反向扩散法检测皮肤癣菌对伊曲康唑的敏感性

目的：探讨皮肤癣菌的药的敏感试验新方法。方法：建立反向扩散法，将抗真菌药物伊曲康唑稀释成不同浓度加入固体培养基中，用定量取材器从沙保罗琼脂上切取须癣毛癣菌和犬小孢子菌的菌落，种子药物培养基中，并采用抑制率行回归分析。结果：药的培养基药物浓度越高，受试菌株生长菌落越小。接种标本的大小与菌落直径的大小呈正相关。接种标本取靠近菌落中央或边缘部位，对菌落大小基本没有影响。结论：反向扩散法具有可靠、迅速和重复性较好等特点。     

口服特比萘芬联合5-氨基酮戊酸光动力治疗淡紫拟青霉皮肤感染一例

患者,女,46岁。因右上臂红斑伴瘙痒1年就诊。根据其临床症状和体征,受累组织器官中真菌的分离培养,组织病理学特征以及分子生物学鉴定技术,该病例诊断为淡紫拟青霉皮肤感染。体外药敏试验显示对特比萘芬敏感,采用5-氨基酮戊酸光动力联合口服特比萘芬治疗取得较为满意的治疗效果。     

眼部皮肤寄生虫感染二例

毛囊虫皮炎、疥疮及虱病等均为皮肤科常见的寄生虫感染病，前两者主要侵犯皮肤，后者主要侵犯头发、阴毛和腋毛。我们发现并诊治眼睑部位的阴虱、毛囊虫感染的2例患者，现报告如下。     

卢立康唑等七种咪唑类抗真菌药物对常见念珠菌的体外活性检测

【摘要】 目的 评价卢立康唑等7种咪唑类药物对临床分离常见念珠菌的体外敏感性。方法 参考美国临床实验室标准化研究所（CLSI）的微量稀释法M27-A3方案,检测5种共183株临床分离念珠菌对卢立康唑、酮康唑、咪康唑、益康唑、克霉唑、舍他康唑、联苯苄唑7种咪唑类药物的体外敏感性。结果 酮康唑、咪康唑、益康唑、克霉唑、舍他康唑和联苯苄唑的体外最低抑菌浓度（MIC）范围（几何均数）分别为0.03 ～ 8（0.067）、0.03 ～ 16（0.071）、0.03 ～ 8（0.207）、0.03 ～ 8（0.061）、0.03 ～ 16（0.187）和0.03 ～ ＞ 16（1.050） mg/L。卢立康唑对5种念珠菌均有较好的体外敏感性,MIC范围0.03 ～ 8 mg/L ,几何均数为0.087 mg/L,MIC50和MIC90分别为0.06 mg/L和0.5 mg/L。包括卢立康唑在内,各受试药物均有部分相对不敏感菌株。结论 除联苯苄唑外,其他6种咪唑类药物均对念珠菌有良好的体外抗菌活性,但存在少数相对不敏感菌株。     

菌落PCR技术快速鉴别丝状真菌的实验研究

目的 探讨菌落PCR在检测病原性丝状真菌方面的应用价值。方法 初步建立用于丝状真菌的菌落PCR检测技术,用19种丝状真菌标准株进行验证,所有菌落PCR扩增产物进行测序,并选取8种菌株的菌落PCR产物和酶切结果与常规PCR进行比较,检测其准确性和可靠性。结果 19株菌中有16株（84.2%）菌落PCR成功扩增内转录间隔（ITS）区,ITS区基因序列分析鉴定菌种正确,与NCBI数据库中相同菌种的相似度为96% ~ 100%;与常规PCR进行比较的8株菌中,除构巢曲霉菌落PCR扩增结果为阴性外,其他菌种菌落PCR产物及酶切条带与常规PCR基本一致。结论 与常规PCR相比,菌落PCR检测丝状真菌操作简单,省时省力,鉴定菌种具有较高的准确性和可靠性,可以用于丝状真菌的快速鉴定。     

须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型的构建

目的 体外构建须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。 方法 用牛Ⅰ型胶原溶液复合原代成纤维细胞培养3 d后,在其表面利用气液界面培养原代角质形成细胞和黑素细胞12 d得到组织工程皮肤,取新鲜的须癣毛癣菌悬液5 μl对其进行感染,分别在12、24、48、72 h进行HE染色和PAS染色观察。 结果 成纤维细胞复合胶原构建结构致密均匀的组织工程真皮,其上角质形成细胞和黑素细胞形成了层次清晰、结构良好的组织工程表皮。须癣毛癣菌感染该组织工程皮肤后,随时间延长,HE染色和PAS染色显示须癣毛癣菌对组织工程皮肤结构的破坏逐渐加重,至48 h,表皮破坏最明显,至72 h,组织工程皮肤的整体结构被菌丝和孢子所替代。 结论 初步建立了须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。     

葡萄孢弗隆那霉致病性的小鼠模型和基因型研究

目的 探讨两株具有不同最高生长温度的葡萄孢弗隆那霉临床分离株的致病力、基因型的差异。方法 将在37 ℃生长良好的江苏株和在36 ℃不生长的河南株葡萄孢弗隆那霉造成实验性感染,观察动物的发病、死亡以及各脏器受累情况。提取两临床分离株的DNA进行随机扩增多态DNA（RAPD）分析以及核糖体内转录间隔区（ITS区）扩增,并对产物测序。结果 江苏株可造成免疫正常及免疫抑制小鼠的暗色丝孢霉病,前者死亡率为30%,后者死亡率65%,两组间差异有统计学意义。免疫抑制组小鼠的肺脏感染率为100%,明显高于其他脏器,差异具有统计学意义;肝脏直接镜检阳性率为64.7%,组织培养阳性率为70.5%;免疫正常组各脏器感染阳性率差异无统计学意义,肺脏阳性率为57.8%,肝脏为42.1%。免疫抑制组小鼠的肺脏感染率明显高于免疫正常组。河南株在免疫正常组和免疫抑制组均未见导致明确的感染。RAPD和ITS区测序结果显示,在ITS区的236位碱基处有一个碱基的差异（A→G）。结论 两株菌具有不同的基因型;葡萄孢弗隆那霉江苏株可以导致免疫抑制和免疫正常小鼠的系统性暗色丝孢霉病,前者的致死率显著高于后者,致病力与其免疫状态有关;免疫抑制状态下,肺脏是其最常受累的器官。     

尿素液基微量稀释法用于马拉色菌的敏感性试验

马拉色菌属最近被重新分为 7个种 ,糠秕马拉色菌、厚皮马拉色菌、合轴马拉色菌、球形马拉色菌、钝形马拉色菌、限制性马拉色菌、斯洛菲马拉色菌。1992年 ,ＮＣＣＬＳ推荐对酵母菌敏感试验的液体微量稀释法。然而 ,这种方法对马拉色菌属 (厚皮马拉色菌除外 )并不适用 ,因为马拉色菌在无脂质的培养基上不生长。马拉色菌被证实和新生隐球菌一样 ,尿素酶阳性。作者试图建立一个实用的敏感性试验方法去获得多种药物对具有尿素酶活性的 7种马拉色菌抗菌活性的有用资料。试验菌株共 4 2株 (13株糠秕马拉色菌、1株球形马拉色菌、6株钝形马拉色菌、1…     

婴幼儿皮肤念珠菌病的致病菌株及药敏试验分析

目的 分析婴幼儿皮肤念珠菌病的致病菌种类及对抗真菌药物的敏感性。方法 收集皮肤念珠菌病患儿病例，对临床分离的致病菌进行常规菌种鉴定，采用琼脂稀释法（药基法）对临床分离的念珠菌进行6种药物（氟康唑、咪康唑、联苯苄唑、益康唑、克霉唑、制霉菌素）敏感性试验，选取9株白念珠菌临床菌株和1株白念珠菌标准菌株，参考NCCLS M27-A推荐的微量液体稀释法界定琼脂稀释法的药敏分界点，分析耐药性。结果 共收集75例皮肤念珠菌病病例，分离到的88株念珠菌均为白念珠菌，用琼脂稀释法所测的MIC范围是：氟康唑1 ～ 256 mg/L，咪康唑0.25 ～ 64 mg/L，联苯苄唑0.5 ～ 64 mg/L，益康唑0.25 ～ 32 mg/L，克霉唑1 ～ 64 mg/L，制霉菌素0.5 ～ 32 mg/L。临床株对唑类药物均有耐药株出现，氟康唑1株，克霉唑4株，益康唑3株，咪康唑5株，联苯苄唑9株。结论 婴幼儿皮肤念珠菌病主要由白念珠菌引起；白念珠菌对5种唑类药物均有耐药株出现，且有交叉耐药现象，对制霉菌素敏感。     

PCR检测深部致病真菌感染的研究

目的探讨PCR在可疑深部真菌感染临床标本检测中的应用。方法对60份临床标本分别进行传统真菌培养以及真菌通用引物PCR和三重PCR检测。结果真菌培养阳性共19份，其中白念珠菌10份、烟曲霉2份、新生隐球菌2份、其他菌株5份（包括光滑念珠菌2份、热带念珠菌2份、克柔念珠菌1份）；真菌通用PCR检测共有21份阳性，经三重PCR检测共有15份阳性，分别为白念珠菌10份、烟曲霉3份、新生隐球菌2份。PCR方法与传统培养方法相比，检出率差异无统计学意义。结论PCR检测可疑深部真菌感染临床标本快速简便，稳定性好，敏感性和特异性均较理想，适合临床实验室常规使用。