神经病理性疼痛大鼠脊髓中MEK-ERK与NF-κB信号途径的变化

目的研究神经病理性疼痛大鼠脊髓中丝裂原激活/细胞外信号调节激酶-细胞外信号调节蛋白激酶(MEK-ERK)与核转录因子κB(NF-κB)信号途径的变化,探讨神经元和星形胶质细胞激活过程中信号途径的变化及意义。方法12只雌性SD大鼠(体重150～200g)随机均分为坐骨神经保留性神经损伤组(SNI组)和对照组(C组)。分别于术前3d、术后即刻、术后1、3、5、7、9、11d测定大鼠对机械刺激产生缩腿反应的次数。术后11d测定缩腿反应的次数后,每组取3只大鼠用于灌注,应用免疫组织化学方法检测脊髓丝裂原激活/细胞外信号调节激酶(MEK)、磷酸化丝裂原激活/细胞外信号调节激酶(p-MEK)、磷酸化细胞外信号调节蛋白激(p-ERK)、NF-κB的表达。另3只大鼠断头处死后分离L4～6脊髓,提取大鼠脊髓的蛋白质,应用WesternBlot方法检测p-MEK、p-ERK、NF-κB表达。结果SNI组p-MEK、p-ERK、NF-κB表达高于C组(P<0.05)。MEK表达于胞浆,p-MEK表达于细胞核;p-ERK主要表达于星形胶质细胞。结论在神经病理性疼痛大鼠脊髓中,星形胶质细胞MEK-ERK信号途径被激活,脊髓背角深层神经...     

Effect of isoflurane on expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-α mRNA In the hippocamapus of immature rats

Obiective To investigate the effect ofisoflurane on expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-α mRNA in the hippocampus of immature rats.Methods sixty-four 7-clay-old SD rats were randomly assigned into 2 groups(n=32 each):control group(group C)and isoflurane group(group S).group S was exposed to 1.5% isoflurane for 6 h while group C to air.Fore animals were killed before anesthesia(T0,baseline),at 2,4,6 h(T1-3)of isoflurane anesthesia and 4,6,12 and 24 h after anesthesia(T4-7).The hippocampi were immediately removed for determimation of the expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-α mRNA by RT-PCR.Results Compared with group C,the expression of IL-1β mRNA at T1-5,IL-6 mRNA at T2.3 and TNF-α mRNA at T1-6 in the hippocampus was upregulated in group S.Conclusion The expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-β mRNA was elevated in the hippocampus of immature rats after being exposed to isoflurane.     

氯胺酮对大鼠海马神经元CREB磷酸化水平的影响

目的 探讨氯胺酮对大鼠海马神经元cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平的影响.方法 原代培养1 d龄SD大鼠海马神经元5 d,随机分为对照组(C组)和氯胺酮组(K组),每组6孔.K组在终浓度为1 000 μmol/L氯胺酮的Neurobasel培养液中孵育3 h,C组不做任何处理.采用流式细胞仪Aanexin V-PI共染法检测凋亡神经元,计算神经元凋亡率;采用免疫组化法测定神经元Ser133位点磷酸化的CREB(pCREB)表达水平;采用RT-PCR法半定量测定CREB下游基因脑源性生长因子(BDNF)mRNA和抑凋亡基因Bcl-2 ndlNA的表达.结果 与C组相比,K组神经元凋亡率升高,pcREB、BDNFmRNA及Bcl-2 mRNA的表达均下调(P＜0.01).结论 氯胺酮可能通过抑制CREB磷酸化,下调BDNF及Bcl-2表达,诱导新生大鼠海马神经元凋亡.     

米诺环素对异氟醚诱导的发育期大鼠神经元毒性的保护作用

目的 观察米诺环素对异氟醚诱导的发育期大鼠神经元毒性的保护作用.方法 取新生SD大鼠皮层,随机分为四组,每组10只.正常对照组(C组)神经元在37℃空气处理6h,异氟醚麻醉组(A组)神经元在37℃下用1.5%异氟醚处理6h,米诺环素1μmol/L组(M1组)和米诺环素10μmol/L组(M2组)神经元分别在异氟醚处理10 min前加入米诺环素1μmol/L、10μmol/L.相差显微镜下观察四组神经元形态,TUNEL法检测神经元凋亡,MTT法检测神经元活性.结果 A组神经元胞体肿胀、变形且与M1组神经元形态接近;M2组神经元形态改变不明显且与C组相近.MTT结果 显示,与C组、M2组相比,A组、M1组神经元活性显著降低(P＜0.05),凋亡神经元数目显著增多(P＜0.05).结论 米诺环素能减轻异氟醚诱导的发育期大鼠神经元毒性,具有保护作用.     

异氟烷麻醉对发育期大鼠神经元凋亡及远期学习记忆的影响

目的 观察异氟烷麻醉对发育期大鼠神经元凋亡及远期学习记忆能力的影响,明确两者的关系.方法 7日龄SD大鼠32只,随机分为对照组(C组)和异氟烷麻醉组(A组).A组大鼠在35℃恒温下1.5%异氟烷麻醉6 h,C组自主吸入空气6 h.每组取3只大鼠,行动脉血气分析.每组各另取3只大鼠用免疫组织化学法检测大脑皮层active Caspase-3阳性神经元,计算阳性率.其余大鼠继续饲养至出生后60 d,行Morris水迷宫实验.后用免疫组织化学法检测大脑NeuN表达,比较两组大鼠皮层神经元密度.结果 两组大鼠动脉血气分析结果差异无统计学意义.A组大鼠皮层active Caspase-3阳性神经元数量明显多于C组(P ＜0.05).水迷宫实验结果显示,两组大鼠在寻台潜伏期、目标象限停留时间和穿越平台次数等指标上的差异均无统计学意义.两组大鼠皮层神经元密度相当.结论 1.5%异氟烷麻醉6 h能诱导发育期大鼠皮层神经元凋亡增加,但是对远期学习记忆能力没有影响.     

类风湿性关节炎特异性B淋巴细胞的分选与鉴定

目的 探讨通过免疫磁珠分选法分离类风湿性关节炎特异性B淋巴细胞效果.方法 取10只正常Lewis大鼠(对照组)和10只降植烷诱导的类风湿性关节炎大鼠(实验组),取静脉血通过ELISA检测类风湿因子(RF),取脾细胞检测B细胞的数量和类风湿特异性B细胞的数量,通过免疫磁珠分选出特异性B细胞,将获得的细胞通过流式细胞仪检测分选效率.结果 对照组RF的OD值比值为0.92±0.21,实验组为3.14±0.36(P<0.05),差异有统计学意义.对照组B细胞的数量为(3.26±0.91)×108,RF特异性B细胞为(1.52±1.21)×107,实验组B细胞的数量为(3.14±0.36)×108,RF特异性B细胞为(6.63±0.96)×107,实验组RF特异性B细胞明显多于对照组(P<0.05),差异有统计学意义,免疫磁珠分选效率为95%.结论 通过免疫磁珠分选法能够获得类风湿性关节炎特异性B细胞.     

异氟醚麻醉对新生大鼠海马激活肌细胞增强因子2信号通路的影响

目的 探讨异氟醚麻醉对新生大鼠海马激活肌细胞增强因子2(MEF2)信号通路的影响.方法 取出生5 d的SD大鼠24只,雌雄不拘,体重10～13 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为2组(n=12):对照组(C组)和异氟醚组(I组).I组大鼠放置在密闭箱中,吸人1.5%异氟醚和纯氧,吸入时间6 h,C组不做任何处理.于异氟醚麻醉2、4、6 h和麻醉结束后24 h(T1-4)时(C组于相应时点)分别取3只大鼠,断头处死,取海马组织,采用RT-PCR法测定MEF2mRNA、synGAPⅠ mRNA和Arc mRNA及突触素Ⅰ mRNA的表达水平,采用Westrn blot法测定突触素Ⅰ蛋白的表达水平.结果 与C组比较,I组T1-3时海马MEF2mRNA、synGAP Ⅰ mRNA、Arc mRNA和突触素Ⅰ mRNA、T2-4时海马突触素Ⅰ蛋白表达水平均上调(P＜0.05).结论 吸入麻醉浓度的异氟醚可能通过激活新生大鼠海马MEF2信号通路从而影响发育期突触的形成.

Abstract：

Objective To investigate the effects of isoflurane anenthesia on myocyte enhancer factor 2(MEF2) signaling pathway in neonatal rat hippocampus. Methods Twenty-four 5-day-old SD rats of both sexes,weighing 10-13 g, were randomly divided into 2 groups ( n = 12 each): control group (group C) and isoflurane group (group I). In group I, 1.5% isoflurane in 100% O2 was inhaled for 6 h. Group C received no treatment.Three rata in each group were sacrificed at 2, 4, 6 h of isoflurane anenthesia and 24 h after isoflurane anenthesia (T1-4), and the hippocampi removed for determination of MEF2 mRNA, synGAP Ⅰ mRNA, Arc mRNA and synapsinⅠ mRNA expression (by PT-PCR) and synapsin Ⅰ protein expression (by Western blot).Results Compared with group C, the expression of MEF2 mRNA, synGAP Ⅰ mRNA, Arc mRNA and synapsin Ⅰ mRNA at T1-3 and synapsin Ⅰ protein at T2-4 was up-regulated in group I ( P ＜ 0.05). Conclusion Inhalation of anaesthetic concentration of isoflurane may affect synapse formation during the development of central nervous system by actirating hippocampal MEF2 signaling pathways in neonatal rats.     

麻醉期间目标导向液体治疗对胶质瘤开颅切除术患者预后的影响

目的探讨麻醉期间目标导向液体治疗(GDT)对胶质瘤开颅切除术患者预后的影响,为神经外科患者的液体管理提供理论依据。方法将40例胶质瘤患者随机分为对照组(C组)和目标导向组(G组)。C组:根据患者术中平均动脉压(MBP)、心率(HR)、中心静脉压(CVP)等行常规液体治疗;G组:在Vigileo监护仪指导下,根据每搏量变异度(SVV)行目标导向液体治疗。分别于术前30min(T1)、手术开始后1h(T2)、术毕(T3)、术后6h(T4)、术后24h(T5)、术后48h(T6)采集颈内静脉血,T1～T3采集动脉血行血气分析[血氧分压(PO2)、血氧饱和度(SO2)、血细胞比容(Hct)、血红蛋白(Hb)、乳酸、渗透压],于T1～T6采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中S100-β浓度,监测T1～T3血液动力学指标并计算氧供指数(DO2I),同时记录两组患者术后发生感染、脑水肿的人数以及术后住院时间。结果与C组比较,G组术后住院时间缩短,术毕MBP、CVP、心指数(CI)、中心静脉氧饱和度(ScvO2)及DO2I增加,术毕以及术后6h血乳酸浓度降低,术后6h血S100-β浓度降低(均P<0.05),两组患者术后均无感染以及脑水肿发生。结论 GDT有利于改善胶质瘤开颅切除术患者的预后。     

异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响

目的 探讨异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响.方法 出生7 d的SD大鼠64只,随机分为2组(n=32):对照组(C组)和异氟烷麻醉组(I组).I组大鼠吸入1.5%异氟烷麻醉6 h,C组吸入空气.I组于麻醉前(T0,基础状态)、麻醉2 h(T1)、4 h(T2)、6 h(T3)、麻醉停止后4 h(L)、6 h(T5)、12 h(T6)、24 h(T7)时,C组在对应时点各取4只大鼠,测定海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA及TNF-α mRNA的表达水平.结果 C组各时点海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA比较差异无统计学意义(P＞0.05);与C组比较,I组海马T1～5 时IL-1βmRNA表达上调,T2,3 时IL-6 mRNA表达上调,T1～6时TNF-α mRNA表达上调(P＜ 0.05).结论 1.5%异氟烷麻醉可短暂上调发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA的表达.     

Effect of isoflurane on expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-α mRNA In the hippocamapus of immature rats

Obiective To investigate the effect ofisoflurane on expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-α mRNA in the hippocampus of immature rats.Methods sixty-four 7-clay-old SD rats were randomly assigned into 2 groups(n=32 each):control group(group C)and isoflurane group(group S).group S was exposed to 1.5% isoflurane for 6 h while group C to air.Fore animals were killed before anesthesia(T0,baseline),at 2,4,6 h(T1-3)of isoflurane anesthesia and 4,6,12 and 24 h after anesthesia(T4-7).The hippocampi were immediately removed for determimation of the expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-α mRNA by RT-PCR.Results Compared with group C,the expression of IL-1β mRNA at T1-5,IL-6 mRNA at T2.3 and TNF-α mRNA at T1-6 in the hippocampus was upregulated in group S.Conclusion The expression of IL-1β mRNA,IL-6 mRNA and TNF-β mRNA was elevated in the hippocampus of immature rats after being exposed to isoflurane.