从考试成绩谈病理生理学教、学、考的改革

为了顺应国际医学教育的发展,保障和提高我国高等医学教育水平,教育部和全国高等医学教育会正在启动医学教育质量认证,在认证标准中注重了医学生分析解决问题能力、临床思维及人际交往能力的考核。病理生理学是高等医学教育的一门主干课程,是     

载脂蛋白A-Ⅰ对三磷酸腺苷结合盒转运体A1的影响

目的：以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象，观察载脂蛋白A-I对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的影响,从而探讨载脂蛋白A-I对动脉粥样硬化(As)发生发展的影响。方法:用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出, 高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量, 运用逆转录-多聚酶链反应和Western 印迹分别检测ABCA1 mRNA 与ABCA1蛋白的表达,用流式细胞术检测细胞平均ABCA1荧光强度。 结果:载脂蛋白A-I引起THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性减少, 而ABCA1蛋白质水平、细胞平均ABCA1荧光强度以及细胞内胆固醇流出呈时间依赖性增加,但ABCA1 mRNA没有明显变化。巯基蛋白酶抑制剂(leupeptin 和ALLN)增加ABCA1蛋白质水平,而其它蛋白酶抑制剂(pepstatin A、aprotinin及phosphoramiddon)不增加ABCA1蛋白质水平,蛋白体抑制剂(lactacytin)和溶酶体抑制剂(NH4Cl)也不影响ABCA1蛋白质水平。 结论:巯基蛋白酶可降解THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1蛋白质,而载脂蛋白A-I可阻碍巯基蛋白酶降解ABCA1蛋白质,从而提高THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 蛋白质水平, 增加细胞内胆固醇流出, 降低细胞内胆固醇聚积。     

健脾益肾汤与活血汤对肾硬化的作用

目的探讨健脾益肾汤与活血汤对阿霉素肾硬化大鼠的作用及其机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组、肾硬化组、健脾益肾汤组和活血汤组,复制阿霉素肾硬化模型,用健脾益肾汤和活血汤进行干预,观察肾组织病理改变,检测肾组织Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白表达水平。结果肾硬化组的尿蛋白、血肌酐、尿素氮、肾组织病理改变和Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白表达水平均明显高于正常对照组(P<0.05);两药物治疗组均较肾硬化组明显减轻(P<0.05);活血汤组的肾损伤指数和肾组织Ⅲ型、Ⅳ型胶原蛋白表达较健脾益肾汤组明显减轻(P<0.05)。结论活血汤、健脾益肾汤均能改善阿霉素肾硬化大鼠的肾功能和肾组织病理损害,减轻肾脏组织纤维化,活血汤效果明显优于健脾益肾汤,其作用机制可能与降低肾组织Ⅲ型、Ⅳ型胶原蛋白表达有关。     

葛根素对脑缺血再灌注大鼠脑组织eNOS蛋白表达的影响

目的观察葛根素对脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及脑组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达的影响。方法采用神经功能缺损评分评价脑缺血再灌注模型大鼠神经功能变化,取脑测定脑含水量、脑梗死面积和脑组织eNOS蛋白的表达。结果治疗组神经功能缺损较对照组明显减轻,其脑含水量和脑梗死面积减少,脑组织eNOS蛋白表达也减少,但较假手术组高。结论葛根素可通过减少脑缺血再灌注亚急性期脑组织eNOS蛋白的表达而发挥脑保护作用。     

载脂蛋白AⅠ与三磷酸腺苷结合盒转运体A1相互作用的机理探讨

以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,观察载脂蛋白AⅠ对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1的影响 ,以便探讨载脂蛋白AⅠ对动脉粥样硬化发生发展的影响。用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量 ,运用逆转录—多聚酶链反应和Western印迹分别检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA与三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白的表达 ,采用流式细胞术检测细胞平均三磷酸腺苷结合盒转运体A1荧光强度。实验显示载脂蛋白AⅠ引起THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性减少 ,而三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平、细胞平均三磷酸腺苷结合盒转运体A1荧光强度以及细胞内胆固醇流出呈时间依赖性增加 ,但三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA没有明显变化。巯基蛋白酶抑制剂 (leupeptin和ALLN)增加三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平 ,而其它蛋白酶抑制剂 (pepstatinA、aprotinin及phosphoramiddon)不增加三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平 ,蛋白体抑制剂 (lactacytin)和溶酶体抑制剂 (NH4 C1)也不影响三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平。提示巯基蛋白酶可快速分解THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷     

葛根素预处理对大鼠脑缺血早期脑组织eNOS的影响

目的: 研究葛根素在脑缺血早期的脑保护作用是否与脑组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达有关。方法: 45只大鼠随机分为3个研究组:假手术组(S组)5只、脑缺血组(M组)20只和葛根素预处理组(P组)20只。其中,P组和M组又分别分为脑缺血0.5 h、1 h、2 h、4 h 4个亚组。除假手术组外其它大鼠制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,P组在手术前10 min腹腔注射葛根素(100 mg/kg),M组和S组在同样时点注射等量生理盐水。采用神经功能缺损评分、神经元尼氏体染色评价脑组织功能及形态变化;采用免疫组化和Western blotting方法检测脑组织eNOS,观察其分布和表达水平。结果: P组各亚组神经功能缺损评分较对应时点的M组减轻(P<0.05),神经元尼氏体溶解也较M组减少,其脑组织eNOS蛋白质的表达均明显高于对应时点的M组(P<0.05)。结论: 葛根素预处理对大鼠脑缺血早期的脑保护机制可能与其上调脑组织eNOS蛋白质表达有关。     

三磷酸腺苷结合盒转运体A1在糖尿病小型猪组织中表达的变化

用贵州小香猪建立 2型糖尿病动物模型 ,探讨糖尿病小型猪三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的变化。采用高脂高蔗糖饲料喂养贵州小香猪 ,建立 2型糖尿病动物模型。血浆总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和葡萄糖的浓度均用氧化酶法测定 ,血浆游离脂肪酸用比色法测定 ,采用逆转录—聚合酶链反应、Western印迹和免疫组织化学法分别检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA和蛋白质的表达。喂养 6个月后 ,实验组与正常对照组比较 ,空腹血糖值明显升高 ;空腹胰岛素水平在头 3个月轻度升高 ,在第 6个月末其水平降低 ;血清总胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸水平升高。采用逆转录—聚合酶链反应检测组织细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA的表达 ,结果显示 ,与对照组小型猪比较 ,实验组小型猪肝组织、冠状动脉和肾组织三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA表达上调 (P <0 .0 5 )。Westernblot检则肝组织、冠状动脉和肾组织三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质的表达 ,结果显示 ,与对照组小型猪比较 ,高脂高蔗糖饲料喂养的小型猪肝组织、冠状动脉和肾组织三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质表达明显增高 (P <0 .0 5 )。免疫组织化学检测的结果与Westernblot检则结果相一致 ,实验组小型猪肝组织、冠状动脉和肾组织切片上棕褐色或棕黄色     

氧化型低密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的影响

观察氧化型低密度脂蛋白对THP 1巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1和胆固醇流出的影响。用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,流式细胞术检测细胞的三磷酸腺苷结合盒转运体A1平均荧光强度。THP 1巨噬细胞与 5 0mg L氧化型低密度脂蛋白孵育不同时间即 6、12、2 4、4 8h ,油红O染色 ,显微镜下观察 ,可见细胞内脂滴由小而少逐渐地变为大而多 ,特别到 4 8h时非常明显地增多变大。油红O染色细胞计数分别为 2 6± 3个、30± 4个、4 3± 5个、5 4± 5个。 2 4h和 4 8h时分别与 6h时比较 ,油红O染色细胞明显增多 (P <0 .0 5 )。用 5 0mg L氧化型低密度脂蛋白孵育THP 1巨噬细胞不同时间即 6、12、2 4、4 8h ,测量胆固醇流出。结果显示氧化型低密度脂蛋白对THP 1巨噬细胞胆固醇流出的影响依时间不同而有所不同 ,在 6、12、2 4、4 8h时胆固醇流出分别为 2 .2 %、2 .9%、6 .3%、7.8% ,2 4h、4 8h时分别与 6h时比较 ,胆固醇流出明显增多 (P <0 .0 5 )。氧化型低密度脂蛋白使THP 1巨噬细胞的三磷酸腺苷结合盒转运体A1平均荧光强度从 6h时的 11.1增加到 4 8h的 32 .2。提示氧化型低密度脂蛋白可上调THP 1巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1的表达并增加胆固醇流出。