细胞因子基因治疗肿瘤的现状和展望

基因治疗是将正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥其他作用，从而达到治疗疾病的目的的生物医学高新技术。随着遗传学和分子生物学及基因工程技术的进步，基因治疗已成为继手术、化疗、放疗之后的又一新的肿瘤治疗手段。免疫基因治疗，作为基因治疗的重要策略之一，越来越受到人们重视，已经成为研究热点，     

体外诱导甲胎蛋白抗原表位肽特异性T细胞的研究

目的 体外诱导甲胎蛋白(AFP)158-166特异性T细胞,检测其对AFP+肝癌细胞的特异性杀伤能力.方法 采用流式细胞术及PCR-SSP法从20例健康志愿者中筛选基因型HLA-A0201阳性者,每例取外周血50 ml获取单核细胞,细胞因子贴壁黏附培养收获树突状细胞(DC).将DC负载HLA-A0201表位态AFP158-166后按1∶10比例与新鲜淋巴细胞混合培养、增殖,噻唑蓝法检测其对HepG2、负载和未负载AFP158-166的T2细胞的杀伤能力.结果 成熟DC表面抗原CD83、CD80和CD86阳性率分别为(81.3 ±2.4)％、(92.8±1.4)％和(70.5 ±1.9)％.诱导的T细胞在效靶比40∶1时对HepG2、负载和未负载AFP158-166的T2细胞杀伤率分别为(61.1±3.4)％、(70.6±2.4)％和(16.3 ±2.7)％.结论 人外周血体外诱导的AFP158-166特异性T细胞可杀伤AFP+ HepG2和负载AFP158-166的T2细胞.     

恶性肿瘤合并甲状腺功能亢进的临床分析

目的 探讨恶性肿瘤合并甲状腺功能亢进的治疗经验.方法 回顾性分析2004年5月至2010年5月天津医科大学总医院普外科收治的10例合并甲状腺功能亢进的恶性肿瘤患者的临床资料.结果 4例患者先行甲状腺次全切除术后再行肿瘤根治术,5例用药物控制甲状腺功能亢进症状后直接行肿瘤根治术,1例入院时甲状腺功能亢进已得到控制,顺利施行手术.术后3例出现类似甲状腺危象的临床表现,全组无手术死亡.术后均行化疗,其中1例因白细胞减少被迫停止化疗.结论 手术治疗合并甲状腺功能亢进的恶性肿瘤前应根据患者的不同情况选择最佳的方法(手术或药物)控制甲状腺功能亢进;合理的术前用药、有效的术后管理可以降低手术风险,使患者安全地通过围手术期;先期行甲状腺的次全切除是可行的治疗选择.     

原发性甲状旁腺功能亢进症的术前与术中定位

正原发性甲状旁腺功能亢进症(primary hyperparathyroidism,PHPT)是一种因甲状旁腺原发病变而过多分泌甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH),导致高血钙、肾结石、骨吸收增加等表现的内分泌代谢性疾病。PHPT多为腺瘤引起,在我国占78%~92%,其次是甲状旁腺增生、甲状旁腺癌、功能性甲状旁腺囊肿~[1]。手术为PHPT首选的治疗方     

胰岛素增加肿瘤细胞化疗敏感性的研究

目的 探讨胰岛素对肿瘤细胞化疗敏感性的影响及机制.方法 以胰岛素和甲氨蝶呤(MTX)或5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理人结肠癌细胞SW480,小鼠结肠癌细胞CT-26及小鼠乳腺癌细胞4T1,噻唑蓝(MTT)法分析细胞活力,荧光显微镜和流式细胞术观察肿瘤细胞对荧光标记MTX的摄取,并利用小鼠荷瘤模型,观察胰岛素及低MTX糖对MTX化疗疗效的影响.结果 (1)胰岛素增加MTX和5-Fu的细胞毒作用4.1%-11.5%.(2)胰岛素增加肿瘤细胞对MTX摄取141.9%.(3)胰岛素及低血糖状态增强MTX抑瘤作用20.1%.结论 胰岛素及低血糖状态增加肿瘤细胞对化疗药物的吸收,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.     

靶向慢病毒载体RNA干扰小鼠血管内皮细胞异种抗原的研究

目的 使用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)方法抑制小鼠血管内皮细胞异种抗原半乳糖α1,3-半乳糖(Galα1,3-Gal)的表达.方法 经体外设计合成针对α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-GT)mRNA的序列特异性小发夹RNA(shRNA),并构建携带α1,3-GT shRNA的重组慢病毒载体,以慢病毒感染小鼠血管瘤内皮细胞系EOMA细胞.采用荧光实时定量聚合酶链反应检测转染后的EOMA细胞α1,3-GT mRNA表达水平的变化;免疫荧光法和流式细胞术检测转染后的EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal表达水平的变化.并将转染后的EOMA细胞与人血清混合培养,用四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞存活率.结果 成功获得携带α1,3-GT shRNA的成熟重组慢病毒颗粒,转染EOMA细胞效率可达75%.与空白对照组、空转染组以及阴性siRNA对照组比较,重组慢病毒转染EOMA细胞后,能有效抑制α1,3-GT的表达,抑制率为88%(P＜0.05);Galα1,3-Gal抗原表达水平明显降低(P＜0.05);而空白对照组、空转染组和阴性siRNA对照组间的差异无统计学意义(P＞0.05).重组慢病毒转染后的EOMA细胞与人血清混合培养后的存活率较各对照组明显提高(P＜0.05).结论 成功构建靶向α1,3-GT基因的重组慢病毒载体,通过RNAi沉默α1,3-GT基因,抑制EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal的表达,在体外实验中可减轻异种超急性排斥反应.     

胃癌增殖细胞核抗原表达的研究

目的 探讨增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与胃癌生物学行为的关系。方法 应用流式细胞术,对６８例胃癌及癌旁组织细胞中ＰＣＮＡ的表达进行了检测,结果 ＰＣＮＡ在胃癌中的表达明显高于正常胃粘膜及癌旁组织;ＰＣＮＡ指数与胃癌分化化程度及肿瘤浸润深度有关（Ｐ〈０．０５）,结论 检测ＰＣＮＡ的表达有助于发现早期癌变及有判断胃癌的生物学选择性。     

以牙痛为首发症状的急性心肌梗死九例急诊救治与护理体会

急性心肌梗死发病急,病情重,死亡率高。临床典型心肌梗死多以胸闷,胸痛为主要症状,极个别非典型心肌梗死以牙痛等异位疼痛为首发症状。因此,能否在有限的时间内对非典型心肌梗死进行及时、妥善的抢救直接关系着患者的生命安危。2003年3月～2007年3月,我科收治9例以牙痛为首发症状的急性心肌梗死患者,经积极的急诊治疗及护理后取得了良好的疗效。现将护理体会报告如下。1临床资料1.1一般资料选择我科2003年3月～2007年3月收治的9例以牙痛为首发症状的急性心肌梗死患者,均为男性,年龄42～70岁,平均62岁。1.2临床表现9例均以牙痛,胸闷为主要症…     

抗膀胱癌J82及丝裂霉素C单链抗体基因的研究

目的 研制单链抗体,以减少鼠源抗体的异源性,为寻找合理的导向治疗方案提供工具。方法 将经抗原刺激的BALB／C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞合制备杂交瘤,用多聚酶链反应（PCR）方法克隆其抗体可变区基因,并用重叠延伸拼接法（SOE）构建相应的单链可变区抗体片段（ScFv）基因。结果 获得杂交瘤细胞株D10及1C8,酶联免疫吸附法及免疫组织化学证实所分泌的抗体可分别与人膀胱癌细胞及丝裂霉素C特异性结合。获得两种抗体的可变区基因（320bp及340bp片段）及ScFv基因（750bp片段）。结论 应用PCR－SOE方法可快速便捷地获得目的抗体的ScFv基因,为进一步研制双特异性ScFv提供了实验基础。     

miRNA-21、miRNA-135b、miRNA-141在结肠癌中的表达及其意义

目的：探讨miRNA-21、miRNA-135b和miRNA-141在结肠癌中的表达及其意义。 方法：用荧光实时定量PCR检测3种miRNA在结肠癌组织与癌旁正常结肠黏膜组织中的表达,以及在结肠癌患者和健康对照人群血浆中的表达。分析3种miRNA与结肠癌患者临床病理因素的关系。 结果：3种miRNA的表达水平在结肠癌组织中均高于癌旁正常肠黏膜组织、在结肠癌患者血浆中均明显高于健康对照人群（均P<0.05）;miRNA-21的表达水平与肿瘤分期及浸润深度有关,miRNA-135b的表达水平与肿瘤的分期及淋巴结转移有关,miRNA-141的表达水平与肿瘤的分期、浸润深度及淋巴结转移有关（均P<0.05）;miRNA-21在结肠癌组织和患者血浆中的表达水平无明显相关性（r=0.459,P=0.072）,miRNA-135b、miRNA-141在结肠癌组织和患者血浆中的表达水平成正相关（r=0.686,P=0.042;r=0.742,P=0.026）。 结论：miRNA-21、miRNA-135b和miRNA-141在结肠癌患者中表达上调,均可能与结肠癌的发生发展密切相关,且均可能为潜在的肿瘤标记物以及治疗靶点。