白细胞介素-2和10 mRNA表达差异在CD4+CD25+T细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受中的意义

目的 探讨白细胞介素-2(IL-2)mRNA及IL-10 mRNA表达水平对大鼠肝移植耐受的影响.方法 将实验大鼠随机分3组:Ⅰ组为急性排斥组; Ⅱ组为CD4+CD25+T细胞处理组,供体Wistar大鼠,受体SD大鼠;Ⅲ组为移植对照组,供体、受体均为SD大鼠.每组12对.肝移植前7 d,Ⅱ组受体大鼠经阴茎背静脉注射含供体脾淋巴细胞的培养液,Ⅰ组、Ⅲ组注射等量生理盐水;术后7 d随机取6只大鼠用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝组织中细胞因子IL-2 mRNA及IL-10 mRNA的表达,用流式细胞仪检测各组移植肝内分离出的淋巴细胞含量,同时检测肝脏病理学的变化;另6只观察移植大鼠的生存期.结果 IL-2mRNA在Ⅰ组大鼠移植物内出现高表达,Ⅱ组仅有微弱表达,Ⅲ组则未见表达,IL-10 mRNA仅在Ⅱ组中表达,且表达程度较强.Ⅱ组和Ⅲ组大鼠存活期均超过30 d,与Ⅰ组(8～11 d)比较差异有统计学意义(P均＜0.01).Ⅰ组大鼠移植后肝脏有大量淋巴细胞浸润,数量明显高于Ⅱ组和Ⅲ组[(14.31±3.41)×106 /g比(5.04±1.13)×106 /g和(1.55±0.40)×106 /g,P均＜0.01],且显示中度排斥反应.Ⅱ组大鼠有中等量淋巴细胞浸润,病理为无排斥或不确定性排斥,且淋巴细胞中CD4+百分比[(43.31±8.07)%]和CD4+CD25+百分比C(11.39±1.92)%]均显著高于Ⅰ组[(33.65±7.25)%,(3.05±0.62)%]和Ⅲ组[(31.18±6.52)%,(3.37±0.72)%],差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).Ⅲ组未见明显淋巴细胞浸润,病理为无排斥反应.结论 IL-2参与了移植排斥的发生,而IL-10在CD4+CD25+T细胞诱导免疫耐受中具有非常重要的作用.     

肾创伤的生物力学性质及其临床特点

目的总结肾创伤生物力学性质及其临床特点。方法回顾本院2000年1月至2006年1月间收治的326例肾创伤病例,分析创伤过程中生物力学因素发挥的临床效应。结果随着暴力动量的增大,肾创伤等级、肾切除率及死亡率均随之增高,有统计学意义(P＜0．05)。钝性暴力相对于锐性更容易造成闭合伤和合并伤,且肾切除率低,差异有统计学意义(P＜0．01)。后腰着力的肾伤情重于腹部正面或侧面着力,且合并伤发生率低(P＜0．05)。创伤瞬间速度变化的趋向对伤情等级、肾切除率及死亡率无明显影响(P＞0．05)。结论肾创伤过程中暴力的生物力学性质与其临床表现紧密相关。     

Lnc-FAM83D-3通过miR-504-3p—FAM83D轴调控三阴性乳腺癌的机制研究

目的探讨长链非编码RNA FAM83D 3 (lnc FAM83D 3) 在三阴性乳腺癌（TNBC）中的表达及其对HCC1937、MDA MB 231生物学行为的影响及作用机制。方法通过TCGA数据库分析lnc FAM83D 3在乳腺癌中的表达情况及病理相关性。RT qPCR检测lnc FAM83D 3和微小RNA 504 3p (miR 504 3p）在组织标本和乳腺癌细胞系中的表达；慢病毒转染干扰lnc FAM83D 3表达，利用MTT、细胞划痕实验、侵袭实验和流式细胞术检测实验组与对照组细胞功能改变。使用生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验分析lnc FAM83D 3和miR 504 3p及FAM83D之间的关系。FISH实验证实lnc FAM83D 3在胞浆内的表达，Western bolt检测下游蛋白变化情况。结果在乳腺癌组织、癌细胞HCC1937和MDA MB 231中lnc FAM83D 3的表达增加(P<001)。与对照组相比，干扰lnc FAM83D 3表达后，TNBC细胞株增殖、迁移和侵袭能力降低，凋亡比例增加; miR 504 3p表达上升，FAM83D表达下降；双荧光素酶报告基因实验结果显示lnc FAM83D 3靶向调控miR 504 3p表达，miR 504 3p进一步负向调控FAM83D的水平。结论Lnc FAM83D 3在TNBC细胞株中表达增加且通过抑制miR 504 3p促进FAM83D表达，影响乳腺癌恶性生物学行为。     

锰苯甲酸卟啉干预活性氧在小肝移植物缺血再灌注损伤中的作用及其意义

目的 观察锰苯甲酸卟啉(MnTBAP)对SD大鼠小肝移植物模型缺血再灌注损伤的治疗及保护作用.方法 采用二袖套法建立供肝/标准肝体积比(GV/SV)≤30%的小肝移植物大鼠模型,将大鼠随机分为A:假手术组(n=24),B:对照组(n=24),C:MnTBAP治疗组(n=24),于复流后3、6、12、24 h各取6只处死取材,检测各组大鼠肝组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA表达、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、肝功能指标和肝细胞凋亡间的状态.结果 与假手术组比较,对照组肝组织TNF-α mRNA及MDA、MPO含量显著升高(P<0.01),肝丙氨酸转氨酶(ALT)活性显著升高(P<0.01),肝细胞凋亡明显增多(P<0.01);而MnTBAP治疗组的肝组织MDA、MPO含量较对照组显著降低(P<0.05),肝细胞凋亡减少,且在术后6、12、24 h,肝TNF-α mRNA表达均下降(P<0.05),血清ALT水平也明显降低(P<0.01).结论 MnTBAP可以抑制中性粒细胞的呼吸爆发,降低肝组织TNF-α mRNA表达、减轻细胞膜损伤程度,对缺血肝损伤有良好的保护作用.     

合并肾创伤严重创伤的诊断与治疗

目的 总结多发伤、复合伤中合并性肾创伤的临床特点和诊疗策略.方法 回顾2000年1月～2006年1月间收治的223例合并性肾创伤的诊疗过程,结合相关文献加以分析和总结.结果 肾创伤保守疗法治愈169例172侧(75.8%);随首要伤同时接受血管介入疗法,治愈27例27侧(12.1%);随首要伤接受开放手术,治愈17例19侧(7.6%).死亡总数10例,其中参与构成死亡原因5例.结论 合并性肾创伤临床表现不突出,影像学检查仍然是建立诊断的重要手段,充分利用首要伤治疗的时机同期救治是其重要的治疗策略.     

闭合性肝创伤生物力学分析及其临床意义

闭合性肝创伤占腹部外伤的15％～20％，单器官创伤死亡率10％，复杂创伤死亡率可高达50％。准确判断伤情，选择恰当的治疗方法，是成功救治的关键。回顾我院自1998年12月～2003年12月收治的62例闭合性肝创伤病例，应用生物力学原理评价伤情及其疗效，报道如下。     

临床推广乳腺癌前哨淋巴结活检技术的影响因素分析

多种因素可以影响乳腺癌前哨淋巴结活检技术的临床推广应用。首先，医疗技术进步的阶段性成果决定了SLNB不能短期内普及；其次，专业技术人才素质的良莠不齐不利于SLNB的普及；第三，社会人文因素对SLNB普及的制约；第四，医患关系的不和谐对开展SLNB的负面影响。提出了解决措施，为临床推广应用SLNB治疗乳腺癌提供了方法论。     

锰苯甲酸卟啉和缺血预处理对小肝移植物缺血再灌注损伤中核因子通路的影响

(ALT)活性亦显著减低(P＜0.01),而C组的肝组织MDA含量在复流后3 h分别较A、B、D组显著降低(P＜0.05);I-κB在3、6、12 h的表达也较A、B组明显下降(P＜0.05).结论 MnTBAP与缺血预处理治疗比较,可以显著降低肝组织损伤程度,对肝损伤有较好的保护作用,但两者联合应用不能进一步减轻肝损伤,可能与发挥保护作用时存在共同通路有关.     

不同给药途径对大鼠急性胰腺炎治疗作用的差异

目的：探讨经不同途径给药对急性置症胰腺炎(SAP)大鼠不同脏器损伤的治疗效果。方法：SD大鼠46只，随机分为4组：①组1 对照组(假手术组)10只；②组2 急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)经腹腔动脉给药组12只；③组3 AHNP经尾静脉给药组12只；④组4 AHNP组12只；用药组分别在造模后12h给药，持续8h，24h后取材，测血清磷脂酶A2(PLA2)浓度；观察肝、肺组织中肿瘤坏死因子-αmRNA(TNF-αmRNA)的表达变化，取部分肝、肺、胰腺组织作病理学检查。结果：与组4比较，组2门静脉血清PLA2浓度明显降低(P＜0．05)，肝组织中TNF-α mRNA的表达减少(P＜0．05),而肺组织中TNF-αmRNA的表达与组4差异无显著性(P＞0．05)；组3门静脉血清PLA2浓度下降不明显(P＞0．05)，肺组织中TNF-α mRNA的表达减少(P＜0．05)，而肝组织中TNF-α mRNA的表达与组4无差异(P＞0．05)。结论：药物对胰腺炎的治疗作用与给药途径相关，腹腔动脉灌注可减少SAP大鼠胰腺坏死面积,减低门静脉血PLA2的活性，使肝组织中TNF-αmRNA的表达量明显下降，但对肺组织中TNF-α mRNA的表达影响小。外周静脉给药对肺脏有保护作用。     

基质金属蛋白酶-9 与小体积移植肝早期损伤的相关性研究

目的 观察不同体积肝移植术后早期移植肝内基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及活化特点,探讨MMP-2和MMP-9在小体积移植肝早期损伤中的作用机制. 方法 随机将108只SD大鼠分成3组,每组36只.分别为:全肝(100%肝体积)移植组、半肝(50%肝体积)移植组和小体积肝(25%肝体积)移植组.分别检测移植肝再灌注后0.5、6、12、24、48、72 h的肝功能及移植肝组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)浓度,观察移植肝组织病理学特征,并运用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量聚合酶链反应(PCR)、明胶酶谱和免疫组织化学方法检查移植肝中MMP-2和MMP-9的表达情况. 结果 与全肝和半肝移植组比较,小体积肝移植组再灌注后6～24 h MMP-9表达明显升高;而且MMP-9活化和表达增高伴随着移植肝功能损害和严重的缺血再灌注损伤.MMP-9早期表达都集中在移植肝门静脉周围,与门静脉高灌注密切相关. 结论 MMP-9表达升高是小体积移植肝早期重要的致损伤因素;肝移植术后门静脉高灌注可能是触发MMP-9活化和表达的重要原因.