热休克蛋白90与肿瘤的研究进展

热休克蛋白(Heat Shock Protein,HSP)是主要作为分子伴侣参与蛋白质的合成、折叠,维持细胞的蛋白质空间构象和保护细胞免受损伤等重要生物学功能的一种蛋白质。HSP90在维持分子伴侣结构、调控细胞周期及凋亡、协调激素信号传递、促进创面愈合方面发挥重要作用。并且HSP90在肿瘤的发生和演进中也发挥重要的作用。近年来,HSP90抑制剂针对恶性肿瘤进行相关研究,在分子靶向治疗方面取得一定的成果,但在临床应用还需进一步的研究。本文以热休克蛋白90为靶标对肿瘤的相互关系研究现状进行综述。     

胃癌相关基因表达与其生物学行为关系研究

目的探讨P21、细胞周期素D1(CyclinD1)及P53基因表达与胃癌生物学行为的关系。方法应用原位杂交免疫组化技术检测74例胃癌组织及癌旁正常粘膜P21和CyclinD1mRNA及P53蛋白表达,分析三者与胃癌生物学行为的关系。结果74例胃癌组织和癌旁正常粘膜中,P21、CyclinD1及P53表达阳性率分别为43.2%和55.4%、40.5%和78.4%、25.7%和1.4%,三者比较均有显著性差异(P<0.01)。P21、CyclinD1及P53表达与患者性别、年龄、分期无明显相关性(P>0.05),与淋巴结转移显著相关(P<0.05);胃癌分化程度与P21阳性表达呈正相关,与CyclinD1阳性表达呈负相关。结论胃癌中P21低表达、CyclinD1和P53过表达可能促使胃癌细胞增殖,且具有更强的侵袭力;多基因表达异常可作为评价胃癌预后的重要参考指标。     

大肠癌组织中 Survivin 蛋白和 CD34 表达的意义及相关性研究

目的:探讨大肠癌组织中Survivin蛋白和CD34表达及其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测正常大肠粘膜、腺瘤和腺癌组织中Survivin和CD34表达,计数CD34标记的微血管密度(MVD)。结果:Sur-vivin蛋白在正常大肠粘膜无表达,在腺瘤和腺癌组织中表达的阳性率分别为62.5和70.9,大肠腺瘤组和大肠癌组中Survivin表达率显著高于正常大肠粘膜组;大肠腺瘤和腺癌组织中MVD计数分别为21.55±10.61和28.89±10.47,显著高于正常大肠粘膜组的8.23±2.77,三者之间有显著性差异;Survivin蛋白和CD34表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移明显相关;Survivin蛋白表达与MVD呈正相关。结论:Survivin蛋白可能通过抑制细胞凋亡,诱导新生血管形成而影响大肠癌的发生和发展,Survivin蛋白和CD34表达可作为判断大肠癌预后的指标。     

沉默Livin基因对胃癌细胞SGC-7901生物学行为的影响

目的:探讨沉默Livin基因表达对胃癌细胞SGC-7901细胞形态和凋亡的影响。方法:取SGC-7901细胞,分成pSUPER-neo-LsB组、空载体pSUPER-neo-LsC组、空白对照组,用脂质体包裹法转染,空白对照组不转染。转染48h后,FCM法、TUNEL法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞。结果:人胃癌癌细胞株SGC-7901细胞瞬时转染针对Livin的表达载体后,出现早期凋亡细胞和凋亡小体。TUNEL检测SGC-7901细胞凋亡指数显著高于对照组。FCM法计算细胞的凋亡率与转染空载体pSUPER-neo-LsC组和空白对照组比较均有显著性差异。结论:沉默livin基因可以有效的改变SGC-7901细胞的生物学行为,Livin基因可能成为胃癌治疗的新靶点。     

热休克蛋白在肿瘤的诊断和治疗中的意义

热休克蛋白(HSP)是生物进化过程中高度保守的一个蛋白家族.参与了多种生理过程,具有重要的生理作用。近年来又发现它与肿瘤细胞增殖,分化,侵袭,转移,死亡,免疫系统识别有关。     

端粒酶基因hTRT和hTR在胃癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨端粒酶基因 h TRT和 h TR在胃癌组织中的表达及其意义。方法 :用原位杂交技术检测 48例胃癌组织、1 0例正常胃粘膜组织中端粒酶基因的表达。结果 :48例胃癌组织中 h TRT和 h TR阳性表达分别为 79.2 %和 85 .4% ;1 0例正常胃粘膜组织中除1例 h TR弱阳性表达外均为阴性表达 ,胃癌组织与正常胃粘膜组织中 h TRT、h TR的表达均有显著性差异。结论 :端粒酶基因 h TRT和 h TR在胃癌中均为高表达 ,且 h TRT和 h TR有相关性 ,端粒酶基因表达检测在回顾性研究中有一定价值     

水泡口炎病毒基质蛋白质粒脂质体复合物对癌性腹水抑制效应的实验研究

目的：水泡口炎病毒（Vesicular Stomatitis Virus,VSV）基质蛋白（Matrix protein,M蛋白）具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,本研究探讨水泡口炎病毒基质蛋白对癌性腹水形成的抑制和治疗作用。方法：采用旋转蒸发仪法制备纳米脂质体,检测其体外转染效率;采用脂质体转染技术将已构建的水泡口炎病毒基质蛋白（VSV-M）重组真核表达质粒pcDNA3.1-M转入MethA肿瘤细胞,转染后6小时将细胞接种于小鼠腹腔,观察小鼠腹水的形成情况;腹水治疗组,则先将MethA肿瘤细胞接种于小鼠腹腔,将小鼠随机分成4组,于接种后第二天分别用脂质体包裹的pcD-NA3.1-M、pcDNA3.1空载体、单纯脂质体及生理盐水治疗,观察腹水的形成情况。结果：自制的DOTAP：DOPE脂质体与Sigma公司购买的Lipofectamine 2000的转染效率相似,pcDNA3.1-M明显抑制MethA腹水的形成,对已经形成的腹水也有明显的治疗作用,与对照组比较有统计学意义（P〈0.05）,同时明显延长了小鼠的存活期。结论：VSV-M蛋白真核表达质粒pcDNA3.1-M对小鼠腹水的形成有抑制作用,能延长小鼠的存活期,对于恶性腹水的治疗具有一定的意义,值得进一步研究。     

survivin基因在大肠癌组织中的表达及其与bcl-2和p53基因的相关性探讨

目的 探讨survivin在大肠癌组织中的表达及其与bcl-2、p53基因表达的相关性。方法 应用免疫组织化学方法检测大肠腺癌组织中survivin及bcl-2、p53的表达,并与其在正常大肠黏膜、增生性息肉及腺瘤组织中的表达进行比较。结果survivin在正常大肠黏膜无表达,大肠腺瘤（62.5%）、大肠癌（70.9%）中survivin表达率显著高于正常大肠黏膜和增生性息肉（16.7%）（P〈0.01）;survivin表达与与肿瘤浸润深度和淋巴结转移明显相关（P均〈0.05）;大肠癌组织中bcl-2、p53基因与survivin基因表达显著相关（P均〈0.05）。结论 survivin参与了大肠癌的发生和发展,可作为判断预后的参考指标;抑癌基因p53的失活和bcl-2的表达上调与survivin基因的表达可能在大肠癌的发生、发展中起协调作用。     

AIB1蛋白双单克隆抗体夹心ELISA检测法的建立及初步应用

目的 建立双单克隆抗体夹心ELISA方法检测血清中AIB1的水平,探讨其在AIB1蛋白检测中的应用价值.方法 应用抗AIB1-C单克隆抗体4B9F12作为固相抗体,Biotin-1A2E1作为标记抗体,ELISA双抗体夹心法检测AIB1.构建及优化的内容包括:最适包被浓度、最适包被缓冲液、生物素标记抗体工作的浓度;鉴定的指标包括:敏感性、特异性、稳定性等.结果 使用0.05 mo·L-1碳酸盐缓冲液(pH9.6)为包被缓冲液,包被抗体4B9F12工作浓度为10μg·mL-1,Biotin-1A2E1工作浓度选择1∶500;采用双抗体夹心法检测外周血中AIB1的特异性和敏感性均较高.结论 抗AIB1双抗体夹心ELISA方案的构建、鉴定达到了预期目的 ,为临床研究奠定了基础.     

Survivin基因和增殖细胞核抗原在大肠癌组织中表达及其意义

目的:探讨Survivin和增殖细胞核抗原PCNA在大肠癌组织中的表达和意义。方法:采用免疫组织化学方法检测正常大肠粘膜、腺瘤和腺癌组织中Survivin和PCNA表达。结果;Survivin在正常大肠粘膜无表达,在大肠腺癌和腺瘤组织中表达的阳性率分别为70.9%和62.5%;大肠癌组和大肠腺瘤组OD值显著高于正常大肠粘膜组;大肠癌组中PCNA-LI为(50.2±13.2)%,显著高于正常大肠粘膜组(12.6±3.1)%和大肠腺瘤组(33.2±7.9)%;大肠癌组中Survivin阳性的PCNA-LI为(61.3±9.3)%,显著高于Survivin阴性的PCNA-LI(36.4±6.6)%。结论:Survivin和PCNA的高表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用,PCNA可反映大肠癌的增殖状况,两者可作为判断其预后的参考指标。