利用谱系示踪研究小鼠胚胎发育早期的Flk1~+细胞

目的:了解中胚层来源的Flk1~+细胞在小鼠胚胎发育早期不同部位的分化情况,进而探索Flk1~+细胞是否在血管发育过程中有分化为周细胞等间质谱系的潜能。方法:基于Cre-LoxP系统的条件型基因敲除研究策略,利用Flk1-Cre小鼠和ROSA26报告小鼠进行谱系示踪研究。用GFP~+群体示踪Flk1~+细胞群体的命运。结合中胚层标志Flk1,造血细胞特异性标志CD45,内皮细胞特异性标志CD31、CD144以及Emcn(endomucin),周细胞特异性标志PDGFRβ和NG2,利用免疫组织化学、免疫荧光等组织检测和流式细胞术探究所关注的问题。结果:对谱系示踪小鼠Flk1-Cre;ROSA26-EYFP在胚胎发育早期不同部位的免疫组化结果显示,在背主动脉、肢芽及卵黄囊等多处造血位点周围Flk1~+细胞来源的GFP~+群体中,观察到除了造血细胞、沿血管壁特异性分布的CD31~+/Emcn~+典型内皮细胞外,还有间质样细胞等多种类型的群体。组织学研究显示这群表达在血管周围的既非造血又非内皮的细胞是周细胞。流式细胞术分析也证实,Flk1~+细胞贡献了周细胞。此外,在如背主动脉、肢芽等部位造血位点周围的GFP~+群体中还观察到小部分形态为间质样的CD31~+CD140B~+细胞群体。结论:在胚胎发育早期,中胚层来源的Flk1~+群体不仅贡献了造血、内皮、以及肌肉等谱系,还贡献了包括周细胞在内的间质谱系。推测观察到的CD31~+CD140B~+细胞群体可能是由Flk1~+祖细胞分化而来的内皮细胞,正经历着内皮间质转化EndMT,逐渐丢失内皮表面特异性标志,同时也开始表达周细胞表面标志。     

预激态补骨脂素抑制 K562细胞增殖的实验研究

本研究的目的是观察预激态补骨脂素对K562细胞增殖的影响，为补骨脂素的临床应用提供实验依据。取预激态补骨脂素和晚激态补骨脂素处理的细胞，在培养后检测台盼蓝拒染细胞数和白血病细胞集落，并对它们在台盼蓝拒染细胞抑制率(TBIR)、细胞增殖抑制率(CPIR)和集落形成抑制率(CFIR)方面的差异进行比较。结果表明：预激态补骨脂素对K562细胞增殖有抑制作用；随着预激态补骨脂素浓度的增加，其抑制作用也随之增强；预激态补骨脂素与晚激态补骨脂素的TBIR、CPIR、CFIR各值比的差异不显著；为使预激态补骨脂素要充分发挥对K562细胞的抑制作用，补骨脂素的紫外线照射时间应在10分钟以上；与K562细胞作用时间也应大于12小时；抑制作用会因预激态补骨脂素预激后搁置时间的延长而下降，在6小时内作用最强。结论：预激态补骨脂素和晚激态补骨脂素对K562细胞的增殖均表现出抑制作用，有望作为临床的抗肿瘤用药。     

微血流成像模式鉴别甲状腺结节良恶性的价值

目的 评价微血流成像(MFI)对甲状腺结节良恶性的鉴别诊断价值。方法 选取2020年5至12月在中国人民解放军总医院第一医学中心行常规超声、MFI和超声造影检查并获得明确组织学或细胞学病理结果的甲状腺结节患者50例,回顾性分析患者的临床资料和超声声像图,构建二分类Logistic回归模型,评价该模型预测甲状腺结节良恶性的能力。结果 Logistic回归分析显示成分和“S-W-C征”是预测恶性甲状腺结节的独立危险因素。Logistic回归模型对甲状腺结节良恶性预测的灵敏度、特异度、约登指数分别为73.33%、80.00%、0.53,受试者工作特征曲线下面积为0.799(95%CI=0.662~0.899)。结论 MFI模式有助于鉴别甲状腺结节良恶性,具有潜在应用价值。     

老年贫血81例诊断分析

目的　探讨老年贫血的诊断特点。方法　分析 81例老年贫血病例的血红蛋白、红细胞、网织红细胞、白细胞、血小板、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、骨髓红系增生情况、骨髓形态学及病理学诊断、病因诊断等项目 ,以中位数、均数±标准差、百分比等为观察指标。结果　 81例老年贫血病例中 ,男性稍多于女性 ,中位年龄 6 8 9岁。中重度贫血占绝大多数 ,网织红细胞计数正常者为5 2 11%,增高者为 33 80 %。近半数病例或伴白细胞减少或伴血小板减少 ,全血细胞减少者占 39 15 %,单纯贫血者占 44 4 4%。形态学上以大细胞性贫血比例最高 ,占 36 99%,其次为正细胞性贫血 ,占 30 14%。骨髓红系增生活跃以上者占 83 87%;1 5活检病例合并灶状纤维化或纤维组织增生。缺铁性贫血为老年贫血最常见的病种 (2 9 6 3%) ,其次为巨幼细胞性贫血、骨髓增生异常综合征。缺铁性贫血的病因中摄入不足最常见 ,占 2 3 33%,肿瘤、食管裂孔疝、溃疡及胃大部切除术后也较多见。慢性病性贫血比例低。骨髓增生异常综合征、巨幼细胞性贫血和慢性再生障碍性贫血为老年全血细胞减少病例的常见病种。老年单纯贫血病例中 ,缺铁性贫血占首位 (4 7 2 2 %) ,巨幼细胞性贫血比例也较高。结论　老年人属弱势群     

泛素—蛋白酶体通路在凋亡调控中的作用

泛素－蛋白酶体通路是生物体内进行蛋白质选择性降解的重要途径之一，它参与细胞内许多重要的生理生化过程（如DNA修复，细胞周期的运转，信号传递、抗在的提呈，蛋白的跨膜定位等）。近年来，其在细胞凋亡中的作用越来越受到重视，与之相关的调控机制也被广泛研究，蛋白酶体抑制剂在体外可诱导多种肿瘤细胞的凋亡，为人类开发新的抗肿瘤药物提供了新的思路。本文主要就泛素－蛋白酶体通路中各成分与凋亡的相关性，其可能的调控机制以及相关的体内实验做一综述。     

甲磺酸伊马替尼和同基因外周血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病持续缓解二年余一例

患者男,50岁.2003年lO月无明显诱因出现头昏、乏力,症状进行性加重,12月就诊血液科.     

泛素-蛋白酶体通路在凋亡调控中的作用

泛素-蛋白酶体通路是生物体内进行蛋白质选择性降解的重要途径之一,它参与了细胞内许多重要的生理生化过程(如DNA修复、细胞周期的运转、信号传递、抗原的提呈、蛋白的跨膜定位等)。近年来,其在细胞凋亡中的作用越来越受到重视,与之相关的调控机制也被广泛研究。蛋白酶体抑制剂在体外可诱导多种肿瘤细胞的凋亡,为人类开发新的抗肿瘤药物提供了新的思路。本文主要就泛素-蛋白酶体通路中各成分与凋亡的相关性、其可能的调控机制以及相关的体内实验做一综述。     

来源于骨髓和脐带血的基质细胞基本特性的比较

目的比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性,为基质细胞的选择应用提供依据.方法用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞,以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区(CAFC),长期培养起始细胞(LTC-IC)为指标,比较两者的生长特性、成分及功能.结果①细胞生长特性:出现贴壁细胞时间,骨髓细胞为培养3d,脐带血细胞为培养5～6d;细胞融合成片时间,骨髓细胞为培养10～14d,脐带血细胞为培养12～18d;第21天细胞增殖数,骨髓比脐带血细胞增殖少;②细胞成分:21d培养后细胞成分,骨髓来源者以成纤维细胞为主,其次是巨噬细胞与内皮细胞,脂肪细胞最少;脐带血细胞来源者,以巨噬细胞为主,其次是内皮细胞、成纤维细胞,偶见脂肪细胞;细胞化学与上述结果基本一致;细胞表面抗原检测,CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞;③细胞功能:骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的CAFC和LTC-IC明显多.结论①生长特征:形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短,骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短;②细胞成分特性:骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主,脐带血来源者以巨噬细胞为主;③细胞功能特性:骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于CAFC、LTC-IC生长.     

脐带血清对造血细胞的增殖刺激作用

目的：探讨脐带血清(CBS)对骨髓造血细胞的效应。方法：采用骨髓粒单系祖细胞、混合细胞、卵石造血区、长期培养超始细胞培养法，在培养体系中加入CBS或/和细胞因子（CK），根据培养集落的形成量，推算CBS中CK的含量。结果：CBS中含有能直接刺激骨髓造血细胞形成的CK，其中约含GM-CSF65.6μg/L，IL-32.9μg/L，有较高的SCF、IL-6等活性。结论：CBS内含有的造血刺激活性，可支持造血细胞体外生长、扩增，与CK比，有一定可比性及协同作用，具有一定应用前景。     

人M-07e白血病细胞凋亡过程中激活Caspase-3引起的Bcl-2 蛋白酶解与Lynp53/56激酶失活相关

人巨核白血病细胞系M-07e的生长严格依赖于GM-CSF.在M-07e细胞,GM-CSF受体(GM-CSF R)由两个亚基所组成:低亲合力的配体特异的α亚基和一个磷酸化的β亚基,后者与lynp53/56酪氨酸蛋白激酶固定相连.本研究检测了lyn激酶在调节TGF-β 1诱导的M-07e细胞凋亡过程中的作用.从培养液中去除rhGM-CSF首先导致了lyn激酶活性受抑,接着发生细胞生长受阻和凋亡.M-07e细胞凋亡过程中伴随有大量Bcl-2和Bax蛋白分别被酶解为22 kD和18 kD的较小片段.应用特异性的抑制剂,发现上述Bcl-2蛋白的变化是循激活的caspase-3(CPP32)途径发生的,后者在M-07e细胞中大量表达.Bax蛋白变化的机制尚不清楚.TGF-β 1对rhGM-CSF刺激的细胞生长具有抑制作用,促进M-07e细胞凋亡的机制与去除rhGM-CSF所致相同,包括大量Bcl-2和Bax蛋白被特异酶解和lyn激酶失活.TGF-β 1并不影响lyn蛋白和β链的表达水平,也不阻止这两个信号传导元件的相互作用.研究结果表明,TGF-β 1通过抑制GM-CSF R相关的lyn激酶活性而抑制M-07e细胞生长并促进凋亡发生.本实验还表明激活的CPP32对Bcl-2蛋白的酶解是与细胞凋亡发生相关的一个自然过程,处于lyn激酶活性的调控之下.