平卧菊三七提取物抗氧化活性研究与抗氧化特征成分的HPLC-MS/MS分析

目的:采用DPPH体系测定平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物的抗氧化活性,并利用液质联用(HPLC-MS/MS)技术分析了活性较高的乙酸乙酯部位的抗氧化特征性成分。方法:对平卧菊三七地上部分提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水部位。考察平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物对清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的能力以及通过液质联用电喷雾四级杆飞行时间质谱仪(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对其活性部位中的化学成分进行定性分析。采用液质联用(LC-MS/MS),C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI负离子模式下采集数据。通过质谱数据分析,并与对照品及文献对照,对其进行成分鉴定。结果:平卧菊三七地上部分不同极性提取物对DPPH自由基都具有清除力,其中乙酸乙酯部位的清除能力最强。通过其质谱数据分析,并与对照品及相关文献对照,共鉴定出11个化合物。结论:应用DPPH抗氧化活性筛选及HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术能够快速准确地发现平卧菊三七地上部分抗氧化活性成分,为进一步研究平卧菊三七的药效物质基础提供参考。     

脾切除贲门周围血管离断术治疗470例门静脉高压症疗效分析

目的总结脾切除贲门周围血管离断术治疗不合并肝癌及胆管癌的门静脉高压症患者的疗效。方法对不合并肝癌及胆管癌的门静脉高压症患者行脾切除贲门周围血管离断术并随访470例,其中肝炎后肝硬化436例,占92．8％。结果出血患者424例,手术止血率为993％（421／424）,围手术期病死率为1．4％（6／424）,主要死亡原因是上消化道出血、肝肾功能衰竭;急症及择期手术424例,预防手术46例,预防手术嗣手术期无死亡。平均随访时间4年,出血患者术后复发出血率为3．2％（15／470）,预防手术后无出血,肝性脑病发生率为1．9％（9／470）。结论脾切除贲门周围血管离断术防治门静脉高压症引起的上消化道出血效果好。合理选择手术适应证及手术时机、完全彻底断流、术后早期抗凝及近端脾静脉结扎预防术后肝外门静脉系统血栓形成是提高手术疗效的必要措施。     

肝硬化合并急腹症33例外科处理体会

目的:对肝硬化合并急腹症的外科治疗进行经验性总结。方法:回顾分析我科1999年6月至2004年6月收治的33例肝硬化合并急腹症临床资料。结果:3例急性梗阻性化脓性胆管炎合并胰腺炎,未及手术而死亡。9例急性阑尾炎,2例术后恢复顺利,7例发生了手术切口感染。6例急性结石性胆囊炎,保守治疗3例,其中1例治愈,2例中转手术,术后死亡;急诊手术3例,2例治愈,1例死亡。3例上消化道穿孔,术后死亡2例,1例发生肺部和手术切口感染。7例自发性腹膜炎,术后死亡4例,1例切口感染,2例恢复顺利。3例急性肠梗阻均行保守治疗,恢复良好。2例嵌顿性腹股沟斜疝,手法复位失败,行手术复位,疝修补术,恢复顺利。全组26例接受手术治疗,手术死亡率34.62%(9/26),手术并发症率69.23%(18/26)。术前肝功能储备越差,手术并发症和手术死亡发生率越高,统计学比较差异显著(P<0.05)。结论:肝硬化合并急腹症病情经过凶险,手术治疗效果不佳,如何降低其发病率,提高救治成功率,有待进一步探索。     

乙型流感病毒单克隆抗体的制备与评价

目的制备抗乙型流感单克隆抗体,为建立特异、灵敏、简便的乙型流感病毒快速检测方法奠定基础。方法应用鸡胚接种法、ELISA方法、免疫扩散法、血凝抑制法筛选能稳定分泌抗乙型流感病毒单抗的杂交瘤细胞,并对分泌的单抗的安全性,有效性、抗体亚型,特异性及灵敏性进行了全面评价。结果获得了3株能稳定分泌抗乙型流感病毒单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为3G11、4F9、8G6;制备的抗乙型流感病毒单克隆抗体无鼠源病毒污染;抗体亚型为IgG2a亚型,轻链均为κ链;对乙型流感病毒具有高度特异性,而与甲型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、呼吸道腺病毒等无交叉反应。结论制备的乙型流感病毒单克隆抗体具有特异性强、灵敏性高,为临床乙型流感的早期快速诊断及流行病调查奠定了实验基础。     

门脉高压症患者脾切除术后免疫功能的改变及其与脾组织免疫细胞的关系

目的　研究门脉高压症脾亢患者脾切除前后免疫功能的改变 ,以及巨脾组织免疫活性细胞的数量变化。探讨门脉高压症脾亢患者脾脏切除术合理性的免疫学基础。方法　对门脉高压症脾切除术患者 ,术前检测静脉血T淋巴细胞亚群 (CD3 、CD4 、CD8 、CD2 0 )及NK细胞 ;白介素 2(IL 2 )和白介素 10 (IL 10 ) ;γ干扰素 (IFN γ) ;免疫球蛋白 (IgG、IgM、IgA)及补体C3、C4。脾切除术后 1周、1月再次检测上述指标。切除的巨脾组织制成石蜡切片 ,检测CD3 、CD8 、CD2 0 、CD6 8 阳性细胞数量及分布 ,与正常脾组织进行比较。结果　①脾切除术后 1月免疫球蛋白IgG、补体C3、C4均升高 (P <0 .0 5 ) ,IgM、IgA呈增高趋势 ,但无统计学意义。②脾切除术后 1月IL 2、IFN γ明显升高 ,但仍低于正常人 ;IL 10明显降低 ,但仍高于正常人。③脾切除手术前后外周血CD4 、CD8 、CD4 /CD8 、CD2 0 细胞变化均无统计学意义。仅CD3 、NK细胞术后 1月明显升高 (P <0 .0 1)。④门静脉高压症巨脾与正常脾脏比较 ,CD3 、CD8 、CD2 0 、CD6 8 细胞数均减少。结论　经部分免疫学指标检测 ,门脉高压症脾亢患者免疫功能降低 ,脾切除术能使门脉高压症患者免疫功能得到一定改善。     

分流术及断流术对门静脉高压症病人血胰岛激素水平的影响

本文报告不同术式对门静脉高压症病人血胰岛激素水平影响的临床实验研究结果。21例肝硬变门静脉高压症病人外周血和门脉血IRI、IRG水平均显著升高。DSCS和PAD能不同程度改善病人胰岛素血症,但未能改善病人胰高糖素血症;MCS术后胰岛素血症和胰高糖素血症则较术前加重。     

肝硬化合并肝癌患者与病毒性肝炎肝硬化患者行肝移植术时凝血功能变化的比较

目的：比较肝硬化合并肝癌患者和病毒性肝炎肝硬化患者在行肝移植手术中凝血功能的变化,以更好地调控围术期的凝血功能．方法：对实施肝移植术的37例肝硬化合并肝癌患者（肝癌组）和40例病毒性肝炎肝硬化患者（肝硬化组）,于麻醉后术前（Ⅰ期）、无肝期开始（Ⅱ期）及新肝期90rain（Ⅲ期）,用凝血弹性描记图（TEG）分别测定各期R值、K值、MA值及α角,同时记录手术中各期患者的出血量及血制品用量．结果：Ⅰ期和Ⅱ期中,肝癌组与肝硬化组相比,MA值、α角增大,术中出血量相对较少,Ⅰ期所需新鲜冰冻血浆量也少于后者（P〈0．05）;Ⅲ期中,两组患者的凝血功能都有所降低,均出现R值延长、MA值及仅角减小,但肝癌组所需新鲜冰冻血浆和红细胞数量要明显少于肝硬化组（P〈0．05）,并且两组指标分别与各自术前相比,也有显著性差异（P〈0．05）．结论：肝癌组患者的凝血功能在肝移植术术前、术中均好于肝硬化组;出血量和所需的血制品也要少于肝硬化组．     

肝原位插管灌洗法的改进

１材料和方法１．１材料杂交狗１０条,雌雄各半,体重１０ｋｇ～１５ｋｇ．将狗全麻后,置于平台上,取腹部大十字或人字切口,入腹观察肠系膜上静脉与腹主动脉解剖特点．然后,将狗快速放血处死,再观察上述血管改变,并剪开横膈观察胸主动脉解剖结构,探索血管显露、游...     

肝细胞癌合并食道静脉曲张破裂出血的联合手术治疗

目的探讨肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）合并食道静脉曲张破裂出血联合手术治疗的方法、病理生理基础和治疗效果。方法选取1999年12月-2007年12月采用肝部分切除联合脾切除、门奇断流术治疗HCC合并食道静脉曲张破裂出血患者共23例（联合手术组）,观察术前、术后外周血白细胞和血小板计数的变化、食管静脉曲张缓解情况、生存率和肿瘤复发率;并与同期行单纯肝切除术的39例HCC患者（单纯肝切除组）进行比较分析。结果联合手术组手术并发症和手术死亡率与单纯肝切除组相比差异无统计学意义;联合手术组术后白细胞及血小板计数回升明显,显著高于单纯肝切除组;已随访14例患者中,13例食道静脉曲张改善;随访期间无凶险感染发生;5年生存率和3年肿瘤复发率2组间比较,差异无统计学意义。结论对于HCC合并食道静脉曲张破裂出血,采用肝部分切除联合脾切除、门奇断流术进行治疗是安全有效的,联合脾切除、门奇断流术并不增加肝切除手术的风险,不影响远期生存率和肿瘤复发率。     

胶体金免疫层析试纸条快速检测乙型流感病毒

目的建立有效、简便的胶体金免疫层析试纸条快速检测乙型流感病毒感染的方法。方法通过对乙型流感病毒核蛋白单克隆抗体进行胶体金标记,成功研制了乙型流感病毒免疫层析检测试纸条。结果该试纸条操作简单,肉眼于10～15 min内判定结果,对乙型流感病毒具有高度特异性,与甲型H1N1、H3N2亚型流感病毒等其他重要呼吸道病毒无交叉反应。试纸条在室温保存12个月、2～8℃保存18个月,其特异性和灵敏度无明显变化。对从内蒙自治区医院收集的流感样症状病人的702份鼻咽部分泌物进行检测,与美国Quidel公司同类产品的符合率为95%。结论建立的乙型流感病毒免疫层析检测方法具有简便、快速、特异、敏感和稳定等特点,对乙型流感病毒感染疾病的临床检测与早期诊断具有重要意义。