载脂蛋白AⅠ与三磷酸腺苷结合盒转运体A1相互作用的机理探讨 |
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引用本文: | 唐朝克,唐国华,易光辉,王佐,刘录山,王双,袁中华,杨峻浩,阮长耿,杨永宗.载脂蛋白AⅠ与三磷酸腺苷结合盒转运体A1相互作用的机理探讨[J].中国动脉硬化杂志,2003,11(6):525-525. |
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作者姓名: | 唐朝克 唐国华 易光辉 王佐 刘录山 王双 袁中华 杨峻浩 阮长耿 杨永宗 |
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作者单位: | 南华大学心血管病研究所,湖南省衡阳市,421001 |
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摘 要: | 以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,观察载脂蛋白AⅠ对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1的影响 ,以便探讨载脂蛋白AⅠ对动脉粥样硬化发生发展的影响。用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量 ,运用逆转录—多聚酶链反应和Western印迹分别检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA与三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白的表达 ,采用流式细胞术检测细胞平均三磷酸腺苷结合盒转运体A1荧光强度。实验显示载脂蛋白AⅠ引起THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性减少 ,而三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平、细胞平均三磷酸腺苷结合盒转运体A1荧光强度以及细胞内胆固醇流出呈时间依赖性增加 ,但三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA没有明显变化。巯基蛋白酶抑制剂 (leupeptin和ALLN)增加三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平 ,而其它蛋白酶抑制剂 (pepstatinA、aprotinin及phosphoramiddon)不增加三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平 ,蛋白体抑制剂 (lactacytin)和溶酶体抑制剂 (NH4 C1)也不影响三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平。提示巯基蛋白酶可快速分解THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷
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关 键 词: | 载脂蛋白AⅠ 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 作用机理 高效液相色谱 胆固醇 脂蛋白 |
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