蛋白酶激活受体在过敏反应中的作用及检测方法

蛋白酶激活受体（protease activated receptors，或proteinase activated receptors，PARs）是1991年后陆续发现的G蛋白偶联受体（GPCRs）家族中的4个新成员。PARs的表达几乎遍及所有涉及过敏反应的细胞，现将PARs在过敏反应中的作用特点等综述如下。     

探讨CRTh2、CysLT1R及H1R在支气管哮喘患者外周血CD3+CD56+NKT细胞中的表达

目的：　探讨Th2细胞趋化因子同源分子（chemoattractant receptor homologous molecule expressed on Th2 cells,CRTh2）、半胱氨酸白三烯受体1（cysteinyl leukotriene 1 receptor,CysLT1R）及组胺1型受体（histamine 1 receptor,H1R）在支气管哮喘（bronchial asthma,BA）患者外周血CD3⁺CD56⁺自然杀伤T细胞（natural killer T cells,NKT）中的表达情况及临床意义。方法：　收集2020年9月至2021年9月锦州医科大学附属医院BA患者（BA组,n=40）和健康对照组（healthy control,HC组,n=38）的外周血,流式细胞仪检测BA组和HC组外周血中CRTh2、CysLT1R及H1R在CD3⁺CD56⁺标记的NKT细胞上的表达,同时对其与血清总IgE（total immunoglobulin E,TIgE）、呼出气一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide,FeNO）及肺功能第一秒用力呼气量/用力肺活量%（forced expiratory volume in the first second/forced vital capacity%,FEV1/FVC%）的相关性分析。结果：　BA组[22.50（15.78,29.20）]外周血CD3⁺CD56⁺NKT细胞百分比较HC组[27.90（21.50,32.45）]降低（P=0.024）;进一步比较BA组[70.05（63.20,78.45）]CD3⁺淋巴细胞百分比低于HC组[73.70（69.88,79.38）]（P=0.035）。BA组[0.08（0.05,0.17）]CysLT1R百分比较HC组[0.16（0.10,0.34）]降低（P=0.004）;BA组CRTH2、H1R百分比[1.12（0.53,1.88）;5.21（1.41,10.10）]与HC组[1.17（0.60,4.25）;4.61（1.42,8.53）]比较,无统计学差异（P=0.234;P=0.697）。进一步对比CRTh2、H1R的平均荧光强度（mean fluorescence intensity,MFI）,BA组[925.52（623.50,1 279.25）]CRTh2 MFI较HC组[1 345.50（891.00,1 977.75）]降低（P=0.002）;BA组[769（657.50,975.00）]H1R MFI与HC组[835.00（560.00,959.25）]无统计学差异（P=0.834）。CD3⁺CD56⁺NKT细胞与血清TIgE、FeNO无明显相关性（r=-0.052、r=0.014）,与FEV1/FVC%水平呈正相关（r=0.402,P=0.01）。CRTH2（r=0.166、r=-0.040）、CysLT1R（r=0.114、r=-0.150）及H1R（r=0.103、r=-0.096）与血清TIgE、FeNO无明显相关性。结论：　CD3⁺CD56⁺NKT细胞可能在支气管哮喘发病过程中起重要作用,H1R在CD3⁺CD56⁺NKT细胞上可能不表达,CRTh2与CysLT1R在BA患者CD3⁺CD56⁺NKT细胞上表达减少可能会为临床精准诊疗提供依据。     

银屑病患者嗜酸性粒细胞P物质及受体神经激肽/速激肽受体1水平升高北大核心CSCD

目的研究银屑病患者外周血嗜酸性粒细胞P物质(SP)及其受体神经激肽/速激肽受体1(NK1R)的表达。方法流式细胞术检测银屑病患者和健康人外周血SP和NK1R的水平;用(0.1、1)μg/m L的蒿草花粉、梧桐花粉和尘螨过敏源粗提液刺激后,流式细胞术检测银屑病患者外周血嗜酸性粒细胞SP和NK1R的水平。结果银屑病患者SP+和NK1R+嗜酸性粒细胞的比例分别升高2.7倍和0.5倍,平均荧光强度分别增加1.5倍和0.2倍。此外,1μg/m L梧桐花粉过敏源粗提液刺激后,SP+嗜酸性粒细胞的百分比下调60%,而0.1μg/m L梧桐花粉过敏源粗提液刺激后NK1R+嗜酸性粒细胞的比例升高0.6倍。结论银屑病患者血液嗜酸性粒细胞SP和NK1R水平升高。     

调节性T细胞在过敏性疾病发病机制中的作用

迄今发现至少有6种调节性T细胞(Treg)。过敏性疾病发生的最重要环节之一是Treg功能缺失或受到抑制而导致机体对过敏原的免疫耐受力降低,从而促使幼稚型CD4+T细胞向Th2类细胞分化,引起过敏。因此,旨在抑制Th2细胞因子产生、促进耐受机制产生、促进Treg和抑制性细胞因子产生的抗原特异性免疫治疗,已成为过敏性疾病最具有竞争力的治疗措施之一。本文综述了Treg的分类及其在过敏性疾病发病机制中的作用。     

老年慢性阻塞性肺疾病患者血浆类胰蛋白酶、白细胞介素8、嗜酸性粒细胞趋化因子水平的相关性

目的：探讨老年慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血浆类胰蛋白酶、白细胞介素8(interleukin-8，IL-8)、嗜酸性粒细胞趋化因子水平的相关性及临床意义。方法：老年COPD患者共73例(重度21例，中度21例，轻度31例)，正常对照31例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验，检测血浆类胰蛋白酶，IL-8，嗜酸性粒细胞趋化因子水平。在UniCAP100全自动体外变应原检测仪上进行UmCAP Tryptase检测。结果：①老年COPD患者(重、中、轻)急性期血浆类胰蛋白酶水平分别为(7．65&;#177;2．79)，(6．19&;#177;2．50)，(4．43&;#177;2．08)ng／L，均明显高于对照组(2．86&;#177;0．74)ng／L，(t=4．43，5．37，3．34，P均&;lt;0．01)。各组急性期血浆IL-8值分别为(99．71&;#177;24．05)，(45．01&;#177;13．33)，(26．36&;#177;6．00)ng／L，均明显高于对照组(7．66&;#177;3．40)ng／L(t=12．32,7．25,6．27，P均&;lt;0．01)。各组急性期血浆嗜酸性粒细胞趋化因子值分别为[84．07&;#177;17．22)，(63．72&;#177;10．96)，(67．40&;#177;22．14)ng／L，明显高于对照组(30．05&;#177;10．94)ng／L(t=8．63，6．76，7．71，P均&;lt;0．01)。治疗后，重度、中度COPD患者血浆IL-8，嗜酸性粒细胞趋化因子值明显降低(P&;lt;0．01)；重度、轻度COPD患者血浆类胰蛋白酶值明显降低(P&;lt;0．01)。②各组(重、中、轻)急性期外周血嗜中性粒细胞(neutrophils，neu)绝对计数分别为(13．40&;#177;0．90)，(8．61&;#177;0．73)，(6．05&;#177;0．51)&;#215;10^9 L^-1；嗜酸性粒细胞(eosinophils，eos)绝对计数分别为(0．39&;#177;0．11)，(0．37&;#177;0．08)，(0．33&;#177;0．10)&;#215;10^9 L^-1明显高于对照组(5．13&;#177;0．57)，(10．19&;#177;0．08)&;#215;10^9 L^-1(P均&;lt;0．01)，而治疗后，明显降低(P&;lt;0．01)。③老年COPD患者急性期血浆中类胰蛋白酶与IL-8，嗜酸性粒细胞趋化因子，中性粒细胞，嗜酸性粒细胞水平之间存在相关性(P&;lt;0．05)。结论：COPD不仅仅是中性粒细胞相关性的疾病，肥大细胞、嗜酸性粒细胞及其介质也积极参与COPD的发生与发展过程。     

类风湿关节炎炎性关节中高水平脂联素促进白细胞介素-6单核细胞趋化因子-1和核因子-κB受体活化因子配体表达

目的 研究类风湿关节炎(RA)炎性关节中高水平脂联素(AD)表达的意义.方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定关节液中AD及白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α、单核细胞趋化因子(MCP)-1和基质金属蛋白酶(MMP)-9等促炎因子/趋化因子的含量,并分析AD与其相关性.双重免疫标记分析RA滑膜中AD在滑膜成纤维细胞(SFLs)、T淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和肥大细胞的表达.ELISA测定重组AD因子刺激SFLs后培养上清液中细胞因子含量变化.实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real-time PCR)分析AD和IL-6共刺激对人滑膜细胞系MH7A中核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达影响.3组间采用多变量方差分析,2组比较采用Student's t检验.Mann-Whitney U检验,相关性分析采用Spearman检验.结果 RA关节液中AD与IL-6含量呈正相关(r=0.27,P=0.03).AD与成纤维细胞双重免疫标记呈阳性反应.以重组AD因子30g/ml刺激SFLs 24 h后,培养上清液中IL-6和MCP-1分泌量与刺激前相比分别增加了11.4倍和8倍(P<0.05).AD和IL-6共刺激后,MH7A中RANKL mRNA表达显著增加(82±26).结论 炎性关节中高水平AD可促进IL-6、MCP-1和RANKL表达,其可能在RA慢性炎症和骨侵蚀过程中发挥重要作用.     

P物质对过敏小鼠腹腔巨噬细胞蛋白酶激活受体表达的影响

目的:探讨P物质(substance P,SP)对过敏小鼠腹腔灌洗液中巨噬细胞表面蛋白酶激活受体(protease activated receptors,PARs)表达的影响?方法:通过腹腔注射鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)建立过敏小鼠模型,再根据腹腔注射的SP的浓度将小鼠分为生理盐水组?0.2?2.0?20.0和200.0 μg/ml SP组,每组6只,同时每组均设有未致敏的对照组?最后一次激发3 h后处死小鼠,取腹腔灌洗液细胞经固定,用流式细胞仪检测巨噬细胞表面PARs的表达?结果:过敏组小鼠腹腔灌洗液中巨噬细胞表面PARs的表达水平较正常组明显降低(P < 0.01),而不同浓度的SP组之间无统计学差异(P > 0.05)?结论:SP对小鼠腹腔巨噬细胞PARs表达无影响,但过敏原可影响巨噬细胞表面PARs的表达?