改良直接上游法在体外受精中的应用

目的:探讨改良直接上游法在常规体外受精(IVF)中的应用价值.方法:487个拟行常规IVF周期中,获卵数均不少于8个.将同一来源卵随机分成实验组和对照组,实验组采取改良直接上游法处理精液,对照组则采用常规上游法处理.比较两组受精及胚胎发育情况,检测两组受精后3小时氧化损伤相关的脂质过氧化水平.结果:实验组精液与对照组相比,精液密度显著降低(22.7±12.6 vs 28.3±17.8,P＜0.01),但活率差异无统计学意义(82.3±13.1 vs80.9±12.5,P＞0.05).两组受精率、早补救发生比率、卵裂率、优质胚胎率比较,差异均无统计学意义(73.96％ vs 71.82％,6.16％vs 6.16％,98.92％ vs 98.63％,56.67％ys 57.21％,P＞0.05),两组种植率、临床妊娠率、流产率比较,差异也无统计学意义(32.49％ vs 30.44％,9.38％vs 10.83％,P＞0.05).实验组与对照组丙二醛(MDA)水平比较差异有统计学意义( 12.23±3.24 vs 18.51±3.55,P＜0.05).实验组也未增加污染几率.结论:改良直接上游法用于常规ⅣF周期,是一种简单、有效的精液处理方法.     

两种方法处理后精子形态的变化

目的研究上游法和密度梯度离心法（Percoll法）处理前后精子畸形率的改变。方法60例精液标本分别行上游法和密度梯度离心法优选,处理前后均行精子形态改良巴氏染色分析。结果上游法和密度梯度离心法都可以显著降低精子的畸形率,上游法以颈部和尾部畸形最为明显,其他畸形降低不显著;而密度梯度离心法处理后精子以大头和双头畸形降低较为显著,其他种类畸形精子率下降不显著。结论上游法和密度梯度离心法对改善精子畸形率的作用有限。     

倒位PCR法检测血友病A FⅧ基因内含子22/1倒位

目的建立血友病A（hemophilia A,HA）FⅧ基因第22内含子倒位PCR检测法,并初步应用于HA直接基因诊断。方法应用倒位PCR（inversion-PCR,I-PCR）方法对24个HA家系中所有先证者的FⅧ基因22内含子倒位进行检测,对检测阳性者的母亲进一步用上述方法行携带者诊断,并对其中1例进行羊水产前基因诊断。检测阴性者再行内含子1倒位筛查。结果 24个HA家系中,7例先证者的F基因内含子22倒位检测为阳性,阳性检出率、可诊断率分别为29.17%、100%,未发现内含子1倒位;7例内含子22倒位突变阳性患者的母亲有6例为倒位携带者,羊水诊断未发现内含子22/1倒位。结论 I-PCR法能准确地检测F基因22内含子倒位突变,可应用于HA患者及携带者FⅧ基因22内含子倒位基因诊断及产前诊断。     

未成熟卵体外成熟与体外受精妊娠胚胎移植14 d血清人绒毛膜促性腺激素 β亚单位水平的比较*

背景：相关研究表明,体外受精与胚胎移植治疗妊娠后血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平对妊娠结局有预测作用,未成熟卵体外成熟治疗妊娠后血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平对妊娠结局的预测作用不详。 目的：比较不孕症患者体外受精与胚胎移植和未成熟卵体外成熟治疗妊娠后血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平,探讨血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平对未成熟卵体外成熟治疗妊娠患者的预测价值。 方法：采用回顾性分析的方法,以在本中心行未成熟卵体外成熟治疗后妊娠实验阳性的42例患者为研究组,同期行体外受精治疗后妊娠实验阳性的66例患者作为对照组,比较两组患者胚胎移植后第14天血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平。 结果与结论：胚胎移植后14 d,分别在研究组和对照组内,单、双胎妊娠患者血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平差异均有显著性意义。血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平≥ 800 U/L时,两组双胎妊娠的发生率均明显增高。提示血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平对未成熟卵体外成熟治疗后妊娠患者的结局具有预测价值,未成熟卵体外成熟/体外受精妊娠胚胎移植14 d血清人绒毛膜促性腺激素β亚单位水平及其对妊娠结局的预测是相同的。     

重度少、弱、畸精症及阻塞性无精症患者单精子卵胞浆内注射治疗结果分析

目的回顾性分析应用单精子卵胞浆内注射(ICSI)技术治疗重度少、弱、畸精症及阻塞性无精症性不育的临床效果.方法收集2001年5月～2003年3月在我中心接受ICSI技术治疗的29例(31个周期)重度少、弱、畸精症及8例(9个周期)阻塞性无精症患者为研究对象,长方案进行超促排卵,ICSI常规操作,分析体外排精组和附睾取精组ICSI后的妊娠结局.结果 40个周期共获卵372枚,平均获卵9.3±5.36枚,其中可注射的MⅡ成熟卵326个(87.6%),注射后存活卵306枚(93%).受精率78.6%(241/306),胚胎形成率89%(215/241),优质胚胎形成率39%(84/215),平均移植胚胎数2.73±0.85,周期生化妊娠率35%,临床妊娠率27.5%.1例3胎、3例双胎,多胎率36%,目前已全部出生,共诞生了16名健康婴儿.结论 ICSI技术是治疗重度少、弱、畸精症及阻塞性无精症性不育的有效手段.     

人透明带与卵母细胞胚胎质量和发育潜能的关系

受精是精卵相互作用严格有序而又协调发育的复杂过程,而人类卵子受精过程中透明带（zona pellucida ,ZP）起着不可替代的作用.ZP是哺乳类动物卵母细胞外围包裹一层半透明丝状体酸性糖蛋白膜,保护卵子和受精卵免受外界的伤害;在受精过程中,精子必须要穿过ZP这一阻止种间受精的屏障.ZP异常可能导致卵母细胞受精失败,多精受精,胚胎质量、发育潜能下降等一系列问题.ZP在生育中的有着不可或缺的作用,导致近年来越来越多的学者都开始关注ZP,并深入的研究其结构和功能特性.本文就ZP的组成、分子结构、生物学功能及其与卵母细胞及胚胎发育潜能的关系进行综述.     

迟缓液化精液的两种体外处理方法的比较研究

目的 比较加糜蛋白酶后上游法和梯度离心法处理液化延长精液的精子质量。方法 30例正常精液和34例液化延长精液均取自本室门诊精液常规检测,所有标本量均≥2ml。常规检测后均分为两份,一份采用加糜蛋白酶后上游法处理,另一份用Percoll梯度离心法处理,显微镜下观察精子的活动力、活动率及24小时存活率。结果 除不液化伴高粘度的精液外,两种方法处理后镜下观测的精子参数经统计学处理差异无显性。结论 对液化延长精液采用加糜蛋白酶后上游法方便、有效。     

严重生精功能障碍患者助孕前遗传学检查的意义

检测严重生精功能障碍患者外周血染色体，为拟行ICSI技术助孕的患者提供遗传咨询。方法按常规方法进行外周血淋巴细胞培养、染色体制备、核型分析。结果61例无精子症患者中有22例染色体核型异常，异常率36.1%：36例严重少精子症患者中有1例染色体异常，异常率2.78%，根据染色体结果及生精功能障碍程度选择不同的诊治方案。结诊（1）染色体异常是导致男性生精功能障碍的重要原因之一。（2）ICSI助孕前，夫妇双方须行遗行学检查以避免遗传缺陷后代的出生。     

长方案控制性促排卵过程中晚卵泡期孕酮变化趋势对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:探讨在控制性卵巢刺激(COS)周期中晚卵泡期孕酮(P)水平变化趋势对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法:回顾分析2013年1月至2014年6月在我中心行IVF-ET长方案助孕治疗的676个周期。按促排卵中晚卵泡期起始日(主导卵泡直径达13mm日)与人绒毛膜促性腺激素(HCG)注射日孕酮水平变化,分为升高趋势组和降低趋势组;按HCG日孕酮水平是否1.0ng/ml将升高趋势组和降低趋势组中新鲜移植周期分别分为A组(P≤1ng/ml)、B组(P1ng/ml)和C组(P≤1ng/ml)、D组(P1ng/ml)。结果:(1)升高趋势组与降低趋势组的卵裂率、优质胚胎率比较,差异有统计学意义(99.65%vs 99.00%,70.57%vs 63.09%;P0.05);(2)A组与B组的临床妊娠率、活产率比较,差异有统计学意义(56%vs 43.00%;50%vs 37.76%,P0.05);C组与D组的临床妊娠率、活产率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:IVF-ET长方案周期中,COS过程中孕酮变化呈升高趋势的优质胚胎率较降低趋势高;新鲜移植周期,P呈升高趋势时,HCG日P1.0ng/ml,活产率下降;呈降低趋势时,HCG日P水平不影响活产率。