑州大学第一附属医院确诊的55例HFRS住院患者的一般资料、临床表现、实验室检查结果、并发症、治疗方法及结局,并探讨影响HFRS患者预后的因素。结果　临床表现：55例患者中发热53例（96.4%）,消化道症状（腹痛、腹胀、恶心、呕吐）48例（87.3%）,少尿28例（50.9%）,皮肤黏膜充血出血27例（49.1%）,腰痛21例（38.2%）,头痛20例（36.4%）,休克11例（20.0%）,肌肉痛9例（16.4%）,眼眶痛4例（7.3%）。实验室检查结果：血小板计数减少48例（87.3%）,白细胞计数升高45例（81.8%）,尿蛋白阳性45例（81.8%）。并发症：肾功能不全49例（89.1%）,肝损伤49例（89.1%）,凝血功能障碍17例（30.9%）,胰腺炎2例（3.6%）,脑出血1例（1.8%）。死亡2例（3.6%）。单因素Logistic回归分析结果示休克持续时间为HFRS患者预后的危险因素〔OR（95%CI）=2.078（1.008,4.282）,P=0.047〕。结论　HFRS出现典型临床表现者少,易并发肝脏、肾脏及血液系统不同程度损伤,休克持续时间为HFRS患者预后的危险因素。     

甲磺酸加贝酯改善脓毒症急性肺损伤大鼠的代谢组学研究

目的:基于代谢组学研究甲磺酸加贝酯（GM）对脓毒症急性肺损伤（ALI）大鼠的作用。方法:将57只SD大鼠随机（随机数字法）分为3组,每组19只,即假手术组（SC组）,盲肠结扎穿刺术诱导脓毒症ALI组（CLP组）,CLP后1 h腹腔给药GM组（CLP-GM组）。实验后24 h观察SC,CLP和CLP-GM组大鼠生存状态,...     

二甲双胍在肿瘤细胞代谢中的研究进展

二甲双胍是2型糖尿病的一线降糖药物,其机制主要通过抑制肝脏葡萄糖的输出,并提高机体外周组织对胰岛素的敏感程度,从而增加葡萄糖的摄取和利用。不仅如此,现在有研究认为二甲双胍还可能通过激活酶的信号系统而发挥多方面的代谢调节作用。近年来二甲双胍表现出了除降糖以外的多种作用,如抗炎、抗肿瘤、延长寿命、预防脱发以及改善肠道菌群失调等。其中,对于二甲双胍在治疗肿瘤方面的研究越来越多,然而,当前关于二甲双胍在肿瘤细胞代谢方面如何发挥抗肿瘤作用的研究相对较少,本研究将主要从5个方面就二甲双胍在肿瘤细胞代谢中的可能作用和机制进行阐述,包括二甲双胍对肿瘤细胞葡萄糖代谢的作用及机制探讨,二甲双胍对肿瘤细胞脂质代谢的调节作用,二甲双胍对肿瘤细胞胰岛素代谢的调节作用,二甲双胍对肿瘤细胞线粒体的氧化磷酸化的作用及机制探讨,以及二甲双胍对肿瘤细胞免疫功能的调节作用。以期为今后的研究提供理论基础和新思路。     

右美托咪啶和咪达唑仑用于程序化镇静疗效和安全性的系统评价

目的：系统评价右美托咪定和咪达唑仑用于程序化镇静时的疗效和安全性。方法：计算机检索PubMed、EMBase、Cochrane Library、CNKI、CBM和万方等数据库,全面收集右美托咪啶和咪达唑仑用于程序化镇静效果比较的临床随机对照试验（RCT）,检索时限为建库至2017年3月。根据纳入标准筛选文献,并进行数据提取和质量评价,对研究结局进行系统评价。疗效结局指标为患者和医生的满意度评分、疼痛评分;安全性结局指标为低血压、低氧血症、循环和呼吸系统等并发症的发生率。结果：最终纳入14项RCT,共949例患者。与咪达唑仑组比较,右美托咪啶组患者的疼痛、谵妄发生率及镇痛需求比较差异均有统计学意义（P<0.05）;但呼吸抑制和低血压发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：成年患者镇静时,右美托咪定可以作为咪达唑仑镇静的理想替代药物。     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的表达及其与乳腺癌预后关系的Meta分析

目的：探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达及其与乳腺癌预后的关系,为mTOR抑制剂靶向治疗乳腺癌提供循证医学证据。方法：计算机检索PubMed、EMBase、Cochrane Library、ISI Web of Science和中国知网等数据库2015年12月24日之前的文献,收集mTOR表达与乳腺癌预后关系的研究,主要结局指标包含无病生存期（DFS）、总生存期（OS）;以风险比（HR）为效应量,各效应量以95%可信区间（CI）表示,采用STATA 12.0统计软件进行Meta分析。结果：纳入7项队列研究,共1758例患者。Meta分析,mTOR阳性表达乳腺癌患者发生复发和转移的风险是mTOR阴性表达患者的2.05倍（HR = 2.05,95% CI：1.01~4.13,P = 0.003）;mTOR阳性表达乳腺癌患者发生死亡的风险是mTOR阴性表达患者的2.63倍（HR = 2.63,95% CI：1.45~4.80,P = 0.736）。结论：mTOR表达阳性明显增加乳腺癌患者复发转移及死亡风险。     

KLF4在LPS诱导的心肌细胞损伤中的作用研究

背景:KLF4作为一种转录因子在保持血管内皮功能中发挥重要作用，然而其是否能够保护心肌细胞免受脂多糖诱导的损伤尚不清楚。目的探讨KLF4在脂多糖诱导的心肌细胞损伤中的作用。方法:分离培养原代大鼠乳鼠心肌细胞，将其随机（随机数字法）分为5组：空白组，阴性对照组（NC组），NC+脂多糖刺激组（NC+LPS组），KLF4过表达组，KLF4过表达+LPS组。采用MTT法检测细胞活性，采用试剂盒检测细胞活性氧（ROS），超氧化物歧化酶（SOD2），谷胱甘肽过氧化物酶（Gpx）和丙二醛（MDA）的水平；采用酶联免疫吸附法（Elisa）检测细胞中肿瘤坏死因子（TNFa），白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-6的水平。采用Tunel染色检测细胞凋亡。采用免疫印迹检测TLR4和核因子E2相关因子2（NRF2）的蛋白水平。结果:心肌细胞转染KLF4过表达腺病毒后，细胞中KLF4的表达明显高于NC组（ P<0.05）。NC+LPS组细胞活性明显低于NC组（ P<0.05），KLF4过表达+LPS组细胞活性高于NC+LPS组（ P<0.05）。与对照组相比，NC+LPS组中的心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平明显升高（ P<0.0001），KLF4过表达+LPS组心肌细胞TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达水平则显著降低（ P<0.0001）。NC+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平明显高于NC组，而SOD2和Gpx的活性低于NC组（ P<0.0001）；KLF4过表达+LPS组心肌细胞ROS和MDA水平的水平明显降低，而SOD2和Gpx的活性明显升高（ P<0.0001）。LPS组心肌细胞凋亡数量明显高于NC组，KLF4过表达+LPS组心肌细胞凋亡数量明显降低（ P<0.001）。LPS组心肌细胞TLR4总蛋白水平高于NC组，NRF2的核蛋白水平低于NC组；KLF4过表达+LPS组心肌细胞TLR4的总蛋白水平降低，NRF2的核蛋白水平显著增高（ P<0.001）。 结论：:KLF4可抑制LPS诱导的心肌细胞损伤，其作用机制可能是通过抑制LPS诱导的心肌细胞中TLR4的表达，促进NRF2向细胞核转移来抑制炎症因子释放，减轻氧化应激损伤及抑制细胞凋亡。