NYGGF4基因过表达对成熟脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响

目的 探讨NYGGF4基因过表达对成熟3T3-L1脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响.方法 以3T3-L1前体脂肪细胞为载体,建立NYGGF4基因稳定过表达细胞株,以空载质粒转染的细胞为对照,将前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞.采用透射电镜观察成熟脂肪细胞的线粒体形态,采用荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中线粒体融合基因(Mfn)1 mRNA、Mfn2 mRNA、线粒体动态相关基因(Drp)1 mRNA的表达水平.采用Western blot方法检测Mfn1蛋白、Mfn2蛋白、Drp1蛋白的表达水平.结果 1.电镜观察发现NYGGF4基因过表达的成熟脂肪细胞线粒体体积变小、数量明显减少,线粒体嵴断裂、减少、消失,部分线粒体肿胀,甚至呈空泡状;对照组成熟脂肪细胞的线粒体形态基本正常,线粒体嵴清晰可见,线粒体无明显肿胀、皱缩.2.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞Mfn1 mRNA及Mfn1蛋白表达水平均显著高于对照组.3.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞的Mfn2 mRNA、Drp1 mRNA及相应蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义.结论 在3T3-L1成熟脂肪细胞中,NYGGF4基因过表达可导致线粒体形态发生变化、数量减少,同时上调Mfn1 mRNA和Mfn1蛋白表达水平,提示NYGGF4基因在成熟脂肪细胞中过表达能影响细胞线粒体形态及动力学.     

不同浓度葡萄糖和游离脂肪酸对大鼠骨骼肌细胞株L6细胞胰岛素敏感性和细胞内活性氧的影响

目的研究不同浓度的葡萄糖和游离脂肪酸（FFA）对骨骼肌L6细胞胰岛素敏感性及细胞内活性氧（ROS）的影响。方法L6细胞诱导分化成熟后,分为6组,以5mmol／L葡萄糖为低糖对照组,其中加0．3或1mmol／L的混合FFA为低糖低FFA或低糖高FFA组,以25mmol／L葡萄糖为高糖对照组,其中加0．3和1mmol／L的FFA的培养基为高糖低FFA或高糖高FFA组。干预48h,^3H—D葡萄糖摄取实验（加与不加100nmol／I,胰岛素37℃30rain）验证L6细胞胰岛素敏感性,经荧光探针H2DCFDA观察细胞内ROS含量的变化。结果在5mmol／L葡萄糖组,低糖对照组基础摄糖值为22777．6±6608．7,低糖低FFA组为26027．5±4085．7,低糖高FFA组为146805．1±21099．4。胰岛素刺激后,低糖对照组为76586．5±18450．1,低糖低FFA组为43738土9203．6,低糖高FFA组为32050．6±3362．3,较低糖对照组显著降低（P〈0．01）。在25mmol／L葡萄糖组,基础葡萄糖摄取量为11793．8±551．4,高糖低FFA组11887．3±2082．3高糖高FFA组为13886．1±3872．9,差别无统计学意义（P〉0．05）,但较低糖对照组显著降低（P〈0．01）．加入胰岛素刺激后,高糖对照组为42798．8±9441．5,高糖低FFA组为23946．9±3839．6,高糖高FFA组为13886．1±3872．9,各组之间差别显著（P〈0．01）。对细胞内R0s的研究发现,低糖低FFA组为2234．2±477．2,低糖高FFA组为1969．0±480．9,高糖对照组为1969．0土229．4,高糖低FFA组为2]84．5±734．2,高糖高FFA组为2571．3±96．7,可以显著增加的L6细胞内ROS,与低糖对照组（615．3±244．3）相比差别显著（P〈0．01）。除对照组之外的各组之间差别无统计学意义（P〉0．05）。结论高糖和高FFA可以诱导L6细胞出现氧化应激,同时高糖和高FFA是导致骨骼肌细胞胰岛素抵抗的重要原因之一。     

新生儿气漏的病因及防治(附42例报告)

新生儿气漏的常见原因有 :机械通气时气道压力过高、气道内梗阻和产伤。近年来由于加压呼吸广泛应用 ,新生儿气漏发病率增高。现将我院 1994年 1月～ 1999年 6月收治的 42例新生儿气漏分析报告如下。临床资料1.一般资料 :42例中男 2 8例 ,女14例 ;早产 4例 ,足月 33例 ,过期产 5例 ;剖宫产 9例 ,头吸助产 3例 ,产钳助产 2例 ,余均自然分娩 ;有明确窒息史2 5例 ( 13例为重度窒息 ) ,羊水Ⅲ 混浊15例 ,脐带绕颈 8例 ,胎膜早破 10例 ,低体重儿 5例 ,极低体重儿 1例。入院时间 :生后～ 12小时 18例 ,～ 2 4小时 6例 ,～ 3天 6例 ,～ 2 8天 12例 …     

miR-19b转基因小鼠的构建及表型分析

目的:构建心肌细胞特异性过表达miR-19b的转基因小鼠,并对其进行表型分析?方法:先确定载体插入的酶切位点,根据CloneEZ○Ｒ PCR Cloning Kit重组原理设计相应引物,以小鼠基因组为模板克隆出带有miR-19b前体序列(pre-miR-19b)的目的片段,利用重组酶连接到带有alpha-MHC 启动子的载体上?将所得载体线性化后,采用显微注射方法注射到小鼠胚胎干细胞内?再将所得的重组胚胎干细胞移植入假孕的C57BL/6J雌鼠子宫内,在所得的子代,即Founder小鼠中采用特异的引物鉴定出转基因小鼠,并选出相应的品系,进行表型分析?结果:成功构建miR-19b转基因小鼠,且miR-19b转基因小鼠舒张期室间隔厚度?舒张期左室游离壁厚度以及射血分数均有升高?结论:心肌特异性过表达miR-19b可以导致心脏肥大?     

30例尿道损伤的处理体会

共收治30例尿道损伤患者,其中施行尿道会师术6例,对端吻合术7例、单纯膀胱造瘘术6例、Foley氏导尿管牵拉术加U—O式缝合固定术3例、留置导尿管7例及预防感染1例。经随访1年效果较好,无死亡。体会,只要诊断正确、治疗及时、手术方法适当,均能获得好的效果。     

内镜专用口咽通气道在无痛胃镜中的应用

目的观察内镜专用口咽通气道作为一种新型配套咬口与口咽通道的联合体在无痛胃镜应用中的安全性和有效性。方法选择行无痛胃镜检查患者200例,男89例,女111例,年龄22～64岁,BMI 16～30 kg/m~2,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为两组:传统胃镜咬口组(C组)和内镜专用口咽通气道组(K组),每组100例。C组从传统胃镜咬口置入胃镜,K组从内镜专用口咽通气道配套咬口内置入口咽通气道,通过其置入胃镜。术中如有体动或呛咳时,则追加丙泊酚0.2～0.4 mg/kg。记录检查前、胃镜达幽门时和苏醒时MAP、HR、SpO_2;记录进镜时间、检查时间、苏醒时间、PACU停留时间、胃镜置入一次成功例数、胃镜置入难易度,记录患者舒适度、镜检医师满意度和不良反应发生情况。结果与C组比较,胃镜达幽门时K组SpO_2明显增高(P0.05)。与检查前比较,胃镜达幽门、苏醒时两组MAP明显降低、HR明显减慢,胃镜达幽门时C组SpO_2明显降低(P0.05)。与C组比较,K组胃镜一次置入成功率明显升高、胃镜进镜时间和PACU停留时间明显缩短、丙泊酚维持剂量明显减少、低血压发生率明显降低、患者舒适度和镜检医师满意度明显升高(P0.05)。结论内镜专用口咽通气道可作为无痛胃镜的有效气道辅助装置,增加通气效率,降低麻醉药用量,加速无痛胃镜的实施,既确保了无痛胃镜的安全,也提高了无痛胃镜的效率。     

CT图象的质量保证

随着影像医学的迅速发展，CT机广泛应用于临床，已经成为影像医学中的重要检查手段。一张优质的CT图象对疾病的诊断有极高极准的价值。那么该如何保证CT图象质量已备受重视，本文仅对影响CT图象质量问题以及解决办法结合实际工作体会做一总结。     

中药离子导入治疗骨质增生症830例

中药离子导入治疗骨质增生症８３０例张晓岫，朱春派，武春艳指导孟宪纾（解放军２０２医院沈阳１１０００３）关键词中药离子导入，骨质增生症骨质增生症，是中老年发病率高的一种病证。笔者通过对本病病机的辨证，综合传统的分型治疗［１］，本滋补肝肾、祛风胜湿、散寒...     

腹部肿块诊断的探讨

腹部肿块在临床上很常见,但确诊困难。本文收集我院1976午1月～1987年12月,外科收入的腹部肿块150例住院病例,并进行诊断探讨。 1 临床资料 1.1 一般情况男90例,女60例,年龄最大79岁,最小仅4个月,以40～60岁发病最多。 1.2 腹部肿块存在的部位及脏器①腹部肿块所在的部位:本组判别腹部肿块用的分区为六分法,肿块分别在中上腹部、右上腹、右下腹、左上腹、左下腹及下腹部;②腹部肿块所在的层次:腹壁肿块