AR-A014418对γδT细胞增殖、凋亡及杀伤功能的影响

目的:观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)选择性抑制剂AR-A014418对体外扩增的γδT细胞的细胞活性包括增殖、凋亡和杀伤功能的影响。方法:采用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞,在γδT细胞完全培养基中培养获得γδT细胞。用不同浓度的AR-A014418诱导培养γδT细胞72 h后,用流式细胞术检测各诱导处理组γδT细胞的增殖、凋亡和杀伤能力;用Western blot检测γδT细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达情况。结果:AR-A014418浓度在0. 3～10μmol/L时能促进γδT细胞的增殖并抑制其凋亡。同时促凋亡蛋白Cleaved caspase-3和Bax表达逐渐减弱,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达逐渐增强。尤其是在3μmol/L时,γδT细胞增殖活性最强,而且体外杀伤人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC-7901细胞活性也显著提高。结论:GSK-3β抑制剂AR-A014418在3μmol/L浓度时,可以抑制体外扩增γδT细胞的凋亡,并能增强其体外增殖和杀伤肿瘤活性,提示AR-A014418具有一定的免疫调节功能,为今后用于体外扩增γδT细胞提供实验依据。     

幽门弯曲菌的生物学特征和证明方法

胃的活检标本中经常发现有细菌存在,一般被认为是沾染或污染引起的,很少考虑到细菌感染是胃疾患的致病菌.自1983年Warren 和Marshall 报道了从慢性活动性胃炎病人胃粘膜中成功培养出被命名为幽门弯曲菌(Campylobacter Pylori,CP)的螺旋状细菌,并指出其与慢性胃炎和消化性溃疡间存在十分明显的关系以来,引起了许多国家微生物学、病理学     

血清乳酸脱氢酶-免疫球蛋白复合物测定的初步探讨

1964年Wildig 首先在一患者血清中发现球蛋白结合性淀粉酶(Globulin-bound amylase)。从而引起了许多学者的注意,相继对球蛋白结合性酶复合物进行了深入研究,并陆续地发现了LDH、ALP、CK 等酶-免疫球蛋白复合物。     

高雷氏病伴发何杰金氏病

肿瘤伴发高雪氏病较为罕见,至今仅3例报道。本文报告的为第4例,该患者按何杰金氏病治疗了6年并经酶测定证实为高雪氏病。患者的葡萄糖脑甙脂酶的测定为3.6毫克分子4-Methylumbelliferyl/mg蛋白/分,其母测定值为24.3毫克分子4-Methylumbe-lliferyl/mg蛋白/分(高雪氏病此酶活力的变动范围为2.9～7.9毫克分子;正常值为35～45毫克分子)。患者双亲可有此酶的部份缺乏,其酶活力界于正常值     

酶联免疫吸附试验检测胸水中结核菌抗原

结核性胸膜炎在目前尚无敏感的诊断方法。胸水中找抗酸杆菌阳性率很低,结核菌培养阳性率也只有4.7～10.5%.我们以卡介苗作抗原,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胸水中结核杆菌抗原,获得了较为满意的结果,现报告如下.一、材料和方法1.特异抗体制备:取皮内接种卡介苗(卫生部上海生物制品研究所),对灭菌生理盐水透析24h,干凝胶中浓缩后(均在4℃下进行),作为菌体抗原。选     

抗原负载的树突细胞介导的特异性抗慢性粒细胞白血病作用

慢性粒细胞白血病 (ＣＧＬ)来源的树突细胞 (ＤＣ)在体外能较强地激发特异性细胞毒Ｔ细胞产生 ,对自身白血病细胞具有较强的杀伤活性[1 ] 。我们探讨ＣＧＬ细胞冻融抗原(ＣＬＡ)负载的ＤＣ与细胞因子诱导的杀伤细胞 (ＣＩＫ)共同培养能否进一步提高特异性细胞毒Ｔ细胞的杀伤活性。材料和方法1　细胞来源　 12例外周血样本采自ＣＧＬ慢性期初诊患者(ＷＢＣ >5 0× 10 9) ,冻存后作为靶细胞及制备ＣＬＡ。采缓解后患者外周血进行ＤＣ及ＣＩＫ细胞培养。2　主要试剂　ｒｈＩＬ 4 (比活性 13Ｕ ｎｇ)、ｒｈＴＮＦα(比活性 36Ｕ ｎｇ)购自Ｐｒｏ…     

光动力疗法对输入的NK细胞在荷Heps肝癌鼠瘤内分布的影响

目的探讨NK细胞输入后在荷Heps肝癌小鼠体内的分布规律,光动力疗法（PDT）对输入的NK细胞在肿瘤组织内分布的影响。方法 96只KM小鼠建立Heps肝癌移植瘤模型后随机分为对照组、细胞组（NK组）和光免疫组（PIT组）,每组32只。对照组小鼠尾静脉输入生理盐水,NK组小鼠尾静脉输入4,＇6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）标记的NK细胞,PIT组小鼠PDT处理后即刻输入DAPI标记的NK细胞。治疗后1、2、4、6和8 d摘取小鼠肝脏、脾脏、肺脏和肿瘤组织,在荧光显微镜下观察NK细胞在上述脏器的动态分布情况;治疗后2 d观察瘤组织的病理学变化;治疗后1、2、4、6和8 d摘除小鼠眼球取血以流式细胞仪检测外周血NK细胞百分率;治疗后6 d LDH释放法检测小鼠脾细胞杀伤活性。结果 （1）各治疗组,输入后1、2、4、6和8 d,NK细胞在小鼠肝脏、脾脏、肺脏和肿瘤组织中均有分布,其中以肿瘤组织内最多;NK细胞在瘤内浸润密度：以输入后2 d最高,而各时间点PIT组又显著高于NK组（P〈0.05）;（2）外周血中NK细胞含量：在治疗后1、2、4和6 d,PIT组较对照组明显增高（P〈0.01）;治疗后1、2和4 d,NK组较PIT组和对照组增高（与PIT组相比,P〈0.05;与对照组相比,P〈0.01）;（3）效靶比为10∶1、20∶1和50∶1时,NK组和PIT组脾细胞杀伤活性均显著高于对照组,其中PIT组又显著高于NK组（P〈0.01）。结论 NK细胞输入荷瘤小鼠体内后能选择性聚集于肿瘤组织内;PDT可增加输入的NK细胞在瘤内的浸润密度,增强小鼠脾细胞对Heps肝癌的杀伤活性。     

β-谷甾醇对人共刺激细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制的探讨

目的探讨β-谷甾醇对用多种细胞因子和刺激分子联合诱导培养的人外周血单个核细胞(共刺激细胞)杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法分离健康者外周血单个核细胞(PBMC)在体外经多种细胞因子诱导为共刺激细胞,不同质量浓度的β-谷甾醇分别作用于共刺激细胞及胃癌SGC-7901细胞24、48、72 h后,CCK8法检测共刺激细胞的生长,MTT法检测胃癌SGC-7901细胞的生长,FCM检测共刺激细胞PFP、GraB、CD107a、IFN-γ的表达;LDH释放法检测共刺激细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性;Western blot检测共刺激细胞中p-ERK1/2、Bcl-2的表达情况。结果培养10 d后,共刺激细胞增殖倍数达高峰。与对照组比较,质量浓度2.5~10μg/ml的β-谷甾醇作用后共刺激细胞的增殖率显著提高(P0.05),质量浓度10~80μg/ml的β-谷甾醇对SGC-7901细胞生长抑制率显著提高(P0.05),并且0.3~5μg/ml的β-谷甾醇作用后的共刺激细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性明显增强(P0.05),共刺激细胞中PFP、GraB、IFN-γ及p-ERK1/2、Bcl-2的表达较对照组显著增加(P0.05)。结论β-谷甾醇在一定质量浓度范围内能够促进共刺激细胞的增殖,并增强其对胃癌SGC-7901细胞的杀伤活性,其机制可能与β-谷甾醇上调共刺激细胞PFP、GraB、IFN-γ的表达,活化p-ERK1/2、Bcl-2有关。     

手术分娩时机对母婴血中CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞的影响

目的探讨手术分娩时机对母、婴血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg)的影响。方法正常初产妇60例,按分娩方式分为阴道分娩(VD)、择期手术分娩(PCS)、急诊手术分娩(ECS)三组,每组20例,用流式细胞仪检测分娩时母体外周血和新生儿脐血T细胞中Treg百分数。结果新生儿脐血中Treg三组间比较差异无统计学意义(P>0.05),但PCS组明显高于VD组(P<0.05);母体外周血中Treg,三组中ECS组>PCS组>VD组,ECS组显著性高于VD组(P<0.01);三组母体、新生儿血中Treg均无相关性(P>0.05)。结论 PCS时新生儿血中Treg增高,可能会对婴儿免疫系统发育有一定的影响;分娩过程异常的ECS母体血中Treg增高可能与产妇免疫失衡有关。