中国眼镜蛇毒蛋白酶natrahagin水解血小板膜糖蛋白Ⅰ b和抑制血小板聚集的作用

目的:观察从中国眼镜蛇(Naja naja atra)毒中纯化的蛋白酶natrahagin水解血小板膜糖蛋白Ⅰb(platelet membrane glycoprotein Ⅰb,GPⅠb)和抑制血小板聚集的作用.方法:通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测以及凝胶图像光密度分析系统分析natrahagin对血小板膜糖蛋白的水解作用.比浊法测定血小板聚集率.结果:Natrahagin选择性地水解GP Ⅰb,切除分子量约3.3×104的片段.Natrahagin(0.025～0.1 mg/kg)静脉注射可显著抑制低浓度凝血酶(100 U/L)诱导的兔洗涤血小板聚集,效应呈剂量依赖性.结论:Natrahagin具有水解GPⅠb和抑制后者介导的血小板聚集的作用.     

高效液相色谱法测定常通口服液中大黄素的含量

目的 :测定常通口服液中大黄素的含量。方法 :采用高效液相色谱法 ,以Nova -PakC18 为色谱柱 ,甲醇 -0 1%磷酸 (85∶15)为流动相 ,检测波长为254nm。结果 :常通口服液中大黄素的含量在0 48～2 40μg/ml浓度范围内线性关系良好 (r=0 9998)。平均回收率为99 73 % (n=5) ,RSD=1 42 %。结论 :本方法简便、快速 ,测定结果准确。     

原子吸收分光光度法测定常通口服液中微量元素锰的含量

目的:建立以原子吸收分光光度法测定常通口服液中微量元素锰含量的方法。方法:光源为锰空心阴极灯,波长为279.5nm,灯电流为3.0mA,狭缝宽度为1.2nm,空气流量为5.0L/min,乙炔流量为1.0L/min。结果:锰检测浓度在0.5~2.5μg/ml范围内与吸收度呈良好线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为99.24%(RSD=2.06%,n=5)。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏度高、精密度好。     

注射用头孢呋辛钠的HPCE测定

建立高效毛细管电泳法测定注射用头孢呋辛钠的含量.采用毛细管柱(75 μm×60cm),运行缓冲液为30mmol/L硼砂溶液(pH9.2),检测波长254nm,阿魏酸为内标.头孢呋辛钠在6～30μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9996),平均回收率98.9%(RSD=1.82%).     

苦参碱通过调控β-catenin信号通路抑制肝癌细胞干性

目的探讨苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞增殖活性、细胞干性、β-catenin转录活性以及AKT/GSK3β/β-catenin信号 通路的影响。方法应用MTT法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验检测0 g/mL、200 g/mL、400 μg/mL、800 μg/mL苦参碱对 人肝癌HepG2 和Huh7 细胞的克隆形成能力,荧光定量PCR分析0 g/mL、200 g/mL、400 μg/mL、800 μg/mL 苦参碱对人肝癌 HepG2 和Huh7 细胞干性基因CD90、EpCAM（上皮细胞粘附分子）和CD133 mRNA的表达水平,双荧光素酶报告基因检测 0 g/mL、200 g/mL、400 μg/mL、800 μg/mL 苦参碱对人肝癌HepG2 和Huh7 细胞内β-catenin 转录活性,Western blotting 检测 0 g/mL、400 μg/mL、800 μg/mL苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞内AKT（蛋白激酶B）、GSK-3β和β-catenin及其相应磷酸化 蛋白的表达水平。结果MTT实验结果显示,苦参碱呈时间-浓度依赖性地抑制肝癌HepG2 和Huh7 细胞的增殖,处理24、 48、72 h 对HepG2 细胞的半数抑制浓度依次为2369、1565、909.1 μg/mL,对Huh7 细胞的半数抑制浓度依次为1355、781.8、 612.8 μg/mL。苦参碱浓度依赖性地抑制肝癌细胞的克隆形成能力,400 μg/mL、800 μg/mL苦参碱能够显著抑制HepG2细胞的 克隆形成能力（P<0.01,P<0.001）,200 g/mL、400 μg/mL、800 μg/mL苦参碱能够显著抑制Huh7细胞的克隆形成能力（P<0.05,P<0.01, P<0.001）。苦参碱能够显著肝癌细胞内CD90、EpCAM和CD133 等干细胞标志物mRNA的表达,其中400 μg/mL、800 μg/mL 苦参碱能够显著抑制HepG2细胞中CD90（P<0.01,P<0.001）、EpCAM（P<0.05,P<0.01）和CD133（P<0.01,P<0.01）mRNA的表 达,400 μg/mL、800 μg/mL苦参碱能够显著抑制Huh7细胞中CD90（P<0.01,P<0.01）、EpCAM（P<0.05,P<0.01）和CD133（P<0.01, P<0.01）mRNA的表达。同时400 μg/mL、800 μg/mL苦参碱显著抑制HepG2细胞（P<0.001,P<0.001）和Huh7细胞（P<0.01,P<0.001） 内β-catenin的转录活性。研究结果显示400 μg/mL、800 μg/mL苦参碱能够显著降低HepG2和Huh7细胞内β-catenin和磷酸化 的AKT和GSK-3β蛋白水平,增加β-catenin的磷酸化水平。结论苦参碱可抑制肝癌HepG2和Huh7细胞的增殖、克隆形成以及 肝癌干性基因CD90、EpCAM和CD133的表达,其机制可能与抑制AKT/GSK3β/β-catenin信号通路,从而降低β-catenin的转录 活性有关。     

个体化延伸护理在哮喘患儿康复管理中的应用

目的:探讨个体化延伸护理在哮喘患儿康复管理中的应用效果。方法:选取我院进行治疗的86例支气管哮喘患儿,按出院顺序单双号随机分为观察组和对照组各43例,对照组患儿实施常规出院健康教育,观察组在此基础上采用个体化延伸护理。1年后比较两组患儿遵医行为、疾病复发率、再住院率及患儿主要照护者的哮喘知识掌握情况。结果:观察组患儿遵医行为优于对照组(P 0. 01),疾病复发及住院率明显低于对照组(P 0. 01,P 0. 05);观察组患儿主要照护者的哮喘知识掌握程度与对照组比较差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:个体化延伸护理在儿童哮喘的康复管理中起到积极有效的作用,可提高哮喘患儿的遵医行为,预防支气管哮喘的复发,降低再次住院率;可提高患儿主要照护者的哮喘知识掌握程度,使患儿得到很好的照护,利于改善患儿的生活质量。     

斜坡巨细胞修复性肉芽肿1例

患儿男,16岁,无明显诱因左耳听力下降2年、间歇性头痛1年余,未经处理。查体:右眼鼻侧偏盲;外耳道无异常,听力未测。实验室检查:血清生长激素9.49 ng/ml。头颅平扫CT:斜坡及鞍区见团块状稍高欠均匀密度肿块,内见线状及小片状骨化影;斜坡、前床突及后床突骨质不完整(图1A)。     

人工养殖海产品鲜样中铅的荧光分光光度测定法

目的建立人工养殖海产品中铅的荧光分光光度快速测定方法。方法采用湿式消解法对中国对虾(养殖)、南美白对虾、梭鱼、矛尾刺虾虎鱼、四角蛤蜊、光滑兰蛤、密鳞牡蛎、中国对虾(野生)样品进行处理,采用浓盐酸作溶剂,荧光分光光度法直接检测铅含量,并与双硫腙光度法的测定结果进行比较。结果该方法的线性范围为0.10～2.50μg/ml,r=0.98983,检出限为0.0089μg/ml,回收率为91.88%～104.00%,RSD为1.96%～5.30%。与双硫腙分光光度法测得结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论该方法具有操作简便,使用药剂少,灵敏度高,结果准确可靠,常见金属离子干扰小的特点,适用于海产品中铅含量的测定。