术前CTA精准定位胫后动脉穿支皮瓣修复手部创面的应用研究

目的 探讨术前计算机断层扫描血管造影(CTA)精准定位胫后动脉穿支皮瓣在手部创面中的应用价值.方法 回顾性分析2017年3月—2019年6月中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院骨科收治的8例手部软组织缺损患者临床资料,男性6例,女性2例;年龄20～55岁,平均35.6岁.致伤原因:机器绞伤4例,切割伤3例,电击伤1例.依据术前CTA观测胫后动脉穿支数量及穿出点位置,设计并切取游离胫后动脉穿支皮瓣修复手部创面,测量皮瓣切取面积,观察皮瓣移植术后成活情况,记录供区创面闭合方式,观察手功能恢复效果.结果 下肢CTA可观察到胫后动脉穿支平均数量为:左侧3.3支,右侧3.9支,每个穿支以距内踝距离精确定位.依据CTA观测结果设计胫后动脉穿支皮瓣,皮瓣均顺利切取,皮瓣切取面积:2cm×4cm～6cm×10cm,小腿供区6例直接缝合,2例植皮.术后皮瓣均存活,无血管危象、皮瓣坏死发生,供区创面均顺利愈合,手功能恢复良好.结论 术前CTA精准定位能准确观察并测量胫后动脉穿支血管走形、位置,为皮瓣设计提供了影像学依据.游离胫后动脉穿支皮瓣不牺牲主干血管,厚度适中,是修复手部创面理想的选择之一.     

大鼠脊髓圆锥损伤后大脑排尿功能区变化的实验研究

目的观察大鼠脊髓圆锥损伤后大脑排尿功能区结构变化和Bcl-2的表达情况,探讨大脑排尿功能区退变的可能因素。方法成年雌性SD大鼠36只,随机分为实验组(n=30)和对照组(n=6)。实验组将大鼠L4以下脊神经切断制作脊髓圆锥损伤模型,对照组不作任何处理。实验组大鼠手术全部成功,术后3、5个月分别死亡1只大鼠,原因可能是肾功能衰竭及尿路感染。实验组于术后1 d、1周以及1、3、6个月分别处死6、6、6、5、5只大鼠,对照组相同时间点各处死1只大鼠,取脑桥被盖背外侧部组织,行HE染色和Bcl-2免疫组织化学SP染色观察。结果 HE染色示,术后1 d,实验组和对照组无明显区别,神经元细胞密集,排列整齐,核仁清楚;1周,实验组可见神经元细胞周围间隙稍增宽;1个月,实验组部分神经元出现细胞核固缩;3、6个月,实验组细胞核固缩的细胞越来越多,甚至部分细胞出现核消失。Bcl-2免疫组织化学SP染色示,对照组Bcl-2表达呈弱阳性。实验组术后1 d即出现Bcl-2阳性表达,术后7 d Bcl-2阳性表达较对照组明显升高,并达高峰,术后1、3、6个月Bcl-2阳性表达逐渐下降,但仍高于对照组。结论大鼠脊髓圆锥损伤后大脑排尿中枢出现组织退变、细胞坏死,Bcl-2表达升高可能与组织修复、大脑功能重塑有关。     

MAGE1及NCAM在人小细胞肺癌中的表达

目的研究黑色素瘤抗原基因-1（MAGE1）及神经细胞粘附分子（NCAM）在小细胞肺癌NCI—H446细胞株及其裸鼠原位移植瘤、皮下瘤组织内的表达水平及分布特征。方法人小细胞肺癌细胞株NCI—H446细胞株及其裸鼠原位移植瘤组织行免疫组化染色，观察MAGE1及NCAM分别在小细胞肺癌的分布情况。免疫印迹法比较上述两种抗原在体内外蛋白中表达水平的高低。结果MAGE1及NCAM在NCI—H446细胞株及其裸鼠原位移植瘤组织的细胞膜及细胞浆中表达，并且体内外表达无明显差异。结论MAGE1及NCAM在人小细胞肺癌NCI—H446细胞内及肿瘤组织内呈稳定高表达，这两种抗原有望成为小细胞肺癌的靶点。     

胫神经和腓总神经损伤修复后相应脊髓节段神经元细胞Bcl-2、Bax蛋白表达差异的实验研究

目的比较大鼠下肢同一平面胫神经、腓总神经损伤修复后相应脊髓节段神经元细胞Bcl-2、Bax蛋白表达差异。方法雄性SD大鼠90只随机分为3组:A组为对照组,B组为胫神经切断缝合组,C组为腓总神经切断缝合组。分别于术后1、3、7、14、28 d取大鼠L4~6节段脊髓进行HE染色,计算脊髓前角运动神经元数量,采用免疫组化检测Bcl-2、Bax蛋白表达差异,并计算Bcl-2/Bax比值。结果 A组术后脊髓组织未见明显异常,B、C组术后可见脊髓组织结构紊乱,神经元细胞水肿、坏死。术后1、3、7、14 d,B、C组脊髓前角运动神经元数目均小于A组(P0.01)。术后3、7、14、28 d,B组脊髓前角运动神经元数目显著多于C组(P0.01)。B、C组Bcl-2蛋白表达出下降后上升的趋势,分别于术后3、7 d下降至低谷;B、C组Bax蛋白表达呈现出先上升后下降趋势,均于术后3 d上升至高峰;B、C组Bcl-2/Bax比值呈现出先下降后上升趋势,术后3、7、14、28 d,B组Bcl-2/Bax比值显著高于C组(P0.01)。结论大鼠下肢同一平面胫神经和腓总神经损伤后都会导致近端脊髓神经元细胞出现凋亡,但是和腓总神经损伤相比,胫神经损伤后对近端神经元退变死亡的影响较小。     

大鼠脊髓损伤后局部应用聚乙二醇的抗神经纤维溃变研究

目的:探讨大鼠脊髓损伤后局部应用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)的抗神经纤维溃变作用。方法:选取健康雄性Wistar大鼠,所有动物随机分为对照组和PEG治疗组。各组动物制作脊髓横断损伤模型。PEG治疗组大鼠在脊髓横断后,蛛网膜下腔立即注射PEG。对照组大鼠用生理盐水代替PEG,其余步骤相同。各组大鼠存活1、2、3 d后处死取材。标本切片后分别进行Massons染色和免疫荧光染色,比较各组切片每个高倍视野内的神经纤维溃变轴索球数目。其余动物麻醉后取出新鲜脊髓标本,制成匀浆后用免疫印迹法测定脊髓组织内钙蛋白酶(m-calpain)和神经丝蛋白(neurofilement,NF-200)降解产物的相对含量。结果:(1)对照组脊髓损伤部位大量炎症细胞浸润,组织坏死严重,损伤近侧端的轴索球明显多于PEG治疗组;PEG治疗组炎症反应较轻,组织坏死不明显,轴索球数目少于对照组。(2)PEG治疗组脊髓组织内m-calpain以及NF降解产物的含量均显著低于对照组。结论:大鼠脊髓损伤早期局部应用PEG可以有效减轻神经纤维的溃变。     

角膜穿通伤后炎症因子的表达特征及其在房水中相对含量的动态变化

目的 研究角膜穿通伤后炎症因子在眼球壁的分布特征及其在房水中相对含量的动态变化,初步探讨角膜穿通伤后眼内炎的发病机制.方法 清洁级成年雌性SD(Sprague Dawley)大鼠50只,随机分为正常对照组和角膜穿通伤后6h、24h、48h、72h组,每组各10只.角膜穿通伤组大鼠制作角膜穿通伤模型,分别用免疫荧光染色法检测损伤后各时间点眼球壁组织中热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-10的组织定位;并用免疫印迹法分别检测损伤后各时间点房水中上述因子相对含量的动态变化.结果 HSP90、IL-10、TNF-α和IL-1β在正常房水和眼球组织中含量较少.HSP90于损伤后6 h在房水中含量达到高峰,与其他各组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05),随后逐渐减少,免疫荧光染色结果显示其主要表达于视网膜视锥和视杆细胞层;TNF-α、IL-1β于损伤后24 h在房水中达到高峰,与其他各组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05),之后逐渐减少,主要表达于角膜、睫状体、视网膜;IL-10于损伤后72 h在房水中含量达到高峰,与其他各组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05),主要表达于角膜和视网膜.结论 角膜穿通伤后应激反应可促使眼球局部炎症因子的表达,导致继发性炎症损伤角膜穿通伤后应早期局部使用免疫抑制剂抑制炎症反应,保护眼球壁组织细胞.     

经改良设计的骨髓穿刺输液针输液复苏失血性休克犬效果的实验研究

目的评价自行改良设计的骨髓穿刺输液针对失血性休克犬的复苏效果。方法雄性Beagle犬12只,体重8~11Kg,采用随机数表法平均分为2组,失血性休克组(对照组)和改良骨髓穿刺针输液组(实验组)。经一侧股动脉放血建立休克模型。对照组仅建立休克模型,实验组经股骨远端骨髓腔穿刺输入生理盐水,观察两组心率、平均动脉压、血红蛋白含量、血细胞压积的改变。结果休克后,对照组平均动脉压、血红蛋白含量、血细胞压积和实验组相比在各时间点均无明显差异(>0.05),复苏后30、60、90分钟,对照组心率、血红蛋白含量、血细胞压积均显著高于实验组(<0.05),实验组平均动脉压在各时间点均显著高于对照组(<0.05)。通过穿刺针输入美兰溶液,未发现穿刺点渗液。结论改良自行设计的骨髓穿刺输液针对失血性休克犬的复苏效果良好。     

3D打印、逆向工程技术结合体外模拟手术辅助寰枢椎置钉治疗Ⅱ型齿突骨折

目的探讨3D打印、逆向工程技术结合体外模拟手术辅助寰枢椎置钉治疗Ⅱ型齿突骨折的准确性和安全性。方法回顾性分析2010年1月—2018年3月接受椎弓根螺钉内固定治疗的23例Ⅱ型齿突骨折患者临床资料。其中12例常规徒手置入C_(1,2)椎弓根螺钉(徒手组);11例在利用3D打印和逆向工程技术实施体外模拟手术成功后,术中利用导航模板辅助置入C_(1,2)椎弓根螺钉(导航组)。记录手术时间、术中出血量、住院时间及置钉偏差率。手术前后采用疼痛视觉模拟量表(VAS)评分和美国脊髓损伤协会(ASIA)分级评估疗效。结果所有手术顺利完成,术中无脊髓损伤、椎动脉损伤等严重并发症发生。所有患者随访超过6个月。导航组手术时间、术中出血量及置钉偏差率均低于徒手组,差异均有统计学意义(P 0.05)。2组术后6个月VAS评分均较术前显著改善,差异有统计学意义(P 0.05),组间比较差异无统计学意义(P 0.05)。徒手组术前ASIA分级D级4例、E级8例,导航组术前D级3例、E级8例,术后均为E级。结论 3D打印、逆向工程技术结合体外模拟手术辅助寰枢椎置钉治疗Ⅱ型齿突骨折,置钉方案完全个性化,提高了置钉的准确性和安全性,是一种安全有效的辅助置钉手段。     

角膜穿通伤后视网膜钙蛋白酶、细胞骨架蛋白α-Ⅱ spectrin和NF200的分布及其相对含量

目的观察角膜穿通伤后钙蛋白酶(m-calpain)、血影蛋白(α-Ⅱspectrin)及神经丝蛋白-200(neurofilament protein-200,NF200)在视网膜中的分布特征,检测骨架蛋白降解产物相对含量的动态变化,初步探讨角膜穿通伤后视网膜继发性损伤的病理机制。方法清洁级成年雌性SD大鼠50只,随机分为正常对照组和角膜穿通伤后6h、24h、48h、72h组,每组各10只。于眼球颞侧角膜缘用无菌注射器刺穿角膜制作角膜穿通伤模型。各组5只大鼠制作眼球切片,用相应抗体免疫荧光染色,观察m-calpain、α-Ⅱspectrin和NF200在视网膜中的分布特征;同时用免疫印迹法检测各组另外5只大鼠眼球壁组织中上述蛋白相对含量的动态变化。结果正常对照组m-calpain主要分布于视网膜节细胞,组织中蛋白相对含量较低;角膜穿通伤组组织中阳性细胞数量增多,蛋白相对含量亦增高,于24h达高峰,各组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。正常对照组α-Ⅱspectrin和NF200主要分布于各种视细胞突起内,细胞界限和层次较清楚;角膜穿通伤组免疫荧光呈弥散分布,细胞界限和层次模糊不清;组织中α-Ⅱspectrin和NF200降解产物相对含量随m-calpain含量增高而增高,于24h达最大量,各组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论角膜穿通伤可刺激视网膜细胞高表达m-calpain,后者对视网膜细胞骨架蛋白的降解是造成视网膜继发性损伤的重要因素。     

光化学损伤单侧运动皮质致大鼠后肢痉挛性偏瘫模型的建立

目的 观察光化学损伤大鼠单侧运动皮质建立后肢痉挛性偏瘫模型的可行性.方法 20只大鼠随机分为A、B两组.A组大鼠注射光敏性化学物质赤藓红B后,激光照射损伤左侧大脑运动皮质,B组大鼠不损伤皮质.分别以术前及术后3、7、14、28 d的H反射频率依赖性抑制(RDD)来判断两组大鼠双侧后肢肌肉痉挛情况.术后28 d以霍乱毒素行脊髓前角运动神经元逆行示踪及囊泡型谷氨酸转运体1(VGLUT1)免疫荧光染色.同时取大脑组织切片行H-E染色观察脑损伤部位的组织病理学改变.结果 在术后3、7、14和28 d,A组大鼠右后肢跖肌H反射RDD较B组右后肢减弱(P＜0.01),A、B两组左后肢跖肌H反射RDD差异无统计学意义(P＞0.05).A组脊髓前角运动神经元胞体及突起上VGLUT1的数量较B组增加(P＜0.01).脑组织H-E染色可见A组大鼠左侧大脑皮质缺损,而B组无明显损伤.结论 损伤大鼠单侧运动皮质,可造成对侧后肢痉挛性偏瘫.