丙型肝炎病毒包膜基因对核心基因DNA疫苗免疫应答强度的影响

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)包膜基因E1E2对核心基因C DNA疫苗诱生的免疫应答作用。方法 将包含HCV C或CE1E2基因片段插入真核表达载体pcDNA3中,构建重组质粒pHCV-C或pHCV-CE1E2,分别免疫Balb/c小鼠,每间隔2wk加强免疫1次,同时剪尾取血。ELISA法检测免疫小鼠血清中HCV C特异性抗体的水平。以pHCV-C转染并表达HCcAg的BLAB/c小鼠骨髓瘤Sp4/0细胞为靶细胞,采用~(51)Cr释放试验检测特异性CTL的杀伤作用。结果 两个实验组20只小鼠均产生抗HCV C特异性抗体,当效/靶细胞比例为100:1时,CTL的杀伤率均明显高于对照组(p<0.01);而pHCV-CE1E2与pHCV-C组之间,无论是抗HCV C抗体的滴度还是CTL的杀伤率均无显著性差异(p>0.05)。结论 E1E2基因的加入,并没有增加HCV C基因DNA疫苗诱导的抗HCcAg特异性抗体的滴度和CTL的杀伤作用。     

乙型肝炎病毒S基因经显微注射导入SMMC-7721细胞核内的表达

目的探讨细胞核显微注射导入外源基因的方法,观察HBV-S基因导入人肝癌细胞株SMMC-7721后的表达及其稳定性.方法将含有HBV-S片段的质粒pCR3.1-S线性化,通过显微注射仪直接注入培养的SMMC-7721细胞核内,G418筛选后,经EIA和免疫荧光法分别检测细胞培养上清和细胞内HBsAg的表达.结果每注射100～150个细胞可筛选出一个阳性克隆,3个阳性克隆经扩大培养后,其中1个克隆的培养上清经EIA法检测HBsAg阳性,免疫荧光显示细胞膜及细胞质均有HBsAg表达,并持续6 mo以上.结论HBV-S基因经显微注射导入SMMC-7721细胞后获得持续稳定的表达.     

丙型肝炎病毒与荧光素酶融合基因细胞模型的初步建立

Objective　To establish HCV cell culture model which is easy to measure. Methods　Controllable retroviral vector with fusion gene of hepatitis C virus (HCV) cDNA and luciferase (luc) reporter gene was constructed by molecular cloning technique, the transfection of this retroviral vector in a human hepatic carcinoma cell (HHCC) line was performed by lipofectAMINE and then luciferase activity in the cellular lysate was measured by scintillation counter. Results　 ① Fusion gene of the HCV 5′ NCR-C region and luciferase reporter gene identified by restriction endonuclease cleavage have been cloned into pBPSTR1 vector. ② The luciferase activity could maintain up to 20 days at least, and could be increased by puromycin treatment and regulated by tetracycline. Conclusion　A cell model for expression of HCV C-E1 and luciferase genes was established for gene therapy studies against HCV C-E1 sequences.     

转基因小鼠在乙型肝炎研究中的应用

乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠模型是研究HBV基因结构与功能、肝炎发病机理以及抗病毒治疗的有用工具。本文简要综述该动物模型的应用研究现状。     

甲型病毒性肝炎75例临床分析

1990年2～5月武汉地区发生甲型病毒性肝炎(甲肝)流行,3月上旬达高峰,我科共收治病人144例,现将其中3月份住院的75例作一分析,报告如下。临床资料一、一般资料75例中,男38例,女37例,性别之比约为1:     

抗HCV不同位点核酶细胞内活性的比较

研究针对ＨＣＶ 5′ＮＣＲ2 13位点和Ｃ区 4 98位点的核酶细胞内对ＨＣＶ基因表达的抑制作用。应用ＷＩＳＨ ｎｃ转基因细胞模型 ,通过脂质体法转染核酶表达载体 ,经发光检测仪测定荧光素酶报告基因的表达变化。结果表明 ,核酶 2 13和核酶 4 98均能在细胞内降低荧光素酶的表达 ,转染后 7ｄ内的抑制率为 4 2 .94 %～ 67.81% ,但两者比较无显著性差异。构建的两个核酶表达载体均能在ＷＩＳＨ ｎｃ细胞内有效地抑制ＨＣＶ基因的表达。抗HCV不同位点核酶细胞内活性的比较@贾战生!710038$西安第四军医大学唐都医院感染科 @焦成松!710038$西…     

某通讯连一起急性血吸虫病暴发的调查随访

某通讯连一起急性血吸虫病暴发的调查随访焦成松葛亚阎有功①黄展兴（广州军区武汉总医院传染科）１９９５年９月２１日至１０月５日，驻武汉某部通讯连一起急性血吸虫病暴发流行。发病３０例，罹患率９３．７５％。现将调查及随访情况报告如下。１调查经过１９９５年９月...     

氢化考的松佐治甲型肝炎疗效观察

1992年1月至3月,武汉市流行甲型肝炎,短期内病人剧增,仅我科即收治235例。为探索减轻病人急性期消化道反应和缩短住院时间,在治疗过程中,我们对部分病例加用氢化考的松短程疗法,取得满意的效果。 方法 一、病例选择: 住院甲型肝炎病人60例,均为典型急性黄疸肝炎,男34例,女26例,年龄14～55岁,血清抗HAV— IgM全部阳性,HBsAg阳性和/或搞HBe、抗     

丙型肝炎病毒与荧光素酶融合基因细胞模型的初步建立

为了建立易于检测且稳定的丙型肝炎病毒 (HCV)细胞模型 ,利用基因重组技术 ,构建了 HCV c DNA与荧光素酶 (luc)融合基因的可调控逆转录病毒载体 ,通过脂质体介导方法转染人肝癌细胞 (HHCC) ,观察 luc基因的表达活性 .结果表明 :成功地将luc基因融合于 HCV C和大部分 E1区基因下游 ,构建了带 HCV- luc融合基因的真核表达载体 (p BPST- HCV- luc) ;该载体在细胞内有效表达 luc活性 ,puromycin筛选可提高 luc的表达水平 ,并可受四环素调节 .结果说明 :初步建立了表达 HCV C- E1和luc融合基因的可调控细胞模型 ,为以 HCVC- E1为…     

白细胞介素-12对DNA疫苗治疗小鼠丙型肝炎病毒的增强作用

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