八段锦在冠心病心功能不全患者康复中的作用研究进展

正近年来,心血管疾病已成为威胁人类生命健康的"首要"杀手,其中冠心病心功能不全占据重大比例,是一种具有高发病率和病死率的心血管疾病。随着心脏康复医学的开展,在改善冠心病心功能不全患者的生活质量及预后转归等方面取得较好疗效。运动康复疗法逐渐成为心脏康复的核心疗法,八段锦是具有中医特色的传统运动疗法,近年来受到广泛关注。本文就近年来有关八段锦在冠心病心功能不全患者康复的研究进展进行探讨。1心功能不全是冠心病的终末期转归根据《中国心血管病报告2018》~([1])推算心血管病     

促红细胞生成素通过PI3-K/Akt信号通路抑制血管紧张素II诱导的新生大鼠心脏成纤维细胞增殖

目的： 探讨促红细胞生成素（EPO）对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响,以及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3-K/Akt）信号途径和一氧化氮合酶（NOS）的作用。方法: 应用胰酶和胶原酶双酶和差速贴壁法分离培养新生大鼠CFs细胞,应用EPO、Ang Ⅱ、PI3-K抑制剂LY294002、NOS抑制剂L-NAME不同因素干预。细胞计数和MTT法作出CFs的生长曲线,检测CFs的增殖。化学酶法检测CFs培养液中的一氧化氮（NO）浓度以及总NOS和其亚型的活性。Western blotting检测Akt、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱生型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白的表达。结果: Ang Ⅱ促CFs增殖的作用显著。EPO剂量依赖性的增加CFs培养液中的NO浓度,同时剂量依赖性的抑制Ang Ⅱ诱导的CFs增殖。在给药后第4 d,和单纯的Ang Ⅱ相比,浓度为5×103 U/L、1×104 U/L和2×104 U/L EPO对CFs增殖的抑制率分别达到了24.4％、41.5%和50.5%。EPO显著提高Akt的磷酸化水平,促进eNOS蛋白的表达。应用PI3-K抑制剂LY294002和NOS抑制剂L-NAME均能使培养液中的NO浓度也随之下降,EPO抑制Ang Ⅱ诱导CFs增殖的作用均被阻断。但LY294002同时阻断了eNOS蛋白表达,而L-NAME对eNOS没有影响。结论: EPO可剂量依赖性的抑制Ang Ⅱ诱导的新生大鼠CFs的增殖。其作用机制是通过激活PI3-K/Akt信号途径促使CFs中eNOS表达来促进NO的生成,从而抑制CFs的增殖。     

促红细胞生成素通过P13-K／Akt信号通路抑制血管紧张素Ⅱ诱导的新生大鼠心脏成纤维细胞增殖

目的：探讨促红细胞生成素（EPO）对血管紧张素11（AngⅡ）诱导的心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响,以及磷脂酰肌醇-3-激酶／蛋白激酶B（P13-K／Akt）信号途径和-氧化氮合酶（NOS）的作用。方法：应用胰酶和胶原酶双酶和差速贴壁法分离培养新生大鼠CFs细胞,应用EPO、AngⅡ、P13-K抑制剂LY294002、NOS抑制剂L—NAME不同因素干预。细胞计数和MTT法作出CFs的生长曲线,检测CFs的增殖。化学酶法检测CFs培养液中的-氧化氮（NO）浓度以及总NOS和其亚型的活性。Western blotting检测Akt、P—Akt、内皮型-氧化氮合酶（eNOS）和诱生型-氧化氮合酶（iNOS）蛋白的表达。结果：AngⅡ促CFs增殖的作用显著。EPO剂量依赖性的增加CFs培养液中的NO浓度,同时剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的CFs增殖。在给药后第4d,和单纯的AngⅡ相比,浓度为5×10。U／L、1×10^4U／L和2×10^4U／LEPO对CFs增殖的抑制率分别达到了24．4％、41．5％和50．5％。EPO显著提高Akt的磷酸化水平,促进eNOS蛋白的表达。应用P13-K抑制剂LY294002和NOS抑制剂L—NAME均能使培养液中的NO浓度也随之下降,EPO抑制AngⅡ诱导CFs增殖的作用均被阻断。但LY294002同时阻断了cNOS蛋白表达,而L—NAME对cNOS没有影响。结论：EPO可剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的新生大鼠CFs的增殖。其作用机制是通过激活P13-K／Akt信号途径促使CFs中eNOS表达来促进NO的生成,从而抑制CFs的增殖。     

促红细胞生成素对新生大鼠心脏成纤维细胞氧化应激时一氧化氮合酶系统的影响

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对心脏成纤维细胞(CFs)氧化应激时一氧化氮合酶(NOS)系统的影响,以及PI3-K/Akt信号途径在其中的作用。方法:应用胰酶和胶原酶双酶法分离培养新生大鼠CFs,EPO、过氧化氢(H2O2)和PI3-K抑制剂LY294002不同因素干预。化学酶法检测CFs培养液中的NO浓度以及总NOS和其亚型的活性。Western blot检测Akt、p-Akt、eNOS、iNOS蛋白的表达。结果:氧化应激使CFs中iNOS的表达显著上调,活性增强;eNOS蛋白的表达明显下降。同时CFs培养液中NO的合成增加显著,达到(25.94±2.57)μmol/L,是对照组的4倍多(P<0.01)。EPO显著抑制CFs氧化应激时iNOS蛋白的表达,同时上调eNOS蛋白,总的NO浓度也显著下降。Akt磷酸化形式p-Akt的表达水平也明显提高。PI3-K抑制剂LY294002能阻断EPO促进eNOS和p-Akt蛋白表达的作用,但EPO抑制iNOS的作用不能完全被阻断。结论:EPO能促进新生大鼠CFs氧化应激时eNOS蛋白的合成,抑制iNOS蛋白的表达。其促进eNOS的表达是通过激活PI3-K/Akt细胞信号途径来实现,抑制iNOS的机制有待进一步探讨。     

MicroRNAs与心血管疾病的相关性研究

MicroRNAs （miRNAs）是一类高度保守的内源性非编码单链小分子 RNA,通过降解 mRNA或抑制蛋白质翻译而调控基因的表达。已有大量研究证明miRNA在心血管疾病病因、进展、诊断及治疗方面具有重要作用,现对miRNAs与心血管疾病相关性的研究进展作一综述。     

体部伽玛刀治疗原发性肝癌的临床疗效和不良反应

目的：收集行体部伽玛刀治疗原发性肝癌患者的临床资料,分析其治疗方案及近期疗效,为原发性肝癌患者的临床治疗提供参考依据。方法：选择633例无法行手术治疗的原发性肝癌患者行伽玛刀治疗,按照国际抗癌联盟（UICC）公布的TNM分期方法,有明确TNM分期的患者351例,其中T3期患者251例（71.5%,251/351）,T4期患者57例（16.2%,57/351）。每次分割剂量为200~600 cGy,照射次数为2~13次,每日或隔日照射,每周5次,40%~85%等剂量曲线覆盖计划靶区（PTV）。治疗结束后2~3个月45例患者行影像学及肿瘤标志物等复查,观察肿瘤直径变化情况,评价其近期疗效。结果：伽玛刀治疗期间,229例（36.2%）患者发生了不良反应,100例（15.8%）患者出现白细胞降低,137例（21.6%）患者出现血小板降低。出院时601例患者病情好转,22例无明显变化,5例病情加重,5例死亡。接受累积剂量为3000cGy~和3500 cGy~组患者症状好转比例均高于累积剂量<3000 cGy组（P<0.05）。45例出院患者随访,2~3个月的部分缓解（PR）患者占80%（36/45）,稳定（SD）患者占20%（9/45）,总有效率为80%（36/45）。不同肿瘤直径、单次剂量和累积剂量组有效率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：体部伽玛刀治疗原发性肝癌患者不良反应发生的比例较低,近期有效率较为理想;体部伽玛刀治疗原发性肝癌患者是一种安全有效的治疗方法。     

NF-κB介导ADMA上调大鼠腹腔巨噬细胞LOX-1的表达

目的 探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠腹腔巨噬细胞的氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达是否受核因子-κB(NF-κB)的调控.方法 分离培养大鼠腹腔巨噬细胞.实验分组:正常对照组,以含10%胎牛血清(FBS)DMEM培养液与巨噬细胞共孵育;氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)组,在培养液中加oxLDL(50 mg/L);A+O组,在培养液中加ADMA(15 μmol/L)和oxLDL(50 mg/L);P+A+O组,在培养液中加吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,25 μmol/L)、ADMA(15 μmol/L)、oxLDL(50 mg/L).以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot分别检测LOX-1 mRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMSA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性.结果 oxLDL组与A+O组LOX-1 mRNA和蛋白表达比对照组明显增强,以A+O组尤为明显(均 P ＜0.05);P+A+O组LOX-1 mRNA和蛋白表达较A+O组降低(P ＜0.05).与对照组相比,oxLDL组与A+O组NF-κB活性明显增强,以A+O组尤为明显(均 P ＜0.05);P+A+O组NF-κB活性较A+O组降低(P ＜0.05).相关分析:NF-κB活性与LOX-1 mRNA和蛋白表达量呈正相关(均为 r =0.82,P ＜0.05).结论 ADMA可能通过NF-κB途径增强LOX-1表达而促进巨噬细胞转化为泡沫细胞,促进动脉粥样硬化的发生发展.     

间充质干细胞条件培养基治疗肝氧化应激损伤中部分miRNA的变化

目的:研究采用人脐带间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)治疗肝细胞氧化应激损伤中微小RNA(miRNA)的差异性表达并探讨其调控机制。方法:制备人正常肝细胞株L02氧化应激损伤模型,体外分离培养健康人脐带间充质干细胞并制备MSC-CM。损伤模型经MSC-CM治疗,用凋亡、细胞活力、细胞周期及线粒体膜电位等实验验证其治疗效果。定量RT-q PCR筛选差异性表达miRNA。应用生物信息学预测其靶蛋白后使用Western blot实验验证。结果:MSC-CM治疗可以显著减少H2O2氧化应激损伤所致的细胞凋亡比率,增加细胞活力,调节细胞周期。经RT-q PCR筛选出显著差异表达的miR-143、miR-145、miR-301a与let-7a,均在损伤后表达升高,而在MSC-CM作用后表达降低。Western blot实验结果显示miR-143的预测靶蛋白HK2和ADRB1的表达在肝细胞损伤后降低,MSC-CM作用后升高,与miR-143调控趋势一致。结论:MSC-CM治疗可能通过调节相关miRNA及其靶蛋白逆转H_2O_2所致肝细胞氧化应激损伤。     

核因子-κB介导非对称性二甲基精氨酸上调大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达是否受核因子-κB(NF-κB)调控。方法:分离培养原代Wistar大鼠腹腔巨噬细胞。分组:①正常对照组:以含10%胎牛血清(FBS)DMEM培养液与巨噬细胞共孵育;②氧化型LDL(oxLDL)组:在培养液中加oxLDL50mg/L;③A+O组:在培养液中加ADMA(15μmol/L)和oxLDL(50mg/L);④P+A+O组:在培养液中加NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,25μmol/L)、ADMA(15μmol/L)和oxLDL(50mg/L)。以实时荧光定量PCR和Westen blotting分别检测iNOSmRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMSA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性。结果:①与正常对照组相比,oxLDL组与A+O组iNOSmRNA和蛋白表达增强,以A+O组尤为明显,2组比较差异有统计学意义(P0.05);P+A+O组iNOSmRNA和蛋白表达降低,与A+O组比较差异有统计学意义(P0.05)。②与正常对照组相比,oxLDL组与A+O组NF-κB活性增强,以A+O组尤为明显,2组相比差异有统计学意义(P0.05);P+A+O组NF-κB活性降低,与A+O组相比差异有统计学意义(P0.05)。③相关分析:NF-κB活性与iNOSmRNA和蛋白表达量均呈正相关。结论:ADMA可能通过NF-κB途径增强iNOS表达而促进巨噬细胞转化为泡沫细胞、促进动脉粥样硬化的发生发展。