细胞因子诱导的杀伤细胞对慢性髓性白血病细胞的体外净化作用

在长期骨髓培养(LTBMC)7—9天的基础上,配对比较观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK) 白细胞介素2(IL-2)或淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK) IL-2或IL-2活化的骨髓细胞或单纯LTBMC对慢性髓性白血病(CML)患者骨髓Ph~ 细胞的净化作用。结果为LTBMC CIK IL-2组(n=8)细胞的Ph~ 百分率明显低于单纯LTBMC组(n=8,P<0.001),也低于LTBMC LAN IL-2组(n=3)或单纯IL-2(n=3)。结论:CIK IL-2与LTBMC对CML患者骨髓Ph~ 细胞的净化有明显的协同作用。     

相对定量四色流式细胞术分析正常B淋巴细胞发育成熟过程中的抗原表达规律

流式细胞术因其高度的灵敏性（10～4水平）和可进行多参数分析而成为检测白血病微小残留病（minimal residual disease，MRD）的重要工具。在B系急性淋巴细胞白血病（B-ALL）MRD检测中的作用更是不容忽视。但是由于白血病细胞表达的多样性和个体差异性，以及治疗过程中相当一部分病例会出现肿瘤细胞表达标志改变，尤其是化疗后骨髓中存在大量正常增生的幼稚B淋巴细胞，使MRD的检测难度加大。使用相对定量流式细胞术检测正常B淋巴细胞发育成熟过程中的抗原表达规律，有助于鉴别幼稚B淋巴细胞与MRD，提高MRD的检测灵敏度。     

白血病免疫治疗进展

近来几种免疫治疗被批准正式用于临床治疗肿瘤,如前列腺癌疫苗Provenge治疗前列腺癌、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)的单抗治疗转移性黑色素瘤.2011年2篇报道采用基因工程组装的T细胞(CAR-T细胞)治疗晚期慢性淋巴细胞白血病(CLL)获得突破性进展,使肿瘤免疫治疗又进入新高潮.     

流式细胞术检测异基因造血干细胞移植后多形性淋巴细胞增殖性疾病——附二例报告

目的 研究流式细胞术检测在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后多形性淋巴细胞增殖性疾病诊断中的作用.方法 采用多色流式细胞术诊断allo-HSCT后多形性淋巴细胞增殖性疾病.结果 2例ailo-HSCT患者分别于移植后46 d(+46 d)和+50 d出现高热,多处淋巴结肿大,抗炎治疗无效,骨髓EB病毒DNA水平升高,经流式细胞术检测发现外周血多群轻链限制性单克隆B细胞和(或)浆细胞.诊断为移植后多形性淋巴细胞增殖性疾病.经免疫抑制减量、抗病毒、使用利妥昔单抗、输细胞毒性T淋巴细胞治疗后,经流式细胞术随访监测外周血和(或)骨髓标本.2例患者的B细胞克隆均消失,但是单克隆浆细胞持续存在或者新出现的克隆.1例患者2周后死亡;另1例患者仍在治疗中,外周血未见B细胞和浆细胞,骨髓未见B细胞,可见单克隆浆细胞.结论 使用流式细胞术可以有效诊断移植后多形性淋巴细胞增殖性疾病,并进行病情监测.随访过程中,骨髓标本可能比外周血标本敏感.allo-HSCT患者如果没有淋巴结活检,通过检测外周血也可以发现B细胞异常.     

血液系统合理用药专家圆桌会纪要

1有关白血病治疗药的合理应用 1.1化疗 1.1.1急性白血病:化疗是急性白血病治疗的基础,一般先用化疗使其获得完全缓解,完全缓解后反复化疗,部分患者可以治愈;如在第1次完全缓解后采用造血干细胞移植治疗或免疫治疗,大于50%的患者可以治愈.     

肺癌gp96-多肽复合物/DC疫苗体外诱导CTL反应的实验研究

目的 研究热休克蛋白gp96－多肽复合物负载树突状细胞（dendritic cell,DC）后，能否诱导出gp96－多肽复合物特异性的细胞毒性T细胞（cytotoxic T lymphocyte,CTL）反应。方法 从一例肺癌患者肿瘤组织中提取gp96-多肽复合物和自体肿瘤细胞溶解物，分别负载从该患者骨髓血中培养的DC。以不同形式的抗原／DC疫苗分别刺由患者外周血中分离的淋巴细胞。采用ELISA法检测淋巴细胞所释放的IFN－γ量作为CTL反应的指标；以Cr^51释放实验分析致敏后的淋巴细胞对不同靶细胞的裂解和杀伤作用。结果 所有肿瘤抗原致敏淋巴细胞后均可以诱导产生CTL反应，其中以gp96－多肽复合物／DC疫苗诱导释放的IFN－γ量最高。肿瘤抗原致敏淋巴细胞后对原代培养的肿瘤细胞的杀伤作用高于PG细胞和K562细胞。结论 自体肿瘤组织中提取的gp96－多肽复合物能诱导出肿瘤特异性CTL反应，而负载DC后能激发起更强的CTL。     

自体细胞因子诱导的杀伤细胞治疗急性白血病的临床研究

目的：评价细胞困子诱导的杀伤细胞（ｃｙｔｏｋｉｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｋｉｌｌｅｒ,ＣＩＫ）治疗急性白血病患的有效性及安全性。方法：采用知细胞分离机大量采集患的外周血单个核细胞,再用抗ＣＤ３单抗、白细胞介素２、干扰素γ培养１０ｄ左右,将细胞洗涤后经静脉回输给患。结果：３７例急性白血病患共接受５８疗程ＣＩＫ治疗。３４例血液学缓解期接受ＣＩＫ治疗患的３年持续完全缓解（ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｃｏｍ     

一例伴有der(Y)t(Y;1)异常的多发性骨髓瘤的临床和实验研究

Objective To investigate the clinical significance of a rare chromosome abnormality der (Y)t(Y;1) in a patient with multiple myeloma (MM). Methods The chromosome spread was prepared after 24 h culture of bone marrow. G-banding technique was used to analyze the karyotype. Fluorescence in situ hybridization (FISH) was performed to ascertain the origin of abnormal chromosome detected by conventional karyotypic analysis. Flow cytometry was used to detect the expression of the CD38/CD138/ZAP70. Immunoelectrophore was applied to identify the type of immunoglobulin. Results A complex pattern of chromosome rearrangement was observed : 92, XXYY[3]/49, X, der (Y) t ( Y;1 ) ( q12;q21 ), t ( 11;14)(q13;q32),+18,+20,+21[47]/49,X, idem,del(13q22),ace[1]/98,XX,der(Y)t(Y;1) × 2, + 18,+18,+20,+20,+21, +21[10]/46,XY[19]. The result was confirmed by metaphase-FISH. The type of immunoglobulin was IgD with the level of 6.24g/L. The CD38/CD138 was positive but ZAP70 was negative. Conclusion Structural abnormality of chromosome Y is rare in blood malignancy. Most of them were described in myelodysplastic syndrome or myeloproliferative disorders. It is the first report of der(Y)t(Y;1) abnormality in multiple myeloma.     

第二代CD19-CAR-T细胞治疗难治复发急性B淋巴细胞白血病的经验及问题

为了探索抗CD19嵌合抗原受体基因修饰T（CD19-CAR-T）细胞治疗难治、复发的B急性淋巴白血病（B-acute lymphoblastic leukemia,B-ALL）安全有效的细胞剂量、毒副作用及其处理方法,2015年7月12日至2016年11月20日,笔者团队采用CD19-CAR-T细胞治疗了64例难治复发B-ALL患者。其中55例为原发耐药或难治性血液学复发患者,9例为FCM确认的难治性微小残留白血病(minimal residual disease,MRD )阳性B-ALL患者。在治疗工作早期, 2例死于治疗后相关并发症(treatment related motality, TRM),疗效不可评估,4例未获得完全缓解(NR)。以后通过调整入组标准及回输细胞数,近期连续33例患者均获得完全缓解（CR）,或达到CR但血液细胞计数未正常（CR incomplete, CRi),无1例死亡。CD19-CAR-T细胞治疗达CR后,接受异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT）者80%以上持续FCM-MRD阴性至观察结束,该疗效与第1次CR期(CR1)接受移植者相同;未移植者绝大多数在CR后1年内再次复发。治疗过程中,及时稳妥地处理好细胞因子释放综合征(cytokine releasing syndrome, CRS)及各种引起复发的因素是保证治疗成功的关键。