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1.
目的 探讨深圳地区地中海贫血基因型特征,及其罕见基因型碱基突变位点.方法 选择2014年5月至2015年10月于广东省深圳市第二人民医院拟行地中海贫血筛查的12 960例受检者为研究对象.研究对象纳入标准:①红细胞平均体积(MCV)<80 fl的门诊及住院患者;②于本院行产前筛查的孕妇.排除标准:①不愿意参加本试验者;②已被确诊为其他血液系统疾病者.受试者先进行血常规MCV、血红蛋白(Hb)电泳和红细胞脆性检测的地中海贫血筛查试验,对筛查试验阳性(红细胞脆性<70%)的患者,采用跨越断裂点PCR及反向斑点杂交(RDB)技术进行地中海贫血基因常见缺失型和点突变的基因型检测.对常见基因型检测不能确诊的患者,采用巢式PCR和PCR-直接测序(SBT)技术进行罕见基因型分析.本研究遵循的程序符合深圳市第二人民医院制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象本人的知情同意,与之签署临床研究知情同意书.结果 12 960例受检者中,地中海贫血筛查试验阳性患者为2 194例,通过常见基因型检测,确诊1 019例为地中海贫血,检出率为46.4%.537例α地中海贫血患者中,以东南亚缺失型(--SEA/αα)比例最高,占66.1%(355/537),其次为α地中海贫血2(-α 3.7/αα)占15.6%(84/537),而基因型(αCS α/αCSα、αQS α/αQS α、αWS α/αWSα)和4种HbH病基因型(-α3.7/αQS ααQS、--SEA /αCS αCS、--SEA/αQS αQS、--SEA/αWS αWS)较为少见.α地中海贫血罕见基因型检出率为0.1%(3/2 194),包括2例HKαα/--SEA及1例HKαα/αα.在456例β地中海贫血患者中,β41-42(-TCTT)/β和β654(C>T) /βA基因型检出率最高,分别为33.8%(154/456)和30.3%(138/456).在26例β复合α地中海贫血患者中,以β复合α地中海贫血1(--SEA/αα)基因型检出率最高(34.6%,9/26).β地中海贫血罕见基因型检出率为0.2%(4/2 194),包括2例β37G>A),突变点为413 G>A或405 G>A,1例β88-93(-AGTG),突变点为557处出现杂合峰,1例β-88(C>T),突变点为-88 C>T.结论 深圳地区地中海贫血基因型有独特的分布特征,巢式PCR技术有助于发现HKαα/--SEA及HKαα/αα基因型.采用PCR-SBT技术能鉴定罕见地中海贫血基因型并发现新突变点.本研究结果为在深圳地区开展遗传咨询和产前诊断提供了参考数据. 相似文献
2.
阑尾切除术后切口感染是阑尾炎并穿孔、坏疽性阑尾炎术后的主要并发症。为了解阑尾炎术后切口感染率,笔者对2009年普外科住院阑尾炎手术治疗的患者进行了目标性监测,现将报道如下。 相似文献
3.
目的:了解医院感染的实际情况,为提高医院感染管理水平提供科学依据.方法:采用床旁和病历相结合横断面调查方法,对住院患者进行了医院感染现患率调查.结果:调查954例住院患者,医院感染36例,医院感染现患率为3.77%.感染部位前3位分别为下呼吸道感染10例(27.78%),上呼吸道感染8例(22.22%),手术切口感染5例(13.89%);严重的基础疾病、肿瘤、糖尿病、使用呼吸机、动静脉置管、泌尿道插管等是医院感染的高危因素.结论:加强医院感染控制,重点监测医院感染高发科室,提高病源学送检率,有效预防和控制医院感染. 相似文献
4.
目的研究HLA—A、B和DRB1基因与糖尿病视网膜病变的相关性。方法收集48名临床诊断为糖尿病视网膜病变(DR)患者的血样,采用rSSO HLA流式磁珠分型方法进行HLA—A、B和DRB1基因定型.统计DR患者HLA—A、B和DRB1三个基因座的基因频率;并引用以往本实验室调查的汉族健康对照人群的HLA基因频率数据,采用Woolf法计算相对危险度值。结果48例DR患者中。HLA—A、B基因频率的分布与正常对照组无显著差异.而DR患者HLA-Ⅱ类DRB1基因.DRB1*01基因频率显著高于正常对照组.而DRBI*12基因频率显著低于正常对照人群,计算RR值分别为5.32和0.34。结论DR患者HLA—A、B基因频率分布与正常对照人群无显著差异,但HLA—DRB1基因与DR具有相关性。 相似文献
5.
目的 建立可靠的HLA-Cw基因全长序列的分子克隆和测序技术.方法 设计合成HLA-Cw基因全长序列PCR引物和探索PCR反应体系,采用长距离PCR技术,扩增HLA-Cw基因非翻泽区(untranslated region,5'-UTR)区、8个外显子、7个内含子和3'-UTR区,全长约4.5 kb.PCR产物纯化后进行分子克隆,筛选阳性克隆,提取质粒DNA,采用自行设计的测序引物进行全长双向测序.12份已经AlleleSEQR HLA-Cw测序分型试剂盒进行PCR产物直接测序、基因型已知的样本,分别用TaKaRa LATaq酶和Stratagene Pfu Taq DNA聚合酶进行HLA-Cw基因全长扩增,以及PCR产物分子克隆和序列测定,克隆测序结果分别与PCR产物直接测序结果进行对比分析.结果 PCR扩增获得了特异性目的 片段,测序获得了HLA-Cw基因-962~3576位碱基全长序列.克隆测序结果的对比表明,Pfu酶保真性高于LA Taq酶.比较本文测定的Cw*010201与Cw*07020101等位基因序列,在5'上游-962~-284位碱基区域存在11个单核苷酸多态(single nucleotide polymorphisms,SNPs)和2个插入(或)缺失多态性位点;3'-UTR下游3067~3576位碱基区域存在11个SNPs和1个插入(或)缺失.结论 建立了HLA-Cw基因全长序列分子克隆及测序方法,在HLA-Cw基因全长序列分子多态性及表达调控等研究领域,具有广泛应用前景. 相似文献
6.
壮族非亲缘男性个体中9个短片段Y-STR基因座遗传多态性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究探讨中国最大少数民族壮族Y染色体特异短串联重复序列(Y-STR)单倍型的遗传多态性。采用多重PCR扩增和ABIPrism^TM3100基因测序仪荧光检测方法,对85名壮族非亲缘男性个体的9个短片段长度Y—STR基因座,进行基因频率和单倍型频率的调查。结果表明:在85名非亲缘男性个体中,除DYS426基因座多态性较低,其余8个基因座的GD值的分布在0.4387—0.8129之间。9个Y—STR基因座的单倍型共有70种.单倍型多样性达0.9926。结论:壮族非亲缘男性个体Y—STR单倍型的遗传多态性丰富,与我们以往的南方汉族非亲缘男性群体遗传资料相比较,具有显著的差异。 相似文献
7.
目的采用参比链介导的构象分析(referencestrandmediatedconformationanalysis,RSCA)技术,建立新型、可靠的HLAA、B高分辩基因分型方法,应用于HLA基因分型及供、受者组织配型。方法采用一对座位特异性引物,扩增HLAA、B基因的第2、3外显子和第2内含子。扩增产物与单链标记荧光物质的参比链按一定比例混合,经变性、退火反应及脱水处理后,在杂交产物中掺入分子量内参标准物,用ABI377型基因测序仪电泳检测。用ABIGeneScan3.1软件分析每一泳道内异源双链波峰的迁移值、峰高及峰面积值,RSCAHLATyper1.3软件分析HLA等位基因型。应用本方法,对第13届国际组织相容性协作组(IHW)送检的20份盲检样本,以及2份HLA等位基因型已知的质控样本进行了检测。结果2份质控DNA的检测结果,与已知的HLA基因型完全相符;20份盲检样本HLAA、B座位的检测结果,与IHW公布的结果完全相同,准确率达100%。结论RSCA为新型、高分辨水平的HLA基因分型方法,并且出现模棱两可结果的情况少,分型结果准确、可靠。 相似文献
8.
腹部手术后低氧血症的原因分析及护理 总被引:8,自引:5,他引:8
为了解腹部手术后低氧血症的相关因素 ,有针对性地加强术后低氧血症的预防及护理 ,对 63例腹部中等以上手术病人手术前后的动脉血氧分压(PaO2 )的变化进行观察 ,结果手术后PaO2 较术前下降2 .2 1kPa± 1.5 6kPa ,并有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;术后79.4%病人出现了低氧血症 ,其中 66.0 %病人于术后 5d~10d恢复。显示上腹部手术、术前有肺部并发症、5 0岁以上病人术后的PaO2 变化明显 ,低氧血症发生率高 ,且持续时间长。建议 :护理人员充分认识腹部手术后的低氧血症 ,并采取术前健康宣教 ,围手术期给予正规的氧疗及有效的呼吸系统管理 ,以防治腹部手术后低氧血症的发生。 相似文献
9.
目的研究皮下注射粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员剂及捐献外周血造血干细胞(PBSC)对无关健康供者的影响.方法28名外周血造血干细胞捐献者在采集前1~5天,皮下注射粒细胞集落刺激因子5mg/kg,连续1~5天皮下注射,观察G-CSF动员和采集时供者出现的不良反应;并对供者在G-CSF动员前、外周血干细胞采集后的健康状况及血常规进行分析.结果经G-CSF动员并采集了干细胞的28名供者中,23名供者(81.4%)未出现任何不良反应;5名供者(18.6%)出现轻微不良反应,并于采集时或采集后一周内自行消失.28名供者捐献造血干细胞后,经健康状况咨询和体格检查,结果未见异常.供者的血常规大多在捐献的15天后恢复到基础水平,与G-CSF动员前无显著性差异(P>0.05);但血细胞计数基础值偏低的供者,采集后白细胞和血小板恢复较慢.结论本研究通过对供者捐献造血干细胞后的体检、血常规检测和随访,结果表明无偿捐献造血干细胞对供者是安全的. 相似文献
10.
两种从陈旧血中抽提基因组DNA方法的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的比较盐析法和磁珠法从陈旧血中抽提基因组DNA的效果和特点,以便常规用于骨髓库HLA基因分型。方法使用TECAN全自动工作站为平台,分别用Gentra盐析法DNA抽提试剂盒和Promega磁珠法DNA抽提试剂,从48份陈旧全血样本中抽提基因组DNA,提取的基因组DNA均溶于100μlTE中;然后用紫外分光光度计测定其产量和纯度,并用琼脂糖凝胶电泳法测定DNA样本的完整性。结果从400μl陈旧全血中提取基因组DNA,用盐析法获得的DNA含量为28.6±8.7ng/μl,A260/A280值平均为1.63±0.209;用磁珠法获得的DNA含量为94.2±10.3ng/μl,A260-A320/A280-A320值平均为1.821±0.102;琼脂糖电泳法检测表明两种方法提取的DNA的分子量均大于15kb。结论使用磁珠法从陈旧血中所获得的DNA的产量和纯度明显高于盐析法,适合于骨髓资料库陈旧血样本的常规HLA基因分型实验以及下游的分子生物学实验。 相似文献