RON变异体RON△170对自身酪氨酸磷酸化变异体RON△160的显性抑制作用

目的研究受体型酪氨酸激酶RON的变异体RON△170对RON的自身酪氨酸磷酸化变异体RON△160的作用。方法NIH-3T3和3T3-RON△160细胞转染质粒pcDNA3．1-RON△170,建立3T3-RON△170和3T3-RON△160△170细胞株;流式细胞仪检测RON△170蛋白的表达：免疫沉淀法检测RON的酪氨酸磷酸化：软琼脂培养法观察RON△170对3T3和3T3-RON△160细胞生长能力的作用。结果成功建立3T3-RON△170和3T3-RON△160△170细胞株．流式细胞仪胞膜蛋白检测法证明其稳定表达RON△170蛋白：免疫沉淀试验结果显示RON△170能明显抑制RON△160的RON酪氨酸磷酸化：软琼脂生长实验示3T3、3T3-RON△160、3T3-RON△170和3T3-RON△160△170细胞生长克隆数比较,差异有统计学意义（t=7．93,P〈0．05）。结论受体型酪氨酸激酶RON的变异体RON△170无酪氨酸磷酸化功能,且具有显性抑制变异体特性．     

肛周溃疡性结核一例

患者男性,73岁,因肛周皮肤溃疡逐渐增大伴疼痛出血半年于2007年6月16日入院.病初为肛旁米粒样结节,后增大破溃伴疼痛,形成溃疡创面.皮损有黄色稀薄脓液渗出,并增大至占据肛周右侧,边缘清晰.     

降结肠癌精索转移一例

患者男,66岁。2008年2月因“大便次数增多3年,反复便中带血1年”入院,肠镜提示“（距肛门45 cm）降结肠肿物”。术前检查未见肿瘤转移,行“左半结肠癌根治术”,术中见降结肠近脾曲处肿块,约7 cm×8 cm大小,侵出浆膜,侵犯邻近空肠和横结肠,周围系膜可及多枚肿大淋巴结。     

直肠基底样细胞癌一例

患者男,52岁,因"大便性状改变伴里急后重,腹痛1 d"于2006年9月16日入院.近2个月大便变细,伴有暗红色血,次数增多,多时6～7次/d,体重下降,入院前1 d上腹部剧烈疼痛,无放射痛,无恶心呕吐等,自觉直肠后方针刺样疼痛明显,否认肝硬化门静脉高压症史等.     

透明质酸钠影响大肠癌细胞生长和粘附的体外研究

目的：研究透明质酸钠(sodium hyaluronate)对大肠癌细胞生长和粘附的影响。方法：用人类大肠癌细胞SW620和Colo205与透明质酸钠溶液(25～2500μg／ml)体外培养，然后用MTT方法测定增殖情况。同时，运用流式细胞术，对SW620和Colo205细胞表面的CD44表达进行检测，比较不同浓度透明质酸钠溶液对肿瘤粘附力的影响。结果：MTT结果提示，实验组SW620细胞生长与对照组无显著差异，但实验组Colo205细胞生长与对照组有显著差异。另外，流式细胞术的结果显示，透明质酸钠可使SW620和Colo205细胞表面的CD44表达下调。结论：浓度为25～2500μg／ml透明质酸钠对不同大肠癌细胞系生长有不同的影响，但可降低肿瘤细胞粘附分子的表达，从而影响其粘附力。     

端粒酶启动子肿瘤靶向肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因抗大肠癌细胞的活性研究

目的：探讨端粒酶（hTERT）启动子驱动下肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF-related Apoptosis-inducing Ligand,TRAIL）基因在大肠癌细胞DLDl和HT-29的表达及其杀细胞作用.方法：通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TRAIL基因转入大肠癌细胞DLDl和HT-29,流式细胞仪检测GFP/TRAIL（绿色荧光蛋白和TRAIL融合基因）的表达和细胞凋亡率,MTT法检测细胞生长抑制率.结果：端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP（绿色荧光蛋白）基因在DLDl和HT-29内的表达率分别达41.63%和31.4%;GFP/TRAIL基因对DLDl和HT-29细胞的生长抑制率分别达93.5%和74.2%,凋亡率分别是41.1%和25.8%,与PBS和Ad/CMV-GFP的差异都有显著意义（P＜0.05）.结论：端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL融合基因在大肠癌细胞DLDl和HT-29中能够有效的表达;TRAIL基因对大肠癌细胞DLDl和HT-29有明显的抑制生长和促凋亡作用.     

蛋白酶体抑制剂MG-132逆转人结肠癌细胞获得性TRAIL耐药

目的: 探讨蛋白酶体抑制剂MG132逆转人结肠癌细胞获得性TRAIL耐药的作用及其可能的机制。方法：在MG132和TRAIL蛋白联合处理获得性TRAIL耐药的人结肠癌细胞DLD1TRAIL/R后,MTT法检测细胞的存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测细胞中各种凋亡相关蛋白的表达和JNK激酶的磷酸化水平。结果：MG132联合TRAIL蛋白处理DLD1TRAIL/R细胞后,其细胞存活率明显下降（P<0.01）,而细胞凋亡率则明显增加（P<0.01）。Western blotting检测显示,联合处理后DLD1TRAIL/R细胞中各种凋亡信号分子包括caspase8、caspase9、caspase3、Bid和PARP蛋白均明显活化,线粒体中细胞色素C和Smac蛋白大量释放;进一步的Western blotting检测显示,死亡受体DR5和凋亡诱导蛋白Bik的表达水平明显增高,而其他凋亡信号分子包括DR4、Bax、Bak、BclXL、XIAP和Survivin等则无明显改变;检测结果还显示,MG132能诱导JNK激酶发生磷酸化,使用JNK激酶抑制剂SP600125能够阻断MG132诱导的DR5表达,但不影响Bik的表达,并且不能减弱MG132和TRAIL蛋白联合处理对DLD1TRAIL/R细胞的致凋亡效应（P<0.05）。结论：蛋白酶体抑制剂MG132能逆转人结肠癌细胞DLD1TRAIL/R的获得性TRAIL耐药,其机制可能与Bik蛋白上调后启动线粒体凋亡途径有关,与JNK通路激活无关。     

TRAIL基因修饰联合阿霉素对大肠癌细胞株RKO作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子(tumor necrsis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)基因联合阿霉索后,应用于人大肠癌细胞株RKO基因治疗的实验研究.方法:将重组腺病毒载体(Ad)介导的TRAIL基因作用于大肠癌细胞株RKO,并联合低剂量的阿霉素协同作用.通过MTF比色法与流式细胞仪研究分析其对RKO细胞的作用效果,并以RT-PCR检测联合应用阿霉素前后TRAIL基因的表达水平.结果:病毒载体对RKO细胞的生长有轻微的抑制作用,作用4 d抑制率为11.9%,但不增加RKO细胞的凋亡率.TRAIL对RKO细胞的生长抑制率及凋亡诱导率分别为50.1%和19.8%.联合阿霉素后,TRAIL对RKO细胞株的生长抑制率及凋亡率均有显著的增强作用,分别达60.3%及49.0%.RT-PCR结果提示联合应用阿霉素后,TRAIL基因的表达并未增强.结论:TRAIL能有效抑制RKO的生长,联合阿霉素后,其对RKO的生长抑制作用及凋亡诱导作用均明显增强.阿霉素不是通过增加TRAIL基因的表达来实现上述作用的.     

端粒酶启动子肿瘤靶向TNF相关凋亡诱导配体基因抗大肠癌细胞HT-29的活性研究

目的：探讨在端粒酶（hTERT）启动子驱动下TRAIL基因在大肠癌细胞HT-29的表达及其杀细胞作用。方法：通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因转入大肠癌细胞HT-29，流式细胞仪检测GFP／TRAIL的表达和HT-29细胞凋亡率。结果：端粒酶启动子驱动的GFP／TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP（绿色荧光蛋白）基因在HT-29内的表达率分别达31．4％和67．0％；GFP／TRAIL基因对HT-29细胞的生长抑制率和凋亡率分别达74．2％和25．8％，与PBS和Ad／CMV—GFP比差异都有显著性意义（P〈0．05）。结论：端粒酶启动子驱动的GFP／TRAIL融合基因能在大肠癌细胞中有效表达；TRAIL基因对大肠癌细胞HT-29有明显的抑制生长和促凋亡作用。     

直肠癌种植转移至肛瘘

患者男,61岁,2006年6月因肛周疼痛流脓于当地医院就诊,诊断为"肛瘘",行"肛瘘切除术",术后病理报告示:中分化腺癌.患者当时拒绝进一步检查治疗,肛瘘切口术后5周愈合.2007年10月,因便血伴大便次数增多半年来我院.大便每天7～8次,呈糊状,有时伴少量鲜红血便;无里急后重.无肛周红肿流液.体检:肛门左前陈旧质软手术疤痕,直肠指检示:距肛6 cm内未及肿块,指套无染血.