慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织微血管损伤机制及温阳活血方的干预作用

目的:研究慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织微血管损伤机制及温阳活血方对其干预作用,探讨温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病的保护作用机制.方法:将48只雄性SD大鼠随机分为5组.(1)正常对照组(n=8):予生理盐水灌胃;(2)模型组(n=10):按关木通水煎液10 ml·kg-1·d-1(相当于关木通40 g·kg-1·d-1,马兜铃酸A 2.6 mg·kg-1·d-1)给大鼠灌胃;(3)中药组(n=10):在模型组基础上,再予温阳活血方30 g·kg-1·d-1灌胃;(4)西药组(n=10):在模型组基础上,再予科素亚33.3 mg·kg-1·d-1灌胃;(5)中西药结合组(n=10):在模型组基础上,再予温阳活血方30 g·kg-1·d-1 科素亚33.3 mg·kg-1·d-1灌胃.20周末,光镜观察肾脏病理,采用CD 34免疫组化染色来反映肾组织微血管的损伤情况,实时PCR检测肾组织中Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF mRNA的表达.结果:(1)与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织CD34表达明显降低(P＜0.01);而治疗组大鼠肾组织CD34表达较模型组明显升高(P＜0.05),其中尤以中药组明显(P＜0.01);(2)与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织Ang-1、Tie-2、VEGF mRNA表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Ang-2表达明显升高(P＜0.01);而治疗组大鼠肾组织Ang-1、Tie-2、VEGF mRNA表达较模型组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),中西药结合组Ang-2表达明显减少(P＜0.01).结论:慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织存在微血管的损伤,其损伤机制可能与Ang-1、Tie-2和VEGF mRNA的下调,Ang-2 mRNA上调有关,温阳活血方能明显改善微血管的损伤,对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏具有保护作用.     

温阳活血方对慢性肾脏病2～3期阳虚血瘀型患者疗效观察

目的:观察温阳活血方治疗慢性肾脏病(CKD)2~3期阳虚血瘀型患者的临床疗效。方法:将60例CKD 2~3期阳虚血瘀型患者随机分为治疗组和对照组,各30例,对照组给予西医对症治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用温阳活血方,治疗12周后观察2组临床疗效、肾功能和蛋白尿等变化情况。结果:温阳活血方可以改善治疗组的临床症候,降低血Scr、BUN水平,降低蛋白尿,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:温阳活血方可以有效延缓CKD 2~3期阳虚血瘀型患者肾功能进展,改善患者临床症状,临床安全有效。     

益气温阳方治疗原发性CKD 1-2期蛋白尿的前瞻性临床研究

目的:观察益气温阳方联合西医基础治疗对气阳两虚兼血瘀型原发性CDK 1-2期蛋白尿的临床疗效。方法:采用前瞻性、随机、对照研究的方法,纳入80例气阳两虚兼血瘀型CKD 1-2期患者,随机分为治疗组(40例)和对照组(40例)。所有患者均给予基础治疗,同时治疗组给予益气温阳方口服,对照组给予氯沙坦口服,两组疗程均为24周。比较两组的中医证候疗效和临床疗效,检测并比较两组患者的血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(GFR)、血清胱抑素C(Cys-C)、血白蛋白(ALB)、24 h尿蛋白定量(U-Pro/24 h)、尿微量白蛋白/肌酐(MA/Cr)、尿β2微球蛋白(β2-MG)水平。结果:疗程结束后,治疗组患者的中医证候疗效总有效率为81.58%,对照组为59.46%,治疗组的中医证候疗效优于对照组(P0.05);治疗组患者的临床疗效总有效率为73.68%,对照组为51.35%,治疗组的临床疗效优于对照组(P0.05)。治疗后,两组患者的ALB水平均明显升高(P0.05),且治疗组高于对照组(P0.05);对照组患者的Scr、Cys-C水平明显升高(P0.05,P0.01),而治疗组患者的Cys-C水平明显低于对照组(P0.05),GFR估计值(eGFR)水平明显高于对照组(P0.05)。治疗后,两组患者的U-Pro/24 h、尿MA/Cr、尿β2-MG水平均明显降低(P0.05,P0.01),且治疗组患者的U-Pro/24 h、尿MA/Cr水平低于对照组(P0.05)。结论:益气温阳方联合西医基础治疗可延缓气阳两虚兼血瘀型CKD 1-2期患者肾功能的进展,减少蛋白尿,提高临床疗效。     

何立群肾病学术特点及诊疗经验介绍

正文：何立群主任是上海市名中医,有三十余载临床工作经验,医术精湛,医德高尚,对慢性肾脏病的诊疗有着丰富的经验。慢性肾脏病是一种常见病、疑难病,患病率高,致残率高,如未能及时干预,必将发展为终末期肾病。何主任认为慢性肾脏病主要责之于本虚标实。其早期病机为脾肾亏虚,而气血亏虚是肾脏病中晚期主要病机,标实为风、湿、瘀等。故运用中药早期干预非常重要。现将其诊疗特点及经验介绍如下。     

姜黄素对醛固酮诱导肾间质纤维化的保护作用

目的探讨姜黄素对醛固酮诱导肾纤维化的保护作用和机制。方法雄性SD大鼠行左侧单肾切除后给予醛固酮处理诱导肾间质纤维化,同时分别给予姜黄素、安体舒通以及姜黄素和安体舒通联合处理。留取24 h尿采用ELISA法检测尿糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGK1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-6和TNF-α排泄情况;组织病理切片采用Masson染色观察肾组织纤维化程度,免疫组化和RT-PCR观察各组TGF-β1、结缔组织生长因子(CTGF)和血清糖皮质激素诱导蛋白激酶(SGK1)的表达情况。结果醛固酮能显著增加尿TGF-β1、IL-6和TNF-α水平(P<0.01),姜黄素和安体舒通均能显著减少上述因子的排泄水平(P<0.01),二者合用具有协调作用。病理组织学结果显示,醛固酮可明显促进肾小管间质纤维化以及TGF-β1、CTGF和SGK1等致炎致纤维化因子表达,姜黄素和安体舒通能显著拮抗醛固酮的促炎促纤维化效应,二者合用有协同效应。结论姜黄素能通过抑制致炎致纤维化因子表达而有效拮抗醛固酮诱导的肾间质纤维化。     

抗纤灵方对CKD3～4期患者疗效及机制的临床多中心随机对照研究

目的:通过对CKD3～4期患者临床疗效及体内血管活性因子的影响,证实活血化瘀通络法能有效改善临床症状,延缓慢性肾衰的进展。方法:观察抗纤灵方对临床症状、肾功能、血脂、血管紧张素II、纤维蛋白原、I型胶原、血及尿TGF-β1的影响,并与对照组科素亚相比较。结果:抗纤灵冲剂改善临床症状,降低血清中血管紧张素II、I型胶原水平,增加尿TGF-β1排出、降低血清中甘油三酯和胆固醇,减少蛋白尿。结论:抗纤灵冲剂可能通过抑制体内血管活性因子,减少I型胶原蛋白在肾脏的沉积,干预脂质代谢、减轻蛋白尿,从而延缓肾衰的进展。     

水通道蛋白11参与马兜铃酸损伤人肾小管上皮细胞的体外实验

目的:探讨马兜铃酸(AA)对人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤机制及水通道蛋白11(AQP11)在损伤过程中的作用。方法:将不同浓度的AA(10、20、40μg/ml)作用于体外培养的HK-2细胞,用四甲基偶氮唑盐法(MTT)选择最适浓度AA;用AQP11过表达质粒转染至HK-2细胞并验证,用以观察AQP11是否对AA诱导HK-2细胞转分化具有保护作用。予未转染及转染HK-2细胞分别加入最适浓度AA培养48 h,用ELISA法检测细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)含量,Real-time PCR检测AQP11 mRNA表达,Western印迹法检测AQP11、结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果:MTT法筛选出的AA最适浓度为20μg/ml;转入质粒过表达AQP11培养48 h后AQP11的表达量显著高于空白组(P0.01),提示转染成功。加入20μg/ml AA后,ELISA检测显示,未转染组的TGF-β1表达量较空白组明显上升(P0.05),至48 h达高峰(P0.01),而转染APQ11质粒组则明显低于未转染组(P0.05);PCR检测显示,未转染组AQP11 mRNA的表达量逐渐降低,至72 h显著低于空白组(P0.05),而转染组虽低于空白组(P0.05),但略高于未转染组(P=0.137);Western印迹法检测显示,未转染组α-SMA、CTGF蛋白表达较空白组明显上升(P0.01)、AQP11蛋白逐渐降低(P0.05),转染组48 h的α-SMA、CTGF蛋白表达量均较空白组有所提高(P=0.874,P=0.696),但显著低于未转染组(P0.01)。结论:AA可抑制HK-2细胞增殖,诱导细胞纤维化、坏死;过表达AQP11蛋白可以抑制AA作用下的细胞纤维化发生发展,AQP11表达调控异常可能是AAN的一个重要发病机制。     

温阳活血方治疗慢性肾脏病疗效观察

目的观察温阳活血方治疗慢性肾脏病（CKD）的临床疗效。方法将213例CKD 2～3期阳虚血瘀型患者随机分为对照组105例和治疗组108例,两组给予西医常规治疗,治疗组加服温阳活血方,治疗12周,观察患者临床症状、血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）及24 h尿蛋白定量（24 h UP）、肾小球滤过率（eGFR）,以及安全性评价指标血常规、肝功能、心电图等。结果治疗后,两组血清Scr、BUN、24 h UP均较治疗前不同程度降低,但治疗组较对照组下降更加明显（P均〈0.05）。对照组治疗后eGFR较治疗前有升高趋势,但无统计学差异;治疗组eGFR治疗较治疗前明显升高,两组治疗后eGFR比较,P〈0.05。临床疗效及中医证候疗效比较,治疗组均明显优于对照组（P均〈0.05）。两组治疗后血常规、肝功能、心电图均未见异常,无不良影响发生。结论温阳活血方临床运用安全有效,能改善早期CKD患者临床自觉症状、降低肾功能各项指标,减少蛋白尿。     

姜黄素联合安体舒通改善醛固酮诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化

目的：观察姜黄素联合安体舒通对大鼠肾小管上皮细胞（TECs）转分化影响。方法：将体外培养的醛固酮处理组大鼠TEC分别给予姜黄素、安体舒通和姜黄素联合安体舒通共培养,利用倒置显微镜观察细胞形态,采用RT-PCR及Western blot观察TEC细胞TGF-β1、α-SMA和SGK1表达。结果：醛固酮（10-6M）处理后,大鼠TEC细胞明显发生转分化,TGF-β1、α-SMA和SGK1表达明显升高,姜黄素（10-3M）和安体舒通（10-5M）处理则明显抑制醛固酮诱导TEC细胞转分化效应,二者具有明显的协调效应。结论：醛固酮能显著促进大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、α-SMA和SGK1的表达和细胞转分化,姜黄素联合安体舒通可通过抑制SGK1表达拮抗醛固酮的促炎促纤维化效应。