FAM83A在肺腺癌组织中高表达且促进肺腺癌细胞的侵袭和转移

背景与目的：越来越多的研究表明，序列相似性为83的家族成员A（family with sequence similarity 83 member A，FAM83A）与肿瘤的侵袭和转移相关，但FAM83A在肺腺癌中的作用尚不清楚。探讨FAM83A在肺腺癌组织中的表达情况，与肺腺癌患者预后的关系以及对肺腺癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响。方法：运用人类蛋白质图谱（Human Protein Atlas，HPA）和基因表达谱动态分析（Gene Expression Profiling Interactive Analysis，GEPIA）数据库分析并选取与肺腺癌预后相关的基因；运用UALCAN和GEPIA数据库研究FAM83A的表达量对肺腺癌生存率的影响；采用UALCAN数据库分析FAM83A在肺腺癌组织中的表达及其与肺腺癌患者的性别、淋巴结的分期和转移的关系；采用蛋白质印迹法（Western blot）检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549中FAM83A蛋白的表达情况及FAM83A的转染效率；采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）检测转染后敲减FAM83A对肺腺癌细胞增殖能力的影响；采用transwell侵袭实验检测FAM83A对肺腺癌细胞侵袭能力的影响。结果：采用HPA、GEPIA和UALCAN数据库分析发现高表达的FAM83A与肺腺癌不良预后相关且FAM83A在肺腺癌组织中高表达，差异有统计学意义（P<0.05）；FAM83A的表达与肺腺癌的临床分期和淋巴结转移相关；Western blot检测结果显示，FAM83A在肺腺癌细胞中高表达且敲减质粒转染成功；CCK-8细胞增殖实验结果提示FAM83A可促进细胞的增殖能力（P<0.05）；Transwell侵袭实验提示FAM83A促进A549的侵袭能力（P<0.05）。结论：FAM83A在肺腺癌组织和细胞中高表达且促进肺腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。     

乳腺癌中PKCζ、MMP-2、MMP-9的表达及相关性

目的：探讨乳腺癌中蛋白激酶C灼(protein kinase C灼, PKC灼)、基质金属蛋白酶-2( matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)的表达及三者与其侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化PV 9000两步法检测PKC灼、MMP-2、MMP-9在100例乳腺癌组织及对应癌旁正常乳腺组织中的表达,并分析三者表达的相关性。应用RNAi技术将合成的PKC灼-siRNA转染入乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,即siPKC灼/MDA-MB-231细胞组,以转染空载质粒的scr/MDA-MB-231的细胞组作为对照组,应用Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力。利用Western blot法检测转染细胞中PKC灼蛋白的表达。酶联免疫吸附实验( enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测培养基中MMP-2、MMP-9的含量。结果 PKC灼、MMP-2、MMP-9在乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为62.5%、37.5%、32.5%,明显高于乳腺导管内癌和癌旁正常乳腺组织(P均<0.05)。 PKC灼蛋白表达与淋巴结转移、远处转移有关(P均<0.01),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、ER、PR等无关( P均>0.05);转染 siRNA的 siPKC灼/MDA-MB-231细胞组与 scr/MDA-MB-231组相比,体外侵袭能力以及PKC灼蛋白的表达水平明显下降(P均<0.05),培养基中MMP-2、MMP-9蛋白表达量亦明显下降(P均<0.05)。结论 PKC灼通过影响乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9的分泌来促进乳腺癌的侵袭、转移。     

EMT经p38-MAPK调节乳腺癌MCF-7细胞P-gp介导的多药耐药

摘 要　目的：探讨乳腺癌细胞中上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）与P-糖蛋白（P-glucoprotein, P-gp）介导的多药耐药（multidrug resistance, MDR）的关系及其可能的机制。方法：将携Snail基因的真核表达载体pcDNA-Snail转染人乳腺癌细胞MCF-7,用多柔比星（doxorubicin, DOX）诱导各组细胞耐药。免疫细胞荧光检测上皮标志物E-钙黏素（E-cadherin）、间质标志物波形蛋白（vimentin）以及P-gp的表达,MTT检测耐药细胞的增殖,RT-PCR检测Snail、MDR1、p38-MAPK mRNA的表达。结果：细胞免疫荧光显示,转染pcDNA-Snail载体后,MCF-7细胞发生EMT,E-cadherin表达显著降低,vimentin表达显著升高;P-gp在发生EMT的MCF-7细胞中表达显著升高。经DOX诱导,MCF-7/Snail细胞的耐药能力较MCF-7/DOX细胞显著增强（P<0.05）。RT-PCR显示,MCF-7细胞发生EMT后,p38-MAPK表达显著升高（P<0.05）,MDR1表达较亲本细胞明显升高（P<0.01）。结论：MCF-7细胞发生EMT后,可能通过p38-MAPK引发P-gp介导的MDR。     

社区与院内泌尿系感染大肠埃希菌的耐药状况对比分析

目的 调查社区与院内获得性泌尿系感染大肠埃希菌的药物敏感率,为临床用药提供依据.方法 收集2007～2009年门诊和住院患者尿液标本,培养分离得到大肠埃希菌,采用K-B法标准进行体外药敏试验,对结果进行统计分析.结果 分离出283株大肠埃希菌,药物敏感率大于85%的药物有亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因,社区感染分离株药物敏感率普遍高于院内感染分离株.结论 社区与院内患者泌尿系感染大肠埃希菌的耐药状况有所不同,总结该地区泌尿系感染流行病学资料及耐药菌变迁规律,对指导临床医生合理选择抗菌药物意义重大.     

miR-362-3p调控垂体肿瘤转化基因1抑制口腔鳞状细胞癌侵袭及增殖的研究

目的 探讨垂体肿瘤转化基因1 (PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞Cal-27、 HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法 生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）中的表达。蛋白质印迹法（Western blot）实验检测PTTG1在Cal-27、HN-30以及HOK细胞系中的表达。划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）细胞增殖实验检测PTTG1对Cal-27、HN-30细胞迁移、侵袭、增殖的影响。生物信息学在线数据库预测PTTG1的上游miRNA,双荧光素酶实验检测结合情况,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测该miRNA在组织中的表达。结果 ENCORI数据库结果显示PTTG1在OSCC组织中表达上调;Western blot实验显示Cal-27、HN-30细胞中PTTG1表达量较HOK细胞中高。转染Si-PTTG1质粒的Cal-27、HN-30细胞的迁移能力、侵袭能力和细胞增殖能力均较对照组降低（P<0.05）。通过网站预测出PTTG1的上游miRNA为miR...     

基质金属蛋白酶-9及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1在脑动静脉畸形组织中的表达及其与出血的关系

目的 研究基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitors of metalloproteinase1,TIMP-1）在脑动静脉畸形（cerebullar arteriovenous malformations,CAVM）患者组织中的表达及其与出血的关系。方法 选取我院2007年5月至2008年9月间收治的48例CAVM患者。按有无出血症状分为出血组和非出血组,并选取24例原发癫患者为正常对照组。分别对其病史、临床症状、影像学表现等进行研究。对患者术中脑组织标本的MMP-9、TIMP-1含量以免疫组化方法进行研究。结果 MMP-9、TIMP-1均表达在胞浆中。MMP-9在正常对照组仅见微量表达;而在CAVM患者组织标本中可见表达明显升高。TIMP-1在CAVM患者组织中表达水平显著高于对照组,与MMP-9表达平行,出血组组与非出血组之间MMP-9、TIMP-1均无统计学差异,但两者之比（MMP-9/TIMP-1）有统计学差异。结论 ①MMP-9可能是导致CAVM血管壁结构不稳定、生长和过度扩张的重要因素,其水平升高可能是TIMP-1表达的促进因素之一;②MMP-9可能对于CAVM患者的出血具有促进作用,TIMP－1有着抑制MMP-9活性的重要作用,是防止CAVM出血的“保护因子”。MMP-9和TIMP-1比例失衡,造成MMP-9相对“过盛”,可能是引起脑动静脉畸形出血的重要机制。     

195例成年人感染嗜血菌属药敏结果分析

目的 了解临床呼吸道感染患者嗜血菌属分离情况及对抗菌药物的敏感性,指导临床合理用药.方法 2006-2007年临床痰液及咽拭子标本,采用巧克力培养基分离培养并鉴定嗜血菌属,检测产β-内酰胺酶阳性菌.结果 分离到195株嗜血菌属,β-内酰胺酶阳性32株,占16.4%;药敏结果,对头孢呋辛、头孢噻肟和氨苄西林/舒巴坦的敏感率分别为90.8%、93.8%和95.4%.结论 头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸、头孢呋辛为治疗嗜血菌属感染的首选药物.     

非小细胞肺癌中MTAP蛋白及基因表达水平的检测

背景与目的 MTAP基因是一种肿瘤抑制基因,在多种肿瘤组织中存在表达异常现象。本研究旨在探讨MTAP在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织、癌旁组织以及边缘肺组织中的表达水平及临床意义。方法应用免疫组织化学方法及IPP图像分析软件观察52例NSCLC患者组织中MTAP蛋白的表达,采用实时荧光定量PCR及2-ΔΔCt法定量分析MTAP mRNA的相对表达量。结果 MTAP在NSCLC组织中的蛋白表达分别明显低于癌旁组织和边缘肺组织(t分别为10.283、10.940,均P<0.001),MTAP蛋白的表达与肺癌患者性别、年龄、吸烟史以及肿瘤的病理类型无明显关系,但与肿瘤的分化程度有密切关系(t=2.310,P=0.025)。NSCLC组织中MTAP mRNA相对表达量明显低于癌旁组织(t=9.902,P<0.001)。结论肺癌组织中存在MTAP mRNA和蛋白表达水平下调,可能与NSCLC的发生和进展有关。     

重组人脑利钠肽在急性心肌梗死患者冠脉搭桥术后的应用分析

目的评价重组人脑利钠肽在急性心肌梗死患者行冠脉搭桥手术后应用的疗效。方法选择20例急性心肌梗死后2周左室射血分数50%且血浆(B型脑钠肽前体N末端)NT-proBNP400pg/ml拟行体外循环下冠脉搭桥手术患者入组,随机分为2组,试验组10例术后在常规治疗基础上加用重组人脑利钠肽治疗,对照组10例术后给予常规治疗,对比两组术后血流动力学、肾功能、超声心动图、血NT-proBNP、药物使用情况及住院时间等指标。结果对照组与试验组比较:术前左室舒张末径、射血分数、术前血清肌酐及肾小球滤过率差异均无统计学意义。本组均采用体外循环下冠脉搭桥手术治疗,术后观察血肌酐最大变化[(70.2±30.1)μmol/Lvs.(38.3±20.6)μmol/L,P0.05]、肾小球滤过率最大变化[(-53.7±12.1)ml/minvs.(-20.2±11.6)ml/min,P0.05]差异有统计学意义。术后24h尿量[(2231±769)mlvs.(2869±1082)ml,P0.05]、多巴胺使用时间[(9.3±3.2)dvs.(5.3±2.8)d,P0.05]、术后NT-proB-NP最大变化率[(410±168)%vs.(195±132)%,P0.05]、术后住院时间[(11.3±5.7)dvs.(8.7±3.8)d,P0.05]差异有统计学意义。结论重组人脑利钠肽能改善急性心梗病人急性期行体外循环冠脉搭桥手术后肾功能,缩短正性肌力药使用时间,缩短住院日。     

80岁以上高龄患者行冠状动脉旁路移植术危险因素分析

目的 对比研究80岁以上高龄患者行冠状动脉旁路移植术(CABG)的潜在危险因素、术后主要并发症及死亡率.方法 回顾性分析2002年1月1日至2012年1月31日本院心脏外科行CABG的超过80岁高龄患者资料41例(A组);SinoSCORE评分大于6分的65～79岁老年患者资料57例(B组).对两组潜在危险因素及术后主要并发症进行对比研究.结果 A组男32例,女9例,手术时平均年龄(82.12±1.08)岁;B组男38例,女19例,手术时平均年龄(73.43±2.58)岁.统计分析结果显示,A组较B组二尖瓣反流例数、EF值、术前最后1次肌酐值、术前最后1次血糖值、术前使用正性肌力药物病例数差异有显著.术后呼吸机使用时间,重症监护时间,二次开胸止血例数三项指标在两组间差异有显著.但在急性心肌梗死病例数上A组却明显少于B组(P＜0.01).结论 与一般老年患者相比,在SinoSCORE模型评分无差异的情况下,80岁以上CABG患者可能存在更多的危险因素,且术后主要并发症的发生率及死亡率均显著增高.