HCV感染者直接抗病毒药物治疗前后CD8+T淋巴细胞衰老和功能相关指标的变化

目的观察HCV感染者DAA治疗前后CD8+T淋巴细胞衰老、功能相关指标变化,并探讨其临床意义。方法选取2017年1月-2018年12月于空军军医大学第二附属医院就诊的HCV感染者26例,患者接受索磷布韦联合达卡他韦片治疗。并纳入治愈者22例,健康对照者20例。采用流式细胞仪检测CD8+T淋巴细胞上SIRT1、CD57、PD-1、Tim-3等相关分子表达,并采用RT-PCR方法检测p21、p53表达水平,Luminex液相悬浮芯片检测样本外周血衰老相关分泌表型。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 SIRT1、PD-1、Tim-3在3组间表达差异均有统计学意义(F值分别为6. 712、4. 202、4. 575,P值均0. 05)。与健康对照组相比,HCV组CD8+T细胞上SIRT1、PD-1、Tim-3表达水平明显上升(P值均0. 05),HCV治愈组Tim-3表达水平明显上升(P 0. 05),HCV治愈组SIRT1、PD-1表达水平无明显变化(P值均 0. 05)。p53、p21在3组间表达差异有统计学意义(F值分别为11. 144、6. 594,P值均0. 05)。与健康对照组相比,HCV治愈组和HCV组p53表达水平明显下降(P值均0. 001),p21表达水平明显下降(P值均0. 05),HCV组和HCV治愈组比较差异均无统计学意义(P值均 0. 05)。IL-6、TNFα在3组间差异均有统计学意义(F值分别为3. 920、6. 337,P值均0. 05),与健康对照组相比,HCV组外周血的IL-6和TNFα表达水平明显升高(P值均0. 05),HCV治愈组IL-6和TNFα表达水平无明显变化(P值均 0. 05),与HCV组相比,HCV治愈组TNFα表达水平明显下降(P=0. 007)。结论 HCV感染者CD8+T淋巴细胞衰老,经DAA治疗后衰老缓解,CD8+T淋巴细胞功能部分恢复。     

pcDNA3.1-CD81载体在人肝癌细胞中的表达及意义

目的研究人白细胞分化抗原CD81真核表达载体pcDNA3．1-CD81在人肝癌细胞系HepG2中的表达及意义。方法由人Molt-4细胞提取细胞总RNA，根据已公布的序列设计引物，运用RT-PCR及PCR方法扩增出人CD81基因，应用TA克隆插入PMD-18T载体；定向克隆入真核表达载体pcDNA3．1( )；通过脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2，用免疫组织化学方法(ABC法)及流式细胞技术检测目的蛋白的表达。结果由RT-PCR及PCR方法扩增出入CD81编码基因与Genebank公布的序列完全一致。重组真核表达载体pcDNA3．1-CD81经酶切和PCR鉴定分析正确。免疫组织化学方法(ABC法)及流式细胞技术证明转染的HepG2细胞表面能有效地表达CD81蛋白。结论所构建的pcDNA3．1-CD81真核表达载体在HepG2细胞有良好的表达，该转染细胞可作为研究CD81在HCV感染中的作用提供细胞模型，为研究丙型肝炎病毒(HCV)与CD81相互作用奠定基础。     

慢性丙型肝炎铁代谢的失调机制

肝脏是人体储存铁离子的主要器官,因此铁离子代谢失常与慢性肝炎密切相关。目前,慢性丙型肝炎(CHC)中铁离子过载的机制并没有完全阐明。铁调素调控非常复杂,依赖于许多变量,包括不同阶段的肝脏炎症情况、转铁蛋白参与的铁离子循环以及胞内铁离子储存等,这些因素都与引起HCV相关肝脏疾病患者中铁离子浓度的变化有关。讨论了系统铁离子稳态的调控、CHC与铁离子失调的关系及诱发CHC铁离子过载的机制。认为深入认识铁离子稳态和相关信号通路之间的关系将促进HCV相关疾病的控制与治疗。     

无症状HBV携带者IL－2及其受体的研究

无症状ＨＢＶ携带者ＩＬ－２及其受体的研究贾战生，张银霞，于兰，莫逢琼，杨霄鹏导致机体长期携带ＨＢＶ的机制还不清楚。Ｔ淋巴细胞是参与ＨＢＶ免疫的主要细胞群，白介素２（ＩＬ－２）及其受体（ＩＬ－２Ｒ）在其活化过程中起着关键性作用。本文选择６８例长期ＨＢＶ...     

胎儿LAK／IL－2治疗长期HBV无症状携带者的临床研究

胎儿ＬＡＫ／ＩＬ－２治疗长期ＨＢＶ无症状携带者的临床研究贾战生，于兰，张银霞，莫逢琼，吕同德，杨霄鹏我们应用胎儿淋巴因子激活的杀伤细胞［ＬＡＫ］配合重组白介素－２ｒＩＬ－２和干扰素ｒＩＦＮ－Ｙ治疗８例长期ＨＢＶ无症状携带者，并对其机理作了初步探讨。材...     

长期发热多尿厌食

1 病历摘要 患者男,43岁.因发熱14d、少尿3d,多尿6d于2007-06-22入院.发热起病,伴头痛、全身不适,体温39～40℃, 5d后出现一过性少尿,尿量100mL/24h,曾行连续性肾脏替代治疗(CRRF)治疗36h.     

体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒感染Huh7.5细胞的透射电镜观察

目的 通过透射电子显微镜技术观察体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒(HCV)感染Huh7.5细胞后胞内病毒颗粒的形态学特征及细胞内部超微结构的变化.方法 将含有全长HCV嵌合基因组的质粒pFL-J6/JFH体外转录为HCV RNA,电穿孔转染至Huh7.5细胞,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定培养上清中病毒数量;间接免疫荧光检测病毒蛋白的表达;收取转染后细胞培养上清感染原始Huh7.5细胞,制作超薄细胞切片,透射电子显微镜技术观察被感染细胞中病毒颗粒的形态学特征及细胞超微结构的变化.结果 qRT-PCR显示不同时间点收取的转染后细胞培养上清中含有高水平的病毒量;间接免疫荧光显示病毒NSSA非结构蛋白高表达;透射电子显微镜观察到被感染的Huh7.5细胞内含有大量有包膜或无包膜的病毒样颗粒,细胞质内部分膜性细胞器增生,出现黄病毒科病毒感染后特征性结构及某种未知结构等.结论 体外培养的嵌合体HCV具有HCV颗粒的形态学特征,并能够有效感染人源性肝细胞Huh7.5.     

丙型肝炎肝硬化的“分级”及聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林的抗病毒治疗

目的观察丙型肝炎肝硬化不同条件下抗病毒治疗的临床效果,拟定丙型肝炎肝硬化的分级规范治疗标准。方法选择确诊为丙型肝炎肝硬化的患者82例,以32例慢性丙型肝炎（CHC）患者为对照,根据肝硬化程度、脾功能亢进情况以及抗病毒治疗的耐受分为不同抗病毒治疗组：在采取造血因子刺激、脾栓塞或脾切除治疗后,观察患者脾功能亢进的缓解情况,解决脾功能亢进后,以标准治疗方案为基础,采取＂分级＂抗病毒治疗策略,可以实施更为主动的个体化治疗方案;分析不同组别的抗病毒治疗效果,并随访患者肝功能恢复状况。结果经过治疗后,各组患者白细胞及血小板计数显著升高,在给予抗病毒治疗后,脾栓塞及脾切除治疗组均有约60%患者获得早期病毒学应答（EVR）,而其持续病毒学应答（SVR）比率分别为59.3%与63.6%,丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平显著下降。结论丙型肝炎肝硬化＂分级＂抗病毒治疗策略,通过采取不同的抗病毒治疗方案,可以延缓病情进展,提高患者生活质量。