高血压前期氯沙坦干预对成年自发性高血压大鼠阻力血管重塑及血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响

目的观察高血压前期氯沙坦干预对成年自发性高血压大鼠(SHR)阻力血管重塑和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT_1R)表达的影响,探讨AT_1R表达、阻力血管重塑与早期干预引起的大鼠血压变化之间的内在关系。方法 4周龄的Wistar-kyoto(WKY)大鼠和SHR各16只,分别随机分为2组,共4组:WKY组、WKY氯沙坦干预组、SHR组、SHR氯沙坦干预组。干预组大鼠从4周龄开始给予氯沙坦30 mg/(kg·d)灌胃至10周龄,然后停药,尾套法监测收缩压。26周龄的大鼠分离肠系膜三级动脉,HE染色后观察血管结构,PowerLab生物信息采集系统记录血管舒张功能,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及Western-blot检测血管中AT_1R mRNA和蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆和肠系膜动脉中AngⅡ水平。结果 10周龄以后,SHR氯沙坦干预组的收缩压明显低于SHR组[26周:(208±12)比(226±11)mm Hg,P=0.018]。26周龄时,与SHR组相比,SHR氯沙坦干预组的肠系膜三级动脉的管壁厚度/管腔半径(0.17±0.03比0.29±0.08,P0.001)和管壁面积/管腔面积(0.33±0.08比0.47±0.10,P=0.001)较小,内皮依赖性血管舒张功能的最大舒张反应较强[(69.13±4.67)%比(43.87±3.31)%,P0.001],敏感性指标pD2较高(5.28±0.17比4.76±0.19,P=0.007),非内皮依赖性血管舒张反应的pD2也高(6.71±0.17比5.47±0.16,P0.001)。SHR氯沙坦干预组肠系膜动脉中AT_1R的a亚型mRNA(3.50±0.90比5.01±1.02,P0.001)及AT_1R蛋白表达(0.35±0.10比0.50±0.15,P=0.003)低于SHR组,而血浆和肠系膜动脉中AngⅡ水平高于SHR组(P0.05)。10周龄时,WKY氯沙坦干预组收缩压低于WKY组[(104±6)比(122±7)mm Hg,P=0.025]。但14周龄以后,WKY氯沙坦干预组与WKY组间的收缩压及上述血管指标的差异无统计学意义(P0.05)。结论高血压前期氯沙坦干预延缓成年SHR血压升高与阻力血管重塑改善、AT_1R表达下调有关。     

早期氯沙坦干预对成年自发性高血压大鼠心肌DNA甲基化转移酶的影响

目的探讨早期氯沙坦干预对成年自发性高血压大鼠(SHR)心肌DNA甲基化转移酶(DNMT)家族中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的影响及其与血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白(ATRAP)基因启动子区甲基化水平的关系。方法按氯沙坦给药时期将Wistar-Kyoto(WKY)母鼠、SHR母鼠及相应子鼠分为WKY未干预组、SHR未干预组、SHR出生前干预组、SHR出生后干预组、SHR序贯干预组。每组选取8只雄性子鼠用于实验。在子鼠16周龄时,应用尾测法测量血压,称重法测量并计算左心室质量/体质量,重亚硫酸盐修饰聚合酶链反应(PCR)结合焦磷酸测序检测ATRAP基因启动子区的甲基化水平,Western-blot检测大鼠心肌中3种DNMT的表达,染色质免疫共沉淀检测DNMT与ATRAP基因启动子区的相互作用。结果与SHR未干预组相比,SHR出生前干预组、出生后干预组及序贯干预组的血压和左心室质量/体质量降低(均P0.05),心肌中ATRAP基因启动子区的甲基化水平减少(P0.05),DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的表达差异无统计学意义(P0.05),但DNMT1、DNMT3a与ATRAP基因启动子区的相互作用减弱(DNMT1:0.9±0.1,0.9±0.1,1.0±0.1比2.9±0.3;DNMT3a:1.0±0.2,1.1±0.2,1.1±0.2比3.0±0.3,均P0.05)。结论早期氯沙坦干预可减弱DNMT1、DNMT3a与ATRAP基因的相互作用,这可能与SHR心肌中ATRAP基因启动子区的甲基化水平降低有关。