儿童期重症肌无力外周血Th17相关细胞因子的水平

目的:对Th17相关细胞因子在儿童期重症肌无力患者中的表达水平进行研究。方法:选取60例儿童期重症肌无力患者为试验(CMG)组,50例健康对照儿童为正常对照(HC)组,采集2组儿童的外周血,采用ELISA方法对其外周血中IL-23、IL-12/23p40及IL-17A水平进行检测。结果:与HC组相比,CMG组外周血中IL-23、IL-12/23p40及IL-17A的水平明显升高(P0.05)。结论:儿童期重症肌无力患者外周血Th17相关细胞因子水平明显升高,提示其可能参与儿童期重症肌无力的发病过程。     

Cdk5及p35在星形胶质细胞正常及缺血再灌注后的 表达研究

目的:研究细胞周期蛋白依赖性激酶(Cdk)5和p35在星形胶质细胞中的表达及缺血再灌注后的其表达变化趋势。方法:离体培养SD大鼠星形胶质细胞,通过免疫荧光染色观察Cdk5和p35在星形胶质细胞中的表达分布。对培养的星形胶质细胞进行糖氧剥夺/恢复(OGD/R)处理,Western blot检测Cdk5和p35在星形胶质细胞OGD/R后不同时间点的表达变化。结果:Cdk5和p35均在星形胶质细胞中存在表达,以胞浆为主,胞核表达较少;两者表达分布一致。OGD/R后Cdk5和p35的表达呈早期显著上升,后期下降的趋势。结论:Cdk5和p35在星形胶质细胞中均存在表达,以胞浆为主,且两者表达分布基本一致。OGD/R后星形胶质细胞中的Cdk5和p35的表达呈动态变化。     

选择性CDK抑制剂对大鼠局灶性脑缺血后胶质增殖及疤痕形成的抑制作用

目的:探讨选择性周期素依赖性蛋白激酶抑制剂Olomoucine对局灶性脑缺血后星形胶质细胞增殖及胶质疤痕形成的抑制作用。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组12只、模型组27只和干预组33只。3组均手术暴露颅骨,模型组和干预组建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,之后干预组腹腔注射Olomoucine,分别将3组大鼠于处理后3、7、30 d处死,应用免疫组织化学法检测梗死灶周围胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;Western blot法观察损伤侧皮质GFAP、增殖细胞核抗原(PCNA)、周期素蛋白A(CyclinA)和周期素蛋白B1(Cy-clinB1)的表达。结果:缺血后各组梗死灶边缘区GFAP表达明显增强,缺血后7和30 d模型组GFAP表达明显强于干预组(P<0.05),并且7和30 d对照组缺血边缘区可见胶质疤痕形成,尤以30 d最为明显;GFAP、PCNA、Cy-clinA和CyclinB蛋白的表达,模型组明显高于干预组(P<0.05)。结论:Olomoucine可部分抑制胶质细胞的活化增殖及疤痕的形成。该结果提示调控细胞周期可能是治疗脑缺血新的方向。     

NG2胶质细胞在中枢神经系统中的表达与功能

近年来研究发现,在成年哺乳动物中枢神经系统中,胶质细胞的组成除星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞外,还有第4种即硫酸软骨素蛋白多糖(NG2)细胞[1].NG2首次发现是在70年代后期,Stallcup和同事[2]在研究细胞表面分子参与神经元和神经胶质细胞分化时,发现典型的神经元细胞有能力产生动作电位,而胶质细胞不能产生电活动,缺乏电压依赖的离子通道.     

周细胞在神经血管单元中的作用

周细胞是神经血管单元和血脑屏障的重要细胞成分,与毛细血管内皮细胞紧密相连。作为微血管的构成成分之一,周细胞参与脑血流的调控、神经血管生长的调节、神经血管单元稳态的调节和血脑屏障完整性的调控,此外周细胞还具有免疫吞噬、迁移和干细胞潜能。     

紫杉醇对大鼠血管平滑肌细胞G_1-S检查点作用的研究

目的:探讨紫杉醇对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)和血管内皮细胞(VEC)G1-S检查点的作用。方法:将大鼠VSMC与VEC进行原代培养,50 nmol/L紫杉醇干预72 h后进行免疫荧光染色和蛋白印迹法检测。结果:同VEC相比,紫杉醇干预的VSMC中BrdU表达明显增加(均P0.05)。紫杉醇干预的VSMC中cyclin D1、P27表达高于VEC,P21表达较低(均P0.05)。结论:紫杉醇干预的VSMC同VEC相比,在增殖率与细胞周期调节因子表达方面具有明显差异,紫杉醇对VSMC G1-S检查点有特异性调节作用。     

NPPB对星形胶质细胞增殖的抑制作用

目的观察体积调节性阴离子通道阻滞剂NPPB对体外培养星形胶质细胞增殖的影响。方法采用原代培养的大鼠大脑皮层星形胶质细胞,实验分为对照组(正常培养基培养)与NPPB干预组;在不同时间点(0、6、12、24、48h),应用流式细胞技术以及免疫细胞荧光双标法(Brdu/DAPI)检测各实验组星形胶质细胞增殖及细胞周期进展的情况。结果与对照组相比,NPPB干预组在12、24h时星形胶质细胞增殖率较正常对照组降低(P<0.05),同时处于S期细胞的百分率亦相对正常对照组明显下降(P<0.01)。结论体积调节性氯离子通道阻滞剂NPPB可以显著抑制体外培养星形胶质细胞增殖及细胞周期进展,提示VRAC通道参与了体外培养星形胶质细胞的增殖。     

Small RNA interference-mediated gene silencing of TREK-1 potassium channel in cultured astrocytes

This study was aimed to examine the effect of TREK-1 silencing on the function of astrocytes. Three 21-nucleotide small interfering RNA (siRNA) duplexes (siT1, siT2, siT3) targeting TREK-1 were constructed. Cy3-labeled dsRNA oligmers were used to determine the transfection efficiency in cultured astrocytes. TREK-1-specific siRNA duplexes (siT1, siT2, siT3) at the optimal concentration were transfected into cultured astrocytes, and the most efficient siRNA was identified by the method of immunocytochemical staining and Western blotting. The proliferation of astrocytes tranfected with TREK-1-targeting siRNA under hypoxia condition was measured by fluorescence-activated cell sorting (FACS). The results showed that TREK-1 was expressed in cultured astrocytes. The dsRNA oligmers targeting TREK-1 could be transfected efficiently in cultured astrocytes and down-regulate the expression of TREK-1 in astrocytes. Moreover, the down-regulation of TREK-1 in astrocytes contributed to the proliferation of astrocytes under hypoxia condition as determined by cell cycle analysis. It was concluded that siRNA is a powerful technique that can be used to knockdown the expression of TREK-1 in astrocytes, which helps further investigate the function of TREK-1 channel in astrocytes under physicological and pathological condition.     

胶质细胞在癫发病机制中的作用研究进展

癫是神经系统疾病中的一种严重危害人类健康的常见病、多发病,患病率约为1%,发病机制非常复杂。胶质细胞是神经系统的重要组成部分,胶质细胞占脑细胞总数的约90%,包括星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞,其在生理与病理状态下对维护神经系统功能的作用至今未明。胶质细胞不仅与脑的正常生理活动、发育以及神经病理过程有明显关系,而且与神经元的功能活动以及损伤与修复过程有千丝万缕的联系。近年来研究表明胶质细胞在癫的发病机制中扮演重要角色。本文就痫间性发作时胶质细胞功能改变(细胞形态改变、免疫表型改变和细胞增殖活动)…     

大鼠脑缺血再灌注后神经细胞的细胞周期特征的比较研究

目的比较观察大鼠局灶性脑缺血后星形胶质细胞和神经元细胞周期的变化特征。方法采用线栓法大鼠大脑中动脉栓塞模型,利用流式细胞技术检测假手术组和缺血再灌注后不同时间点各组大脑皮层和海马中星形胶质细胞和神经元细胞周期的异常激活和动态变化。结果缺血后大脑皮层中神经元24h时即发生明显细胞周期变化,而3d时进入细胞周期的星形胶质细胞才明显增加;海马中星形胶质细胞却先于神经元进入细胞周期,于24h时细胞周期即发生明显变化,与假手术组比较有显著差异(P<0.01)。结论在不同脑区星形胶质细胞和神经元两者对缺血性脑损伤的敏感性互不相同,并且不同脑区的星形胶质细胞对缺血性脑损伤的敏感性也有不同,脑缺血后2种细胞均出现细胞周期的异常激活。