细粒棘球蚴95抗原基因的克隆及原核表达质粒的构建

目的：克隆细粒棘球蚴95（Eg95)抗原基因，构建携带目的基因的原核表达载体，为细粒棘球蚴抗原的免疫保护机制研究提供材料。方法：应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因，将其克隆至pUCm-T载体，测序确定其正确性。利用定向克隆技术将Eg95抗原基因片段克隆至原核表达质粒pET28上，根据选择标记的卡那霉素抗性基因筛选到阳性克隆，通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆，测序确定序列。结果：测序表明所有pET28-Eg95阳性克隆均为正确连接95抗原基因的重组质粒。结论：pET28-Eg95可以进一步用于重组蛋白的表达及抗细粒棘球蚴感染的实验研究。     

Caspase-7蛋白在中耳胆脂瘤中的表达及意义

目的:探讨Caspase-7蛋白在中耳胆脂瘤的发生、发展中的作用,为中耳胆脂瘤的临床诊断、治疗及预后提供新途径。方法:收集2016年12月-2017年7月佳木斯大学附属第一医院耳鼻咽喉科经病理科证实的术中标本45例。其中中耳胆脂瘤标本30例为试验组,正常外耳道皮肤组织15例为对照组。采用免疫组化SP法分别检测两组中Caspase-7蛋白的表达情况。结果:Caspase-7蛋白在试验组的阳性表达要明显高于对照组,差异有统计学意义(x~2=4.727,P0.05)。结论:在中耳胆脂瘤上皮组织中Caspase-7蛋白呈高表达趋势,其阳性表达率显著高于正常外耳道皮肤组织,提示Caspase-7蛋白在中耳胆脂瘤的发生发展中起到重要作用。     

热休克蛋白90与肿瘤的研究进展

热休克蛋白(Heat Shock Protein,HSP)是主要作为分子伴侣参与蛋白质的合成、折叠,维持细胞的蛋白质空间构象和保护细胞免受损伤等重要生物学功能的一种蛋白质。HSP90在维持分子伴侣结构、调控细胞周期及凋亡、协调激素信号传递、促进创面愈合方面发挥重要作用。并且HSP90在肿瘤的发生和演进中也发挥重要的作用。近年来,HSP90抑制剂针对恶性肿瘤进行相关研究,在分子靶向治疗方面取得一定的成果,但在临床应用还需进一步的研究。本文以热休克蛋白90为靶标对肿瘤的相互关系研究现状进行综述。     

胃癌相关基因表达与其生物学行为关系研究

目的探讨P21、细胞周期素D1(CyclinD1)及P53基因表达与胃癌生物学行为的关系。方法应用原位杂交免疫组化技术检测74例胃癌组织及癌旁正常粘膜P21和CyclinD1mRNA及P53蛋白表达,分析三者与胃癌生物学行为的关系。结果74例胃癌组织和癌旁正常粘膜中,P21、CyclinD1及P53表达阳性率分别为43.2%和55.4%、40.5%和78.4%、25.7%和1.4%,三者比较均有显著性差异(P<0.01)。P21、CyclinD1及P53表达与患者性别、年龄、分期无明显相关性(P>0.05),与淋巴结转移显著相关(P<0.05);胃癌分化程度与P21阳性表达呈正相关,与CyclinD1阳性表达呈负相关。结论胃癌中P21低表达、CyclinD1和P53过表达可能促使胃癌细胞增殖,且具有更强的侵袭力;多基因表达异常可作为评价胃癌预后的重要参考指标。     

大肠癌组织中 Survivin 蛋白和 CD34 表达的意义及相关性研究

目的:探讨大肠癌组织中Survivin蛋白和CD34表达及其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测正常大肠粘膜、腺瘤和腺癌组织中Survivin和CD34表达,计数CD34标记的微血管密度(MVD)。结果:Sur-vivin蛋白在正常大肠粘膜无表达,在腺瘤和腺癌组织中表达的阳性率分别为62.5和70.9,大肠腺瘤组和大肠癌组中Survivin表达率显著高于正常大肠粘膜组;大肠腺瘤和腺癌组织中MVD计数分别为21.55±10.61和28.89±10.47,显著高于正常大肠粘膜组的8.23±2.77,三者之间有显著性差异;Survivin蛋白和CD34表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移明显相关;Survivin蛋白表达与MVD呈正相关。结论:Survivin蛋白可能通过抑制细胞凋亡,诱导新生血管形成而影响大肠癌的发生和发展,Survivin蛋白和CD34表达可作为判断大肠癌预后的指标。     

基质金属蛋白酶-1、肿瘤坏死因子在中耳胆脂瘤中的表达及相关性研究

目的 观察基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)在中耳胆脂瘤上皮组织中的表达,探讨两者在胆脂瘤骨质破坏中的作用及其相关性.方法 采用免疫组织化学技术(Envision System)和计算机图像定量分析法,检测TNF-α、MMP-1在22例中耳胆脂瘤及20例外耳道皮肤中的表达.结果 TNF-α和MMP-1阳性产物均定位于细胞浆.MMP-1蛋白产物表达于胆脂瘤上皮细胞全层、增殖活跃的基底细胞及淋巴细胞散在表达.TNF-α蛋白产物表达在上皮层及上皮下结缔组织基质细胞.定量分析显示胆脂瘤组织中TNF-α(0.3852±0.0318)和MMP-1(0.2013±0.0106)的表达显著高于外耳道皮肤,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)MMP-1和TNF-α在胆脂瘤上皮组织中呈高表达.(2)MMP-1和TNF-α的表达有明显相关性(rs=0.5295).(3)MMP-1和TNF-α在基质细胞中均有大量表达,提示基质细胞可能在胆脂瘤的骨质破坏中起着重要的作用.     

Survivin在大肠癌中的表达及意义

目的:检测抗凋亡基因survivin 在大肠癌组织中的表达情况及与大肠癌组织生物学特性的关系.方法:收集62例大肠癌组织及25例正常大肠组织,采用RT-PCR 方法,检测大肠癌中survivin mRNA 表达水平,与正常大肠组织进行比较分析,并用免疫组织化学方法检测survivin 蛋白表达.结果:大肠癌组织中survivin mRNA 阳性表达率为58.1%(36/ 62),大肠癌组织survivin 蛋白阳性表达率为56.4%( 35/62),而正常大肠组织无1例表达,且survivin 表达与病理分级、有无淋巴结转移等恶性生物学特性密切相关.结论:Survivin的高表达与大肠癌具有密切相关性,提示survivin 对于大肠癌的预后可能具有重要意义.     

P16蛋白在大肠癌及癌前病变中的表达及意义

目的探讨抑癌基因P16与大肠癌的发生及临床病理特征之间的关系。方法采用SABC免疫组化技术检测大肠癌、大肠黏膜腺瘤伴异型增生、炎症及正常组织中P16蛋白的表达。结果大肠癌的P16阳性表达率为42.19%,明显低于正常组织、炎症、轻度异型增生(P<0.01),亦低于中度异型增生(P<0.05),与重度异型增生无差别(P>0.05);高分化大肠癌的阳性率高于低分化组(P<0.05),有淋巴结转移组的阳性率低于无转移组(P<0.01);有血道转移组的阳性率低于无转移组(P<0.05);随Ducks分期进展,P16表达率依次下降(P<0.05)。结论P16基因参与大肠黏膜的癌变过程,检测其表达产物可作为判断大肠癌的生物学行为及预后的一个重要指标。     

SDF-1和STAT6在鼻息肉组织中的表达及其临床意义

鼻息肉是耳鼻喉科临床上较为常见的一种疾病.其发病机理目前尚未完全阐明,大量研究发现鼻息肉的发生与遗传、变态反应、感染等多种因素有关.SDF-1是一个CXC趋化因子家族成员,与人类的多种疾病如过敏性疾病、移植排斥反应、肿瘤的发生等有着密切的联系.STAT6是一类位于胞浆中的能被众多的细胞外多肽类分子激活,参与基因转录与调控的蛋白质家族中的一员,其生理功能在于通过对细胞凋亡的调节,限制某些细胞群落的过分膨胀或过分萎缩,参与正常细胞增殖、分化和凋亡动态平衡的维持,在临床多种疾病的发生过程中具有重要作用.