2018—2019年赤道几内亚Bioko岛恶性疟原虫抗药性基因多态性分析

目的　调查赤道几内亚Bioko岛恶性疟原虫多药耐药蛋白1（Plasmodium falciparum multidrug resistance protein 1, PfMDR1）、氯喹抗性转运蛋白基因（P. falciparum chloroquine resistant transporter, PfCRT）和Kelch 13基因（P. falciparum Kelch 13, PfK13）多态性,为当地疟疾防控策略制定提供参考。方法　采集2018—2019年赤道几内亚Bioko岛恶性疟原虫感染者外周血样本85份,提取基因组DNA。采用巢式PCR技术扩增PfMDR1、PfCRT和 PfK13基因,对扩增产物进行DNA测序,并对基因序列进行比对。结果　赤道几内亚Bioko岛恶性疟原虫PfK13基因不存在已知与青蒿素抗性相关的突变;PfMDR1基因和PfCRT基因均存在不同比例抗药性突变,其中PfMDR1_N86Y、PfMDR1_Y184F和PfCRT_K76T突变率分别为35.29%（30/85）、72.94%（62/85）和24.71%（21/85）。结论　赤道几内亚Bioko岛恶性疟原虫PfMDR1、PfCRT基因和 PfK13基因均存在不同程度突变。     

荧光重组酶聚合酶扩增/CRISPR-Cas12a快速检测恶性疟原虫方法的建立与初步评价

目的 建立一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和CRISPR-Cas12a系统的荧光快速检测恶性疟原虫方法,并对其检测效能进行初步评价。方法 选择恶性疟原虫18S核糖体RNA(rRNA)基因为靶序列,设计和合成3组RAA引物及CRISPR来源RNA(crRNA),选择最佳组合并优化反应条件,建立荧光RAA/CRISPRCas12a检测方法。构建包括靶标区的恶性疟原虫3D7株18S rRNA基因质粒,将质粒浓度分别稀释成1 000、100、10、1拷贝数/μL进行荧光RAA/CRISPR-Cas12a反应,评价荧光RAA/CRISPR-Cas12a法检测敏感度;分别以间日疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫、乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、梅毒螺旋体基因组DNA为模板,进行荧光RAA/CRISPR-Cas12a反应,评价荧光RAA/CRISPR-Cas12a法检测特异度。分别采用荧光RAA/CRISPR-Cas12a法和巢式PCR法对50份疟疾临床样本进行检测,比较两种方法检测一致性。体外培养恶性疟原虫3D7株,经培养后获得的培养物...     

黄氏痛经方治疗原发性痛经42例

笔者从2008年9月至2010年12月采用黄氏痛经方治疗原发性痛经42例,取得满意的疗效,现报道如下。1临床资料1.1诊断标准：根据《中药新药临床研究指导原则》及《中医妇科学》中痛经的诊断标准。痛经症状评分标准及痛经轻重程度判定按照《中药新药临床研究指导原则》实行。