裸鼠糖尿病模型的建立及皮下异种胰岛移植研究

目的 探讨链脲左菌素（STZ）建立BALB/c nu/nu裸鼠Ⅰ型糖尿病模型的方法,及将大鼠胰岛分离纯化后移植至糖尿病裸鼠皮下,对移植后裸鼠进行疗效评价。方法 选用Balb/c裸鼠分为三组：糖尿病且胰岛移植组、糖尿病胰岛未移植组和正常组;用STZ对裸鼠进行糖尿病建模,大鼠胰岛分离、纯化后移植至糖尿病裸鼠背部皮下,进行血糖、体重和HE染色考察,以糖尿病未移植组和正常组作对照。结果 STZ浓度175 mg/kg时,腹腔注射裸鼠糖尿病造模成功率高,纯化的大鼠胰岛活性较好,但移植后疗效平均维持时间约5 d,移植第5 d的OGTT结果显示胰岛皮下移植组和糖尿病组血糖均较正常组高,移植3 d时HE染色显示胰岛在皮下存活,但胰岛中心部位细胞有坏死。结论 本研究建立了一种免疫排斥缺陷宿主异种胰岛皮下移植治疗糖尿病的方法,为进一步探索改进胰岛移植研究提供参考。     

一种快速分离纯化小鼠胰岛的方法

目的 介绍一种快速分离纯化小鼠胰岛的方法及进行纯化后胰岛的活性、完整性和胰岛内结构的质量分析.方法 雄性ICR小鼠,采用2 mg/mL胶原酶V灌注和消化,并用Hanks液快速洗涤,用Histopaque（R）-1077和Histopaque（R）-1119密度梯度离心对胰岛进行纯化,用手工方法进行胰岛挑选,DTZ、FD-PI染色鉴定胰岛纯度及其活性,透射电镜观察胰岛内的结构.结果 胰岛开始消化至手工挑选前过程耗时＜ 25 min,每只小鼠得到胰岛数量为：128±36,当量为：145±42,纯度＞90％.透射电镜显示胰岛内部血管仍有损伤.结论 采用此方法可快速得到数量较多、结构较完整的小鼠胰岛,且活性高,为进一步进行胰岛的体外质量研究及体内移植奠定了基础.     

雷帕霉素栓剂的制备及质量评价

目的：制备一种含雷帕霉素的聚乙二醇栓剂,并对其质量进行评价。方法：以雷帕霉素为原料药,聚乙二醇2000和聚乙二醇4000为主要基质,热熔法工艺制备含药栓剂,并对其药物含量、重量差异、融变时限、药物溶出等进行评价。结果：雷帕霉素聚乙二醇栓剂外观呈白色半透明状,室温下保持较好的硬度,药物含量、重量差异和融变时限均符合栓剂要求,药物在释放介质中约25min释放达到75％以上。结论：本研究制备的雷帕霉素聚乙二醇栓剂符合中国药典栓剂质量检测要求,有望开发成雷帕霉素的一种新剂型。     

莪术醇软膏对糖尿病溃疡创面愈合的作用

目的：研究莪术醇软膏对糖尿病溃疡愈合的治疗作用。方法：SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ,55mg/kg）建立糖尿病模型,1周后测定血糖,血糖值大于16.7mmol/L为造模成功。2周后,在大鼠背部脊柱两侧用手术剪各剪切2个直径为1.8cm的圆形全层皮肤,糖尿病溃疡造模成功后,随机将大鼠分为3组：空白基质组、5%莪术醇软膏组和10%莪术醇软膏组。给药后于第3、第7、第14和第21天对溃疡愈合率、组织形态学进行观察与检测。结果：实验造模成功后,莪术醇软膏组的创面愈合明显比空白基质组快（P＜0.05）,且高剂量组创面愈合较低剂量组愈合更佳。病理切片HE染色及免疫组织化学染色的结果表明3组中10%莪术醇软膏组在促进创面愈合,加快胶原合成,增加内皮细胞黏附分子（CD31）的阳性表达,上调转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白阳性表达上效果最好。结论：莪术醇软膏可促进糖尿病溃疡的愈合,为临床使用外用药治疗糖尿病性溃疡提供实验参考。     

微胶珠化胰岛肌肉内移植治疗小鼠1型糖尿病

背景：前期实验证明海藻酸钡微胶珠具有免疫隔离作用,并且不会引起免疫排斥反应。目的：观察包裹胰岛海藻酸钡微胶珠对1型糖尿病小鼠的治疗作用。方法：分离纯化SD大鼠胰腺单个胰岛细胞团,并包裹于海藻酸钡微胶珠内。以腹腔注射链脲佐菌素诱导建立C57BL／6小鼠1型糖尿病模型,随机分组：实验组小鼠股二头肌内多点注射包裹胰岛的海藻酸钡微胶珠,对照组小鼠股二头肌内多点注射胰岛,糖尿病对照组及正常对照组小鼠股二头肌内多点注射生理盐水。术后观察小鼠血糖及胰岛微胶珠在肌肉内存在状况。结果与结论：分离纯化后获得高纯度胰岛,每只供体可获得（905．4：1：34．5）个,并具有良好生物活性。实验组小鼠血糖降为正常的时间约为6．3d,移植胰岛存活时间大于30d,对照组小鼠血糖一直未降至正常,移植胰岛存活时间约为4d。实验组降糖速率明显快于对照组和糖尿病对照组（P〈0．05）。表明包裹胰岛的海藻酸钡微胶珠镶嵌在肌肉组织中可良好存活,治疗小鼠1型糖尿病。     

微胶珠化胰岛肌肉内移植治疗小鼠1型糖尿病

背景：前期实验证明海藻酸钡微胶珠具有免疫隔离作用,并且不会引起免疫排斥反应。 目的：观察包裹胰岛海藻酸钡微胶珠对1型糖尿病小鼠的治疗作用。 方法：分离纯化SD大鼠胰腺单个胰岛细胞团,并包裹于海藻酸钡微胶珠内。以腹腔注射链脲佐菌素诱导建立C57BL/6小鼠1型糖尿病模型,随机分组：实验组小鼠股二头肌内多点注射包裹胰岛的海藻酸钡微胶珠,对照组小鼠股二头肌内多点注射胰岛,糖尿病对照组及正常对照组小鼠股二头肌内多点注射生理盐水。术后观察小鼠血糖及胰岛微胶珠在肌肉内存在状况。 结果与结论：分离纯化后获得高纯度胰岛,每只供体可获得(905.4±34.5)个,并具有良好生物活性。实验组小鼠血糖降为正常的时间约为6.3 d,移植胰岛存活时间大于30 d,对照组小鼠血糖一直未降至正常,移植胰岛存活时间约为4 d。实验组降糖速率明显快于对照组和糖尿病对照组(P < 0.05)。表明包裹胰岛的海藻酸钡微胶珠镶嵌在肌肉组织中可良好存活,治疗小鼠1型糖尿病。     

几种ACA复式微囊的制备及药物释放研究

目的 :通过考察不同处方和工艺制备的吲哚美辛-海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(ACA)复式微囊的体外释放,研究复囊中药物释放的特点。方法:以吲哚美辛为模型药物,采用不同的交联剂CaCl2、BaCl2的制备工艺,结合液化囊心、冻干工艺制备复式微囊,考察复囊中药物在体外的释放。结果:药物在ACA复式微囊中释放比在单囊中缓慢,ACA-Ba-Ba复囊中药物释放最慢(释放90%药物要18～21 h);液化囊心后药物释放略有加快,冻干工艺使药物释放减慢;复囊中药物在人工胃液中2 h释放低于20%,在人工肠液中1 h释放超过90%。结论:ACA复式微囊能较好地控制药物达到缓释效果,有望成为一种新型药物缓释剂型。