体外膜肺氧合救治重症暴发性心肌炎合并多脏器功能衰竭经验

<正>病毒性心肌炎是由病毒感染所致的局限性或弥漫性心肌炎性病变,大部分患者可以自愈,少数患者急速进展为重症暴发性心肌炎。重症暴发性心肌炎约占急性心肌炎的5%,起病急,可迅速出现各种恶性心律失常及泵功能衰竭,病死率可达90%以上。沈阳军区总医院应用体外膜肺氧合(extracorporeal membrane oxygenation,ECMO)成功救治1例心脏停跳33.5 h的重症心肌炎患者。现报道如下。1临床资料1.1基本情况患者男性,25岁,因发热、恶心、呕吐2 d于2016年5月16日入院。查体:血压78/52 mm Hg(1 mm Hg=     

PI3K/Akt信号通路参与大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的发生

为研究体外大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在缺血缺氧条件下发生凋亡的作用机制。采取大鼠骨髓,以密度梯度离心分离出单个核细胞(MNCs),于体外培养并由牛垂体提取物(PEX)诱导扩增传代培养出MSCs。经形态学和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定后,BMSCs在缺血缺氧条件下培养,通过Annexin V/PI双染细胞凋亡检测比较不同组别细胞的凋亡率和蛋白印迹法(western blot)来观察细胞中蛋白的变化。结果表明,①经形态学观察和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定,提示BMSCs培养成功。②对照组(无缺血缺氧)与缺血缺氧组比较,缺血缺氧组的凋亡率显著性增加,而通过磷酸化Akt的表达量显著性增加提示PI3K(phosphoinositide-3kinase)/Akt(proteinkinaseB,PKB)信号通路被激活(P<0.05);同时缺血缺氧组与缺血缺氧+PI3K/Akt抑制剂(LY294002)组比较,缺血缺氧+PI3K/Akt抑制剂组的凋亡率显著降低,而通过磷酸化Akt的表达量显著减少(P<0.05),提示...     

女性缺血性心绞痛患者冠状动脉阻塞程度相关危险因素分析

目的探讨女性缺血性心绞痛患者冠状动脉阻塞程度相关危险因素。方法纳入2013年1月1日至2015年12月31日全国6家心血管疾病介入中心因心绞痛症状疑诊冠心病且行冠状动脉造影的患者, 对其临床资料进行回顾性分析。比较女性与男性组, 以及女性心绞痛患者缺血伴非梗阻性冠状动脉性疾病(INOCA)与缺血伴梗阻性冠状动脉性疾病(IOCA)亚组之间的临床特点, 分析女性冠状动脉阻塞程度相关的危险因素。结果共纳入心绞痛行冠状动脉造影的患者1 600例, 其中女性666例, 男性934例。女性组年龄、合并高血压、糖尿病及INOCA的比例高于男性组, 差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素分析显示年龄≥65岁、高血压、糖尿病、典型心绞痛症状与女性心绞痛患者IOCA风险增加相关。多因素回归分析显示, 年龄≥65岁(OR=1.784, 95%CI:1.146～2.776, P=0.010)、高血压(OR=1.782, 95%CI:1.201～2.644, P=0.004)及典型心绞痛症状(OR=1.642, 95%CI:1.127～2.393, P=0.010)为女性心绞痛患者诊断为IOCA的独立...     

CREG1蛋白对血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠心功能损伤的影响

目的探讨E1A激活基因阻遏子(CREG1)蛋白能否改善心肌纤维化小鼠的心功能。方法应用基因打靶方法建立广泛性基因敲除的CREG1杂合子小鼠和CREG1野生型小鼠模型。应用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)皮下埋泵方法建立小鼠心肌纤维化损伤模型,给予AngⅡ刺激14d后,采用HE和Masson染色检测小鼠心肌纤维化情况。应用Western blotting和免疫组化染色技术检测给予AngⅡ前及3、7、14d后两组小鼠心肌中CREG1蛋白的表达,并于给予AngⅡ14d后应用小动物超声仪检测心功能情况。AngⅡ给药同时,以皮下埋泵方式分别给予15、30、60、300μg/(kg·d)的外源性重组CREG1蛋白(治疗组)和生理盐水(对照组)14d,检测心功能,并应用TUNEL染色和Western blotting检测心肌凋亡情况。结果 Western blotting和免疫组化检测结果显示,未给予AngⅡ刺激时杂合子小鼠心肌中CREG1蛋白表达明显低于野生型小鼠(P<0.05)。给予AngⅡ刺激3、7、14d时,野生型小鼠和杂合子小鼠心肌中CREG1蛋白表达均明显下降(P<0.05),但杂合子小鼠下降更为显著(P<0.01);HE和Masson染色显示杂合子小鼠心肌纤维化程度较野生型小鼠严重,二者心功能明显下降,且杂合子小鼠心功能下降更为明显(P<0.05)。给予外源性重组CREG1蛋白治疗后,治疗组心功能较对照组明显改善(P<0.05),心肌凋亡数量明显下降(P<0.05)。结论在AngⅡ引起的小鼠心肌纤维化模型中,CREG1蛋白减少可使小鼠心功能损伤加重,给予外源性重组CREG1蛋白可明显改善心功能。     

新冠肺炎临床轻症患者冠心病及其危险因素临床特征

目的 了解武汉火神山医院首批次诊断为新型冠状病毒肺炎普通型及重型患者，入院时临床表现为轻症患者冠心病病史及相关危险因素情况分析。 方法 回顾性分析2020年2月武汉火神山医院开诊后首批次由外院转入的新型冠状病毒肺炎确诊患者共计65人的病史及检验资料。患者转入我院前确诊的临床分型为普通型（34例）及重型（31例），全部患者临床症状表现均为轻症患者。通过问诊及电子病历系统收集患者的现病史、既往病史以及实验室化验资料，包括了肌酸激酶（Creatine Kinase，CK）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzymes，CK-MB）、D-二聚体、血浆白蛋白及总蛋白等。 结果 65位入选患者早期出现症状到入院的中位数时间为14 d，年龄(54 ± 12)岁，其中男性39例；我们分析了患者中冠心病、糖尿病、高血压、吸烟等4项指标，将其命名为“冠心病及危险因素综合定义”。共有27例患者符合至少其中一条定义，占全部患者的42%，其中诊断为重型的患者中符合上述综合定义有15例，普通症12例。高血压患者治疗药物中使用钙通道阻滞剂11例（占61%），使用血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）/血管紧张II受体拮抗剂（ARB）8例（44%）。糖尿病患者为7例。入院后16例检测CK及CK-MB的患者中，CK异常率为25%，CK-MB未见异常。27例检测D-二聚体患者中11例异常升高（占41%）。17例测定了脑钠尿肽（Brain natriuretic peptide，BNP），均无异常。28例获得血浆白蛋白及总蛋白结果，其中白蛋白24例异常降低（占86%），总蛋白21例异常降低（占75%）。全部65例患者经住院期治疗后均治愈出院。 结论 首批入院武汉火神山医院诊断为普通型及重型，表现为临床轻症的新型冠状病毒肺炎患者，虽冠心病及其危险因素疾病负担较重，但住院期未观察到较严重的不良事件，与既往文献报道的危重型新冠肺炎患者并发心血管疾病的预后情况有所不同。     

全反式维甲酸联合Ⅳ型胶原促进胚胎干细胞向平滑肌细胞分化

目的探讨全反式维甲酸(atRA)联合Ⅳ型胶原(collagenⅣ)能否更好的促进小鼠胚胎干细胞(m ESC)向平滑肌细胞分化。方法体外培养m ESC,通过碱性磷酸酶染色、SSEA1染色和在体成瘤实验检测m ESC全能性。制作胚胎小体(EB)并悬浮3天后分别分为:无诱导(对照组)、atRA诱导组、Ⅳ型胶原诱导组、atRA联合Ⅳ型胶原诱导组,使其贴壁分化。通过平滑肌细胞抗体(SM-αactin)的Western blot检测及SM-αactin与平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)免疫荧光双染结果观察比较不同组别的细胞分化为平滑肌细胞的情况并进行比较。结果经m ESC全能性鉴定,提示小鼠胚胎干细胞的培养成功。发现在第7天及第14天atRA联合Ⅳ型胶原诱导组细胞SM-αactin蛋白表达量均明显高于其他3组,同时观察第14天的SM-αactin与SM-MHC双荧光染色,发现atRA联合Ⅳ型胶原诱导组的SM-αactin与SM-MHC表达量也是最高,表明细胞的分化成熟度是最好的,atRA诱导组和Ⅳ型胶原诱导组次之,对照组最差。结论全反式维甲酸联合Ⅳ型胶原能够更好的促进胚胎干细胞向平滑肌细胞分化。     

CREG基因沉默诱导小鼠ESCs来源的EBs自发性凋亡

目的: 探讨E1A激活基因阻遏子(CREG)基因沉默诱导鼠源性胚胎干细胞(ESCs)来源的胚胎小体(EBs)自发性凋亡的作用。方法: 应用pDS-shRNA-CREG逆转录病毒真核表达载体和绿色荧光蛋白(GFP)的对照载体,感染鼠源性胚胎干细胞R1,筛选获得稳定的细胞克隆(R1-shCREG和R1-GFP);用小鼠胚胎成纤维细胞株STO作为饲养细胞,进行R1、R1-shCREG和R1-GFP细胞培养。倒置显微镜观察3种ESCs的生长情况。碱性磷酸酶(AKP)染色和小鼠心肌接种畸胎瘤形成实验检测转染后ESCs分化情况。当ESCs生长至亚融合状态时进行传代,去除白血病抑制因子(LIF)并悬浮培养制备EBs。用RT-PCR技术和Western blotting方法分别检测3组EBs培养7 d时CREG和cleaved caspase-3蛋白和mRNA的表达, Annexin V/PI流式细胞术检测EBs细胞凋亡情况。结果: 经pDS-shRNA-CREG逆转录病毒真核表达载体及 GFP的质粒载体转染获得稳定转染的细胞克隆。AKP染色证实R1、R1-GFP和R1-shCREG 3组ESCs均保持未分化状态。同时,体内和体外分化研究证实,R1和R1-GFP组细胞具有三胚层分化能力,小鼠心肌内注射的ESCs形成畸胎瘤组织;而R1-shCREG则不能够形成畸胎瘤类似物,细胞分化能力降低,且细胞死亡现象增加。培养7 d的R1-shCREG/EB组 CREG蛋白表达量较R1/EB组和R1-GFP/EB组均降低; CREG的mRNA表达下降;而cleaved caspase-3 mRNA和蛋白表达均显著升高;同时, R1-shCREG/EB细胞凋亡率明显升高。结论: 下调CREG表达可抑制ESCs分化,促进ESCs来源的EBs细胞凋亡的发生。