GABAAα1受体在局灶性皮质发育障碍大鼠脑皮质中的表达

目的探讨液氮损伤诱导局灶性皮质发育障碍大鼠脑皮质中γ-氨基丁酸A亚型α1(GABAAα1)的表达。方法实验随机分为液氮损伤组、假手术组和正常对照组,先建立局灶性皮质发育障碍模型,采用常规HE和Nissl染色,免疫组织化学方法用SABC法,DAB显色。观察微脑回和周围组织的结构及其GABAAα1受体阳性细胞表达情况。结果在大鼠脑嘴尾方向形成了一小的脑回,小脑回及前额叶GABAAα1受体阳性着色神经元在损伤组中的表达减少(q检验P<0.05)。结论微脑回及周围结构里GABAAα1受体数量的下调可能是其导致癫痫发作的原因之一。     

母鼠孕期γ-射线照射及新生鼠脑冰冻损伤后皮质发育障碍的模型研究

目的建立Wistar大鼠大脑皮质损伤后发育障碍的动物模型。方法分别采用γ射线照射孕15dWistar大鼠和用低于-50℃的液氮探子冰冻损伤新生第2天(P2)幼鼠脑皮质的方法制作皮质发育障碍动物模型。观察:(1)孕鼠后代及脑冰冻损伤幼鼠皮质发育障碍的类型和发生率,病理检查大鼠脑皮质和海马神经元结构;(2)模型组和正常对照组大鼠日常活动能力及脑电图变化;(3)利用热水浴诱导惊厥发作,观察潜伏期;(4)采用Morris水迷宫法测试大鼠学习能力和空间记忆能力。结果(1)两模型组大鼠脑重量(分别为平均932mg和927mg)均低于正常对照组大鼠(平均1300mg,P<0.05),病理切片可见大脑皮质变薄,皮质层状结构紊乱,具有多灶性、局灶性4层结构,皮质下神经元呈结节状异位,海马锥体神经元呈团状分布;(2)模型鼠日常活动能力较差;(3)模型组热水浴诱导惊厥发作的潜伏期缩短[3组大鼠分别为(3.65±0.44)min、(3.47±0.48)min和(4.66±0.58)min,P<0.05];(4)模型组水迷宫实验中寻找水下平台时间延长(P<0.05)。结论用γ射线照射孕15d大鼠和冰冻损伤P2幼鼠大脑皮质均可建立皮质损伤后发育障碍的动物模型,其发作易患性增加,伴有认知功能障碍。     

胚胎期γ射线照射所致大鼠后代皮质发育障碍的影响

目的建立Wistar大鼠大脑皮质发育障碍的动物模型.方法采用γ-射线照射孕15d Wistar大鼠的方法制作皮质发育障碍动物模型.观察:(1)孕鼠后代皮质发育障碍的类型和发生率,病理检查大鼠大脑皮质和海马结构;(2)模型组和正常对照组大鼠日常活动能力及脑电图变化; (3)利用热水浴诱导惊厥发作,观察潜伏期; (4)采用Morris水迷宫法测试大鼠学习能力和空间记忆能力.结果 (1)模型组大鼠脑重量(932mg)低于正常对照组大鼠(1 300mg,P<0.05),病理可见模型组大鼠脑皮质变薄,皮质层状结构紊乱,皮质下神经元呈结节状异位,海马锥体神经元团状分布; (2)模型鼠日常活动能力较差;(3)模型组热水浴诱导惊厥发作的潜伏期缩短[两组大鼠分别为(3.65±0.44)min、(4.66±0.58)min,P<0.05];(4)模型组水迷宫实验中寻找水下平台时间延长(P<0.05).结论用γ-射线照射胚胎15d大鼠可建立皮质发育障碍动物模型,其惊厥发作易感性增加,伴有认知功能障碍.     

DcR3基因对胰腺癌裸鼠移植瘤化疗敏感性的影响

目的探讨RNA 干扰沉默诱骗受体-3（DcR3）对人胰腺癌细胞裸鼠移植瘤化疗敏感性的影响及其可能机制。方法取对数生长期的AsPC-1 细胞1×106个/ml,接种于5 周龄裸鼠右后肢腹股沟,当皮下肿瘤直径为8 mm 左右,随机分为4 组（ n=10）：对照组、化疗组、阴性质粒+ 化疗组、DcR3 siRNA+ 化疗组。观察DcR3 siRNA联合化疗药物对人胰腺癌AsPC-1细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。应用ELISA和Western blot检测DcR3 蛋白的变化;TUNEL 分析肿瘤细胞凋亡;Western blot 和RT-PCR 检测FasL、Caspase-8 和Caspase-3 等凋亡因子的表达。结果化疗组、阴性质粒+ 化疗及DcR3 siRNA+ 化疗组均可抑制移植瘤的生长,与对照组比较,3 组抑瘤率平均值分别为（35.87±4.58）%、（40.68±4.16）%和（90.25±2.53）%,4 组间差异有统计学意义（F =47.736,P =0.000）,DcR3 siRNA+ 化疗组抑瘤率较化疗组增加;对照组、化疗组、阴性质粒+ 化疗以及DcR3 siRNA+ 化疗组移植瘤重量平均值分别为（0.95±0.03）、（0.63±0.04）、（0.67±0.02）和（0.17±0.06）g,4 组间差异有统计学意义（F =85.531,P =0.000）,DcR3 siRNA+ 化疗组瘤重较化疗组减轻;对照组、化疗组、阴性质粒+化疗组、DcR3 siRNA+化疗组凋亡率平均值分别为（6.3±2.21）%、（14.8±2.65）%、（14.5±3.06）%和（54.6±3.23）%,4 组间差异有统计学意义（F =104.225,P =0.000）,DcR3 siRNA+ 化疗组凋亡率较化疗组增加;DcR3siRNA+化疗组的FasL、Caspase-8 和Caspase-3 蛋白表达较其他各组上升（P =0.000）。结论沉默DcR3 可激活FasL/Caspase 凋亡途径,促进细胞凋亡,增加胰腺癌细胞移植瘤对化疗的敏感性。     

60Coγ射线诱导的弥漫性皮质发育不良模型鼠脑组织

目的:建立γ-射线诱导的弥漫性皮质发育不良(Diffuse cortical dysplasia,DCD)大鼠模型,观察其脑的组织病理特征,探讨病理与致痫机制的关系.方法:用γ-射线诱导DCD大鼠模型.观察DCD鼠的行为和脑电图的变化,采用HE、Nissl、LFB和Timm's硫化银组织化学方法染色及细胞凋亡-Hoechst染色法观察组织病理学特征.结果:DCD组少数自发性癫痫发作,大多表现活动增多、兴奋躁动、搔抓和"洗脸样活动"频繁.额叶皮质及海马EEG示频繁自发的棘波、尖波、棘慢综合波等发放.DCD组脑皮质、海马结构紊乱,细胞结构异常,双侧海马CA3区均有苔藓纤维发芽(P<0.05).皮质和海马结节及周有致密浓染的凋亡细胞核.结论:γ-射线诱导的皮质发育不良是模拟人类皮质发育不良、室周结节性异位、胼胝体缺失的理想动物模型.     

E1A基因通过抑制NF-κB信号通路增加鼻咽癌细胞放射敏感性实验研究

目的 探讨E1A基因对人鼻咽癌细胞放射敏感性的影响及其可能机制。方法 通过腺病毒载体介导,将E1A基因转染至鼻咽癌CNE-2R细胞,采用RT-PCR鉴定E1A基因的表达;分别给予未转染组(PBS组)、转染空载体Ad-β-gal组(Ad-β-gal组)和转染E1A组(Ad-E1A组)的CNE-2R细胞0、2、4、6、8 Gy照射,应用克隆形成实验检测各组CNE-2R细胞放射敏感性的变化;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;蛋白印迹法检测各组细胞NF-κB、CK2α、Bcl-2及Cleaved caspase-3蛋白的表达。结果 RT-PCR确认E1A基因已整合到CNE-2R细胞中且稳定表达;Ad-E1A组CNE-2R细胞克隆形成率明显少于PBS和Ad-β-gal组的克隆形成率,Ad-E1A组CNE-2R细胞SF2为0.217小于 PBS组和Ad-β-gal组的0.602和0.585(P<0.05),Ad-E1A组α/β值为24.68大于PBS组和Ad-β-gal组的5.268和5.132(P<0.05);流式细胞术显示单独放射可促进CNE-2R细胞的凋亡,当与E1A基因联合使用时,细胞凋亡率明显增加(P<0.05);蛋白印迹法显示E1A基因可下调NF-κB/P65、CK2α、Bcl-2和上调Cleaved caspase-3的表达。结论 E1A基因可以通过抑制CK2的表达阻断NF-κB信号通路以及促进细胞凋亡,来提高鼻咽癌细胞对放射的敏感性。     

RNA干扰沉默DcR3对人胰腺癌细胞化疗药物敏感性影响的实验研究

背景与目的：大部分胰腺癌具有高表达诱骗受体-3(decoy receptor 3,DcR3)的特征,而后者与FasL凋亡途径相关,可能导致胰腺癌对化疗耐药。该研究旨在探讨RNA干扰沉默DcR3基因对人胰腺癌细胞化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法：构建带有DcR3-siRNA序列的稳定表达质粒,通过Lipofectamine^TM2000转染至人胰腺癌细胞AsPC-1细胞株,筛选出转染后稳定低表达DcR3的胰腺癌细胞,同时设未转染对照组(control组)和转染阴性质粒对照组(mock组)。应用ELISA和蛋白［质］印迹法(Western blot)检测各组AsPC-1细胞中DcR3的蛋白表达;MTT实验检测各组AsPC-1细胞对吉西他滨的敏感性;流式细胞术检测各组AsPC-1细胞凋亡情况;Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测各组AsPC-1细胞中FasL、Caspase-8、Caspase-3蛋白和mRNA的表达。结果：转染DcR3-siRNA后AsPC-1细胞中DcR3蛋白较其他对照组明显降低;转染DcR3-siRNA后AsPC-1细胞对吉西他滨的敏感性显著增加;沉默DcR3基因可以上调FasL、Caspase-8和Caspase-3的表达并促进吉西他滨诱导的细胞凋亡。结论：RNA干扰沉默DcR3基因可激活FasL/Caspase凋亡途径,促进肿瘤细胞凋亡,增加人胰腺癌AsPC-1细胞对化疗药物的敏感性。     

丹红注射液对急性脑梗死患者高敏C反应蛋白和纤维蛋白原的影响

目的：观察丹红注射液对急性脑梗死患者高敏C反应蛋白（high sensitive C—reaetive protein,hs—CRP）和纤维蛋白原（fibrinogen,Fg）的影响。方法：选取60例急性脑梗死患者,分为对照组和治疗组,分别于治疗前和治疗后3天、14天测定患者高敏C反应蛋白和纤维蛋白原。两组基础治疗相同。治疗组使用丹红注射液40ml,1次／d,共治疗14天。对照组使用低分子右旋糖苷＋胞磷胆碱治疗14天。结果：治疗组治疗3天后hs—CRP较对照组下降,差异有统计学意义（P〈0．05）,治疗14天后hs—CRP和Fg较对照组下降,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：丹红注射液治疗急性脑梗死有一定的疗效,值得临床应用推广。     

舒肝解郁胶囊治疗稳定性心绞痛伴抑郁障碍患者的临床研究

目的观察舒肝解郁胶囊治疗伴抑郁障碍冠心痛稳定性心绞痛患者的临床疗效。方法将48例冠心病稳定性心绞痛同时伴抑郁障碍的患者,随机分为对照组和舒肝解郁组各24例,两组患者均给予冠心痛心绞痛的常规药物治疗,舒肝解郁组患者加服舒肝解郁胶囊0．72g,每日2次。分别予治疗前、治疗后8周测定患者的汉密尔顿抑郁量表（HAMD）、西雅图心绞痛调查问卷（SAQ）及全血粘度和血浆粘度。结果与对照组比较,舒肝解郁组治疗8周后汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分明显下降（P＜O．01）,西雅图心绞痛调查问卷（SAQ）评分明显提高（P＜0．01）,全血粘度及血浆粘度明显降低（P＜0．05）,差异均有统计学意义。结论舒肝解郁胶囊治疗伴抑郁障碍的冠心病稳定性心绞痛患者具有一定疗效,能明显提高患者的生活质量,可在临床推广应用。