BMP-12重组腺病毒载体转染外周血MSCs向肌腱/韧带细胞分化研究

目的探讨携带BMP-12基因的腺病毒载体转染诱导外周血MSCs向肌腱/韧带细胞分化的效果。方法取3~4月龄新西兰兔外周血,体外分离培养外周血MSCs至第3代。采用Ad Easy腺病毒载体系统制备BMP-12重组腺病毒载体。将BMP-12重组腺病毒体体外转染第3代外周血MSCs,转染后24 h通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测转染效率,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,转染后8、24 h在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)表达;转染后0、7、14 d,采用免疫组织化学染色观察I型胶原表达情况;实时定量PCR检测肌腱/韧带特异基因Tenomodulin、Tenascin-C和Decorin m RNA表达水平,并设未转染细胞作为对照组。结果转染后24 h,倒置相差显微镜观察示细胞生长增殖缓慢,细胞形态清晰;FCM检测示,转染组转染效率为99.57%,未转染组为2.46%;转染后8 h,荧光显微镜下即可见GFP表达,随培养时间延长GFP表达逐渐增多,24 h时几乎所有细胞均可见GFP表达。免疫组织化学染色示,随转染时间延长,Ι型胶原表达逐渐增强;转染组转染后14 d,肌腱/韧带特异基因Tenomodulin、Tenascin-C和Decorin m RNA表达水平分别为0.061±0.013、0.029±0.008、0.679±0.067,均显著高于未转染组的0.004±0.002、0.003±0.001、0.142±0.024,差异有统计学意义(t=—7.700,P=0.031;t=—5.741,P=0.020;t=—12.998,P=0.000)。结论 BMP-12重组腺病毒载体可明显促进外周血MSCs向肌腱/韧带成纤维细胞表型分化,并促进肌腱/韧带特异基因表达和细胞外基质产生,为外周血MSCs用于肌腱/韧带再生提供了依据。     

关节镜下自体腘绳肌腱双束解剖重建前交叉韧带的临床疗效

目的:探讨膝关节镜下应用自体腘绳肌腱双束解剖重建前交叉韧带的临床疗效。方法:自2009年4月至2010年3月,诊断前交叉韧带损伤25例。男13例,女12例;平均年龄25.8岁(17～43岁);运动损伤17例,意外摔伤6例,交通事故伤2例;平均病程3个月。8例慢性损伤患者均以膝关节不稳为主诉,急性损伤及亚急性损伤患者多以膝关节肿痛为主诉。术前轴移试验阳性15例,Lachman试验阳性25例,前抽屉试验阳性25例。KT2000仪器测量胫骨前移度比健侧增加(7.1±2.4)mm,Lysholm评分平均(40.0±5.4)分,Tegner运动功能评分平均(3.2±0.7)分。在关节镜下以自体腘绳肌腱双束解剖重建前交叉韧带,分别于前交叉韧带股骨及胫骨附着处建立2个骨隧道,重建前交叉韧带的前内束及后外束;股骨侧以纽扣钢板悬吊固定,胫骨侧以干涉螺钉及拴桩双固定。术后进行随访,观察患者症状体征变化,测量患者胫骨前移度,并以Lysholm评分和Tegner评分评价术后膝关节功能。结果:患者术后均获2年以上随访,时间24～35个月,平均27个月。术后25例术膝轴移试验均阴性;Lachman征阴性23例,Ⅰ度阳性2例,术前术后差异有统计学意义。前抽屉试验阴性21例,Ⅰ度阳性3例,Ⅱ度阳性1例,术前术后差异有统计学意义。KT2000仪器测量患膝胫骨前移度,术后比健侧增加(2.0±0.5)mm(0～4mm),术后平移度较术前减小(t=22.35,P=0.0001);术后Lysholm评分平均(85.0±4.5)分(80～98分),术后评分较术前提高(t=17.64,P=0.001);术后Tegner运动功能评分平均(7.5±0.2)分(6～9分),术后评分较术前提高(t=8.12,P=0.0005)。术后患者膝关节运动功能改善。结论:自体腘绳肌腱双束解剖重建前交叉韧带术后轴移试验为阴性,能有效地恢复膝关节前向及旋转稳定性。双束重建术后膝关节功能恢复良好,膝关节运动功能基本恢复正常。     

福州市三甲医院介入室医护人员自我防护情况调查

目的了解福州市部分医院介入导管室医护人员自我放射防护现况,为加强放射诊疗管理及制定放射性防护措施提供依据。方法 2017年7~9月期间选取福州市5家三级甲等医院介入导管室的136名医护人员为调查对象,应用问卷方式调查分析其自我放射防护现况。结果放射防护问卷全部题目的平均正确回答率为65.46%,均分为(15.71±5.22)分,其中放射防护实际情况回答正确率最高(78.00%),防护基本知识最低(51.75%),规范参加放射防护培训的医护人员占75.74%。结论福州市部分三级甲等医院介入导管室医护人员的放射自我防护意识及能力仍处于中等水平,有待得到管理部门及医护人员的进一步重视和加强。     

兔半月板纤维软骨细胞的体外去分化研究

目的:比较研究不同代次间兔半月板纤维软骨细胞生物学特性的改变,为构建组织工程半月板和细胞治疗中的种子细胞优选提供进一步的理论和实践基础。方法:采用机械分离与酶连续消化相结合的方法体外分离兔半月板纤维软骨细胞,单层培养传代至第5代。采用相差倒置显微镜和SEM观察各代细胞的形态变化和超微结构,MTT法检测细胞增殖情况并描绘生长曲线,采用细胞化学染色和免疫组化鉴定细胞分泌的蛋白聚糖和Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白。结果:半月板纤维软骨细胞原代接种后8~12 h开始贴壁,48~72h大部分细胞贴壁,胞质逐渐展开,细胞变大伸长,形成突起,呈多角形,细胞形态规则,轮廓清晰,镜下观察有立体感,7~10 d后,细胞长满传代。传代后细胞贴壁生长能力和增殖速度明显加快,原代至第2代细胞形态较规则,多呈多角形,大小均一。第3代后随着传代次数的增加,细胞中梭形细胞增多,分泌和增殖能力下降,传代周期延长。第5代分裂相少见,密度稀疏,细胞形态不佳,约80%呈长梭形,分泌和增殖能力下降。SEM示第1代半月板细胞形态规则,呈多极性,表面有突起;第5代细胞形态不规则,多呈梭形。生长曲线可见第4代前半月板细胞生长速度及生长周期均相似,第5代后细胞生长速度减慢,增殖减缓。细胞化学和免疫组化染色分析胶原和蛋白聚糖的表达:随传代的进行,Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖的表达逐渐减弱而Ⅰ型胶原表达逐渐增强。结论:体外单层培养条件下,随着传代的进行,细胞活力逐渐下降,生长速度减慢,传代周期延长,逐渐变为梭形,形态不规则。体外单层培养系统中半月板纤维软骨细胞表型随传代的进行,Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖的表达逐渐减少而Ⅰ型胶原表达逐渐增多,体外单层培养条件下培养的半月板纤维软骨细胞从第3代开始逐渐失去其特异性表型,发生去分化,逐渐变为成纤维细胞的表型。体外单层分离培养的第5代前半月板细胞基本维持纤维软骨细胞的表型和生物学特性,可作为组织工程半月板的种子细胞。     

MBT直丝弓矫治器治疗成人双[牙合]前突错颌畸形的临床观察（附36例报告）

成人口腔环境较为复杂,[牙合]骨生长发育早已停止．并且由于很多成人不同程度患有牙周及颞下[牙合]关节方面的疾病,成人的牙列矫正一直是正畸的禁区。而成人双[牙合]前突的错颌畸形,因为严重的影响了患者的面型,更容易导致患病成人自卑心理的产生。随着近年来社会的不断进步,人们的思想及审美观点的不断变化,以及正畸本身矫治装置和安装方法的改进,成人正畸需求极大的增加。     

自攻微螺钉配合矫治上颌牙列稀疏12例临床体会

牙列稀疏是牙量小于骨量的临床表现。病因可能是先天缺牙,也可能仅是牙列有散在间隙,但无先天缺牙。临床上常用矫治的方法有两种,一种是集中间隙后修复;另一种是关闭散在间隙,在可能的情况下后一种方式是比较理想的。本组利用自攻微螺钉加强前牙支抗,使后牙前移关闭上颌前牙间隙,效果良好,报告如下。     

超声定位在右颈内静脉置管中的应用

右颈内静脉置管对手术患者、需长期输液治疗的危重患者具有重要价值,但置管过程可能发生并发症或置管失败,给患者带来不良后果.盲探穿刺可因患者个体解剖差异和操作医师经验不足发生局部血肿形成,增加穿刺难度而影响穿刺成功率.超声技术可提供颈内动脉、静脉的解剖位置图像，有无创、直观等优点．     

碱性成纤维细胞生长因子及纤维蛋白胶在骨科的运用

背景：碱性成纤维细胞生长因子具有促进新生血管生成和结缔组织再生等多种生物学作用,但其在体内可被快速降解,而纤维蛋白胶作为载体则可通过缓释作用避免碱性成纤维细胞生长因子在体内的快速降解,从而更好的发挥其生物学作用,但目前二者的具体运用方式尚处于研究阶段。 目的：对碱性成纤维细胞生长因子及纤维蛋白胶在骨科领域的运用研究进展进行综述。 方法：由第一作者用计算机检索2000至2014年中国期刊全文数据库和Medline数据库相关文献,总结分析碱性成纤维细胞生长因子及纤维蛋白胶在骨科的运用情况。 结果与结论：最终纳入的64篇文献的整理分析结果提示,碱性成纤维细胞生长因子可以通过纤维蛋白胶的载体作用,达到促进促进创伤愈合与组织修复的目的,但多数研究尚处于实验阶段,其在骨科领域的临床应用还需要进一步的探索。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

麻醉医生术前访视在手术安全中的作用

麻醉医生是每一例手术麻醉的设计者和管理者。术前充分与病人、家属及手术医生沟通交流,是提高麻醉质量、保障手术安全的重要环节,同时也是减少和杜绝医疗纠纷的重要措施之一。     

自体血回收技术在急性创伤性腹腔内脏出血中的应用

目的观察自体血回收技术在创伤性腹腔内脏出血中的应用效果。方法急性创伤性腹腔内出血21例,术中应用自体血液回收机进行血液回收、回输,观察其效果,记录术前、术毕心输出量（CO）、平均动脉压（MAP）、中心静脉压（CVP）、心率（HR）,并同时测定血红蛋白（Hb）、血细胞比容（Hct）等。结果平均出血量（2180±1013）ml,自体血回输（1150±623）ml,术毕CO、MAP、CVP、Hb、Hct明显高于术前,HR低于术前,差异显著（P〈0.05）。结论急性腹腔内大出血患者应用自体血回收技术可及时回收、回输出血,安全有效。