癌胚抗原阴性的人大肠癌组织蛋白质组的研究

目的：比较癌胚抗原（CEA）阴性的人大肠癌组织与CEA阳性的人大肠癌组织之间的蛋白质表达差异。方法：收集大肠癌患者切除癌组织的新鲜标本,根据血清CEA分为阴性组、阳性组,同时取正常黏膜作对照组,提取各组组织的总蛋白,进行双向凝胶电泳和凝胶图谱差异分析,比较各组组织之间表达差异点,将这些差异蛋白点进行质谱分析数据库鉴定。结果：各组双向电泳胶上蛋白癍点图象清晰,阴性组和阳性组中差异表达的蛋白点18个,成功鉴定其中10个为9种蛋白质。其中,在阴性组中特异表达的蛋白质点为含波形蛋白的混合物1、肝脂肪酸结合蛋白,表达上调的蛋白质点为肌动蛋白结合蛋白22-a．、热休克蛋白27序列、血红蛋白B链突变体;在阳性组中特异表达的蛋白质点磷酸甘油醛异构酶、角蛋白10、角蛋白1,表达上调的蛋白质点为13微管蛋白链。结论：CEA阴性的人大肠癌组织与CEA阳性的人大肠癌组织存在蛋白质组差异表达,这些蛋白可能与大肠癌表达CEA有关。     

人工冬虫夏草在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的治疗作用和机制研究

目的 研究人工冬虫夏草对香烟烟雾所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型的治疗和作用机制.方法 SD健康雄性大鼠随机分为对照组、COPD组、造模前给药组、造模后给药组、中剂量(2.5 g·kg-1·d-1)和高剂量(5 g·kg-1·d-1)治疗组共6组,每组10只.动物连续烟熏90 d造模.造模前给药组于造模前两周开始给药,治疗组在造模前给药的基础上持续给药直至造模结束.造模后给药组为在造模结束后给药两周.测定各组大鼠肺功能,观察肺组织病理学变化,提取肺组织总蛋白进行双向电泳,对表达差异显著的蛋白点进行鉴定分析.结果 气道阻力均值COPD组(0.386 9 cm H2O·ml-1·s)明显高于对照组(0.263 0 cm H2O·ml-1·s)(P ＜0.05);造模前给药组(0.252 5 cm H2O·ml-1·s)、中剂量治疗组(0.223 3 cm H2O·ml-1·s)、高剂量治疗组(0.184 6cm H2O· ml-1·s)、造模后给药组(0.301 1 cm H2O·ml-1·s)均明显低于COPD组(P＜0.05),与对照组相比差异无统计学意义.给药各组特别是高剂量组与COPD组相比支气管和肺部病理情况均有明显改善,结果差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比有14种蛋白质的表达量在COPD组中显著下降.谷胱甘肽过氧化物酶、醛脱氢酶及线粒体醛脱氢酶前体等三种蛋白则在高剂量治疗组中表达量得到恢复和改善.结论 人工冬虫夏草对大鼠COPD有明确的治疗作用,推测与抑制或改善肺部组织氧化与抗氧化失衡以及改善全身状况有关.     

蛋白酶体抑制剂PS-341诱导骨髓瘤细胞凋亡的 蛋白质组学研究

目的：比较蛋白酶体抑制剂PS-341处理多发性骨髓瘤细胞U266前后蛋白质组的差异,探究PS-341潜在的药物靶点,为多发性骨髓瘤的临床治疗提供理论依据。方法：用蛋白酶体抑制剂PS-341处理骨髓瘤细胞U266,应用双向凝胶电泳技术分离PS-341处理前后的U266细胞的蛋白质,ImageMaster 2D Platinum图像分析软件识别药物处理前后U266细胞的差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质。Western印迹法检测差异蛋白质BAG-2在药物处理前后U266细胞中的表达水平。结果：建立了PS-341处理前后U266细胞蛋白质的双向凝胶电泳图谱,找到55个差异表达的蛋白质点,鉴定了31个差异表达的蛋白质,有27个蛋白质在PS-341处理后下调。Western 印迹分析证实BAG-2在药物处理前后U266细胞中的表达水平存在差异。结论：处理后下调的一些蛋白可能是蛋白酶体抑制剂PS-341潜在的药物靶标。     

急性胰腺炎相关性肺损伤小鼠肺组织蛋白组学初步研究

目的 应用蛋白质组学方法筛选急性胰腺炎相关性肺损伤(APALI)小鼠模型与正常小鼠肺组织蛋白质表达差异,为阐明APALI的发病机制和预后提供理论依据.方法 20只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组通过腹腔注射雨蛙肽的方法造模,造模后处死小鼠取左肺组织进行病理学分析,右肺组织提取肺组织总蛋白,用双向电泳加质谱的技术路线进行蛋白质组学分析.结果 分析差异蛋白质功能,发现差异蛋白质主要与炎症反应及氧化还原相关.结论 炎症浸润、组织细胞损伤引起的氧化应激损伤可能在APALI发病早期扮演重要角色,在APALI早期重视抗氧化治疗可有助于改善预后.     

通光散对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道阻力和气道炎症的影响

目的 建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,观察通光散对COPD模型大鼠气道阻力和气道炎症的影响.方法 60只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、阳性对照组和通光散组,每组15只.模型组、阳性对照组和通光散组采用熏烟和气管给予内毒素脂多糖的复合方法建立COPD大鼠模型.第15天开始各组大鼠给予每周5次药物干预,通光散组给予通光散汤3 ml灌胃;阳性对照组给予羧甲司坦150 mg/kg灌胃;正常对照组和模型组给予生理盐水3ml灌胃.第90天实验结束,进行大鼠有创气道阻力测定和肺组织病理检测.结果 正常对照组、模型组、阳性对照组和通光散组大鼠有创气道阻力分别为(0.227±0.027) cm H2O· ml-1·s-1、(0.425±0.117)cm H2O·ml-1·s-1、(0.263±0.043) cm H2O· m l-1·s-1、(0.269±0.050)cm H2O·ml-1· s-1(1 cm H2O=0.098 kPa).模型组大鼠气道阻力高于其他3组(均P＜0.05),而其余3组之间差异均无统计学意义(均P＞0.05).病理检测显示,模型组大鼠肺组织有严重的支气管组织和肺泡组织病理改变,而通光散组和阳性对照组的病变程度均较轻.结论 通光散可以降低COPD模型大鼠的气道阻力,抑制气道炎性反应.