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1.
目的 研究苹果酸酶2(ME2)的乙酰化修饰在恶性脑胶质瘤细胞系U87MG增殖中的功能及其分子机制.方法 基于序列保守性并结合质谱数据库,预测ME2的乙酰化修饰位点,再构建点突变体,转染细胞,通过免疫沉淀(IP)和Western blot确定修饰位点;通过293T细胞纯化ME2野生型和突变体,检测乙酰化修饰对ME2酶活的影响;通过共转染、富集纯化并结合酶活实验,检测去乙酰化酶Sirtuin3(SIRT3)对ME2酶活、细胞内活性氧(ROS)及NADH水平的影响;在U87MG细胞中用shRNA敲低内源ME2后,回转野生型和模拟乙酰化突变型,检测ME2的乙酰化对细胞增殖的影响,并通过裸鼠成瘤在动物水平验证;通过Western blot在恶性脑胶质瘤临床样本中检测癌与癌旁组织中ME2的乙酰化水平差异.结果 K156是ME2主要的乙酰化修饰位点,该位点的乙酰化会抑制ME2活性并抑制U87MG细胞增殖.SIRT3去乙酰化ME2,提高ME2活性,促进NADH的生成,降低细胞内ROS水平.结论 SIRT3调控的ME2乙酰化修饰通过提高自身酶的活性,上调细胞NADH水平,降低ROS水平,从而促进U87MG细胞增殖. 相似文献
2.
3.
目的探讨高良姜黄素(Cur)增强内皮细胞(ECs)自噬水平及抑制损伤血管内膜增生(IH)的作用机制。方法体外实验中,将人脐血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)分为4组:对照组、3-MA组、Cur组、雷帕霉素(Rapa)组;采用吖啶橙(AO)染色和溶酶体荧光探针法(Lyso-Tracker Red)观察细胞酸性区室积累; Western-blot、免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p62、Akt及m TOR的蛋白水平。活体实验中,用球囊压迫法构建颈动脉内膜损伤大鼠模型; 60只健康成年雄性SD大鼠分为假手术组、血管损伤组、3-MA组、Cur组和Rapa组;采用Western blot法检测各组大鼠颈动脉组织LC3-Ⅱ、p62、Akt及m TOR的蛋白水平,HE染色检测IH厚度及有效的管腔面积。结果体外实验中,与对照组相比,Cur组和Rapa组HUVECs内酸性区室明显增多,同时LC3-Ⅱ蛋白水平增高,p62、Akt及m TOR蛋白水平降低。活体实验中,与对照组相比,损伤血管中的LC3-Ⅱ蛋白水平上升,而p62、Akt及m TOR蛋白水平稍下降,Cur组和Rapa组大鼠血管中的LC3-Ⅱ蛋白水平明显升高,而p62、Akt及m TOR蛋白水平显著下降。HE染色显示,颈动脉内膜损伤后3周,损伤节段血管可见明显的IH及血管腔狭窄,而Cur组和Rapa组抑制了IH及减轻血管狭窄。无论在体外实验还是活体实验中,3-MA干预后均呈现一个相反的结果。结论 Cur能增加ECs的自噬水平及抑制血管损伤后的IH。其可能机制是抑制了ECs中的Akt/m TOR信号通路。 相似文献
4.
5.
目的探讨颅眶沟通性肿瘤显微手术治疗的效果及其相关技巧。方法 2000年5月至2011年5月对27例颅眶沟通性肿瘤患者进行了手术治疗。根据肿瘤的生长方式及对眼眶的累及情况选用不同的手术入路,其中经额颞眶顶入路手术17例,眶上-翼点入路5例,改良翼点入路5例。结果肿瘤全切除21例,次全切除4例,部分切除2例;肿瘤全切除率为77.8%(21/27)。术后病理学检查示脑膜瘤19例,转移癌2例,视神经胶质瘤1例,视神经纤维瘤4例,泪腺混合瘤1例。术后随访6年,2例死亡,22例仍存活,3例随访半年后失去联系。结论颅眶沟通性肿瘤首选的治疗方法为手术,选择合适的手术入路、娴熟的显微手术操作对于全切除肿瘤及减少术后并发症十分重要。 相似文献
6.
目的 应用基于体素的形态测量学和静息态功能磁共振研究海洛因成瘾者后扣带同结构和功能连接的变化情况.方法 14例海洛因成瘾者和13例正常对照者分别采集3DT1WI图像和静息态功能磁共振图像,对3DT1WI图像进行基于体素的形态测量学分析以了解相关脑区灰质密度和体积的变化,对功能磁共振图像分别以左、右后扣带同为感兴趣区与全脑的体素进行相关分析,比较海洛因成瘾组与正常对照组的后扣带回结构和功能连接的变化情况.结果 与正常对照相比,海洛因成瘾组的后扣带回灰质密度显著降低;以左侧后扣带回为感兴趣区进行功能连接分析,海洛因成瘾组左侧后扣带回与右侧颞叶的功能连接高于正常对照组,与右侧前额叶、丘腩以及左侧顶叶的功能连接明显低于正常对照组;以右侧后扣带回为感兴趣区进行功能连接分析,海洛因成瘾组右侧后扣带回与左侧额叶、左侧顶叶以及丘脑的功能连接明显低于正常对照组(双样本t检验,P<0.01).结论 海洛因成瘾者后扣带回的结构和功能连接异常,这与海洛因成瘾的脑结构和功能障碍以及奖赏系统障碍有关.Abstract: Objective To explore the abnormalities in the posterior cingulated cortex structure by voxel based morphometry(VBM)and changes of functional connectivity by resting-state functional magnetic resonance imaging(fMRI)in long-term heroin addictions.Methods High-resolution volumetric T1-weighted images and resting state fMRI examination were performed on 13 long-term heroin addicts and 14 matched healthy volunteers.The T1-weighted images were processed using optimized voxel-based morphometry to investigate abnormalities in the gray matter,at the sarne time,the posterior cingulated cortex was setted as the region-of-interest(ROI)seed,with which a whole-brain voxel temporal correlation in low frequency fMRI fluctuations was calculated,to find changes of the posterior cingulated cortex functional connectivity.Results Compared with the control group,gray matter concentration significantly decreased in the posterior cingnlated cortex,at the same time,the functional connectivity between the left posterior cingulated cortex and the right temporal lobe was increased,but the functional connectivity between the left posterior eingulated cortex and the left thalamus,the left parietal lobe,the left cerebrum were all decreased in heroin addicts.At the same time,the functional connectivity between the fight posterior cingulated cortex and the left thalamus,the left parietal lobe,the left frontal lobe were decreased in heroin addicts(t testing,P<0.01).Conclusion The structure and the functional connectivity in posterior cingulated cortex in long-term heroin addicts are changed,which may affect the dysfunction of the addictive brain and the function of reward mechanism. 相似文献
7.
8.
目的探讨立体定向活检术及磁共振波谱成像(MRS)在颅内多发病灶定性诊断中的临床价值。方法回顾性分析37例经MRI、MRS和立体定向活检术后病理学检查确诊的颅内多发病灶患者的临床资料,其中行有框架定向活检术22例,无框架神经导航定向活检术15例。结果 37例均获得明确病理学诊断,其中低级别胶质瘤19例,高级别胶质瘤8例,淋巴瘤3例,多发脱髓鞘3例,炎性病灶2例,转移癌2例。术后出现癫痫发作1例,活检靶点少量出血1例。病理学诊断与MRS诊断符合率为83.8%(31/37),误诊率为16.2%(6/37)。结论 MRS在颅内多发病灶的诊断中具有较高的准确性,但仍有一定的误诊率;立体定向活检术微创、安全,在颅内多发病灶的诊断中具有决定性的意义;MRS的代谢变化在活检术靶点选择上具有一定的指导价值。 相似文献
9.
目的 探讨前颞叶和海马切除治疗难治性颞叶癫痫对认知功能的影响.方法 19例难治性颞叶癫痫患者接受前颞叶和海马切除手术,手术前和手术后3、6月进行认知神经心理学测评以了解认知功能的变化.结果 19例难治件颞叶癫痫患者接受了前颞叶和海马切除术后取得了良好的疗效,术后1例有-过性的言语障碍,2例有-过性的欣快等精神症状.难治性颞叶癫痫患者存在严重的认知功能障碍(特别是智力、注意力、记忆功能障碍),前颞叶和海马切除手术没有加重认知功能障碍.在手术后6月一些认知功能反而有改善的趋势.结论 难治性颞叶癫痫患者存在认知功能障碍,采用前颞叶和海马切除能治愈或减少颞叶癫痫发作,并且对认知功能障碍有一定的改善作用. 相似文献
10.
经单鼻孔-蝶窦入路垂体腺瘤显微手术治疗及其策略 总被引:2,自引:2,他引:0
目的 总结采用经单鼻孔-蝶窦入路显微手术治疗垂体腺瘤的临床疗效.方法 从2003年1月至2007年12月,经单鼻孔-蝶窦入路显微手术治疗垂体腺瘤241例,并对其临床表现、肿瘤病理、肿瘤切除率、术后并发症进行总结分析.结果 垂体腺瘤241例中,全切除171例(71%),次全切除28例(11.6%),大部分切除26例(10.7%),部分切除16例(6.6%).术后多饮、多尿38例(15.8%)、术后视力一过性下降12例(4.9%)、术后脑脊液漏4例(1.6%)、一侧动眼神经损伤2例(0.8%),无死亡病例.除动眼神经损伤的2例外,其余病例的术后并发症在出院时已治愈.随访1-36个月,所有病例的临床症状均有不同程度改善.结论 经单鼻孔-蝶窦人路显微切除垂体腺瘤手术时间缩短,创伤小,手术效果好. 相似文献