TNF-α和MMP-2在中耳胆脂瘤中的表达及意义

目的：研究肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在中耳胆脂瘤组织中的表达,探讨二者表达水平对中耳胆脂瘤侵袭能力的影响以及二者表达有无相关性。方法：采用免疫组织化学方法和计算机图像定量分析系统,检测TNF-α和MMP-2在30例胆脂瘤及10例外耳道皮肤中的表达,同时观察二者的表达与临床上听小骨骨质破坏程度的相互关系。结果：TNF-α和MMP-2在30例中耳胆脂瘤上皮中表达的阳性率分别为83%和76%,均显著高于正常外耳道上皮（P〈0.05）。胆脂瘤上皮中TNF-α和MMP-2表达呈正相关（r=0.694,P〈0.01）;胆脂瘤侵袭能力与TNF-α表达比较,差异有统计学意义（r=-0.651,P〈0.01）,与MMP-2表达比较,差异有统计学意义（r=-0.548,P〈0.01）。结论：TNF-α和MMP-2的表达水平与胆脂瘤的侵袭能力有显著相关性,提示TNF-α和MMP-2表达水平可能与胆脂瘤的骨质破坏程度密切相关。     

中耳胆脂瘤上皮组织中OPN和MMP9的表达及相关性研究

目的:检测骨桥蛋白(OPN),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在中耳胆脂瘤上皮中的表达,研究OPN和MMP9在胆脂瘤骨质破坏中的作用机制及相关性。方法:采用免疫组织化学SP技术检测OPN和MMP-9在25例中耳胆脂瘤上皮和15例正常外耳道上皮中的表达,比较二者在实验组与对照组上皮表达阳性率有无差别及二者的相关性。结果:OPN和MMP-9在中耳胆脂瘤上皮中表达明显高于外耳道正常皮肤,差别有统计学意义(P<0.05);在中耳胆脂瘤上皮中OPN和MMP-9表达之间呈正相关。结论:①MMP-9和OPN在中耳胆脂瘤上皮中高表达,二者表达之间呈正相关。②MMP-9和OPN在中耳胆脂瘤骨质破坏的过程中发挥重要作用,OPN可能是MMP-9高表达的诱导因素。③OPN和MMP-9在中耳胆脂瘤上皮中表达增高为中耳胆脂瘤骨质破坏的研究提供了新的方向。     

肿瘤坏死因子-α在中耳胆脂瘤组织中的表达

目的　研究肿瘤坏死因子 -α(TNF α)在中耳胆脂瘤组织中的表达 ,探讨其在中耳胆脂瘤骨质破坏中的作用。 方法　 采用免疫组织化学SABC染色法和计算机图像定量分析法 ,对 2 0例中耳胆脂瘤和 10例正常外耳道皮肤中TNF -α的表达情况进行观察。 结果　TNF α不仅在胆脂瘤上皮的各层细胞胞浆中 ,而且在皮下组织的炎性细胞中都有高度表达。定量分析显示胆脂瘤上皮中TNF α的含量显著高于外耳道正常皮肤 (P <0 .0 5 )。 结论　TNF α高表达可能提示胆脂瘤引起骨质破坏的一个因素。     

MMP-2和CD147在中耳胆脂瘤中的表达

目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和细胞粘附因子CD147在中耳胆脂瘤上皮中的表达,探讨其表达对中耳胆脂瘤侵袭能力的影响。方法:应用免疫组化方法检测MMP-2和CD147在30例中耳胆脂瘤上皮和10例正常外耳道上皮中的表达,应用计算机图像分析系统对其表达进行定量分析。结果:MMP-2和CD147在胆脂瘤上皮中表达的阳性率分别为87.3%和84.5%,均显著高于正常外耳道上皮(P<0.05)。胆脂瘤上皮中MMP-2和CD147表达呈正相关(r=0.682,P<0.01);胆脂瘤侵袭能力与MMP-2表达有显著相关性(r=-0.591,P<0.01),与CD147表达也有显著相关性(r=-0.627,P<0.01)。结论:MMP-2和CD147的表达与胆脂瘤的侵袭能力有显著相关性,提示MMP-2和CD147高表达是胆脂瘤引起骨质破坏吸收的主要因素之一。     

肿瘤坏死因子在中耳胆脂瘤中的表达

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在中耳胆脂瘤中的表达。方法通过免疫组化方法观察:TNF-α在32例中耳炎患者中耳腔肉芽组织、胆脂瘤及外耳道皮肤的表达。结果TNF-α定位于胆脂瘤组织的上皮及上皮下结缔组织,较正常外耳道及鼓膜的染色明显增强,胆脂瘤的组织TNF-α阳性细胞率及光密度分别为(40.91±24.77)%和(0.69±0.34),明显高于外耳道上皮中TNF-α阳性细胞率(12.52±3.65)%及平均光密度(0.19±0.06)。外耳皮肤10例未见表达。结论TNF-α在肉芽组织和胆脂瘤中均有表达,说明TNF-α在肉芽组织及胆脂瘤的形成和发展中起到一定作用。     

缺氧诱导因子-1α在中耳胆脂瘤中的表达

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在中耳胆脂瘤发病机制中的作用,检测其在中耳胆脂瘤和外耳道正常上皮中的表达情况.方法:取32例中耳胆脂瘤和15例外耳道正常上皮标本用免疫组织化学技术检测HIF-1α蛋白的表达.结果:在中耳胆脂瘤中HIF-1α的表达较外耳道正常上皮明显增多(P＜0.05).结论:中耳胆脂瘤中HIF-1α的表迭显著升高,推测HIF-1α在中耳胆脂瘤的发生、发展过程中具有极其重要的作用,并且缺氧有可能是中耳胆脂瘤发病机制中的一个诱因.     

基质金属蛋白酶-14在胆脂瘤型中耳炎中的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶-14(matrix metalloproteinase-14,MMP-14)在胆脂瘤型中耳炎上皮和正常外耳道上皮中的表达特点及意义,并探讨MMP-14对胆脂瘤型中耳炎侵袭能力的影响.方法:采用免疫组织化学染色法(SP法)检测MMP-14胆脂瘤型中耳炎上皮和正常外耳道上皮中的表达.结果:31例胆脂瘤型中耳炎上皮中MMP-14的阳性表达明显高于正常外耳道上皮中的阳性表达.其中胆脂瘤上皮表达的染色结果表现最强,多在中至强阳性,其余上皮组织中各层细胞均有不同表达,基底膜染色强.结论:MMP-14可能在胆脂瘤型中耳炎上皮的增值与骨破坏中起重要作用.     

Toll样受体9在中耳胆脂瘤中的表达及其与白细胞介素-1α的相关性

目的研究Toll样受体9(TLR9)在中耳胆脂瘤上皮细胞的表达,并分析与白细胞介素1α(IL-1α)表达的关系。方法采用免疫组织化学二步法检测23例慢性中耳炎合并获得性胆脂瘤手术标本与10例胆脂瘤患者正常外耳道皮肤中TLR9、IL-1α的表达。结果在23例慢性中耳炎合并获得性胆脂瘤手术标本与10例胆脂瘤患者正常外耳道皮肤中,TLR9的表达指数分别为0.34±0.14、0.17±0.07,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);IL-1α的表达指数分别为0.53±0.12,0.20±0.08,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);胆脂瘤上皮TLR9与IL-1α的表达呈显著正相关(r=0.730,P<0.01)。结论 TLR9与IL-1α表达密切相关,表明TLR9可能上调IL-1α的表达,TLR9的信号转导参与了中耳胆脂瘤的骨质破坏过程。     

Survivin基因在中耳胆脂瘤中的表达及其意义

目的研究Survivin基因在中耳胆脂瘤上皮中的表达情况,探讨Survivin与胆脂瘤上皮增殖的关系。方法采用免疫组织化学(EnvisionSystem)染色技术及半定量RT-PCR方法,从蛋白质和分子水平研究Survivin基因在43例中耳胆脂瘤和10例正常外耳道皮肤的表达。结果 Survivin基因蛋白产物在43例胆脂瘤患者中有69.8%(30/43)染色为阳性,在正常外耳道上皮中未见阳性表达,仅见极少数散在阳性细胞,两者之间的差异具有显著性(P<0.025)。SurvivinmRNA在胆脂瘤组织中可见表达,在正常外耳道皮肤中未见表达。结论 Survivin在中耳胆脂瘤组织中明显表达,在正常外耳道皮肤中未见表达,提示Survivin基因可能参与中耳胆脂瘤的发生、发展,可能与胆脂瘤上皮细胞的过度增殖有关,为将来的基因治疗提供理论依据。     

缺氧诱导因子-lα在中耳胆脂瘤中的表达

目的:探讨缺氧诱导因子-lα(HIF-lα)在中耳胆脂瘤发病机制中的作用,检测其在中耳胆脂瘤和外耳道正常上皮中的表达情况。方法:取32例中耳胆脂瘤和15例外耳道正常上皮标本用免疫组织化学技术检测HIF-lα蛋白的表达。结果:在中耳胆脂瘤中HIF-lα的表达较外耳道正常上皮明显增多(P<0.05)。结论:中耳胆脂瘤中HIF-lα的表达显著升高,推测HIF-lα在中耳胆脂瘤的发生、发展过程中具有极其重要的作用,并且缺氧有可能是中耳胆脂瘤发病机制中的一个诱因。     

P27蛋白在中耳乳突胆脂瘤上皮中的表达及意义

目的探讨P27蛋白在中耳继发性胆脂瘤上皮中的表达,分析其在胆脂瘤上皮增生调节中的可能作用.方法运用免疫组化En Vision染色法和计算机图像分析法,检测32例胆脂瘤上皮和9例胆脂瘤患者外耳道皮肤中P27蛋白的表达情况.结果 P27表达在胆脂瘤上皮及外耳道皮肤的棘层及颗粒层的细胞核,两种组织P27阳性表达的平均灰度值(±s,下同)分别为(159.698 3±6.991)和(153.138 6±4.702 2),两者差异有显著意义(P＜0.01).结论 P27胆脂瘤上皮的低表达有可能是胆脂瘤上皮细胞高度增殖的原因之一.     

血小板衍生生长因子(PDGF)在中耳胆脂瘤中的表达

为研究血小板衍生生长因子 ( PDGF)在中耳胆脂瘤组织中的表达 ,探讨 PDGF在中耳胆脂瘤发病机制中的作用 ,采用免疫组织化学 SABC染色法及图像定量分析法 ,对 2 5例中耳胆脂瘤和 10例正常外耳道皮肤中 PDGF的表达情况进行观察。结果显示 ,PDGF不仅在胆脂瘤上皮的各层的细胞胞浆中 ,而且在皮下组织的炎性细胞中都有高度表达。     

细胞因子及其在胆脂瘤发病机理中的作用

胆脂瘤是一种发生于中耳或外耳道皮肤的角化病 ,表现为中耳病变部位原有的扁平上皮为表层角化的复层鳞状上皮所代替 ,上皮持续脱屑引起中耳腔内上皮脱落、胆固醇结晶及碎屑堆积。胆脂瘤上皮基质与邻近骨质紧密相贴 ,其间有疏松结缔组织和由成纤维细胞、淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性细胞构成的致密层存在。在中耳腔内 ,胆脂瘤不断增大 ,造成骨质破坏 ,引起严重听力丧失、反复感染、前庭功能紊乱 ,甚至发生颅内并发症 ,威胁病人生命。关于胆脂瘤的发病机理尚不十分清楚 ,主要有上皮移行学说、袋状内陷学说等。随着分子生物学技术的不断发展 ,细胞…     

X连锁凋亡抑制蛋白在胆脂瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的研究X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在胆脂瘤中的表达及胆脂瘤中的凋亡情况,探讨两者之间的关系。方法①运用免疫组织化学两步法检测25例胆脂瘤标本及10例外耳道正常皮肤组织中XIAP的表达。②采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记染色(TUNEL)技术检测两者组织的凋亡状态。结果①与正常上皮比较,胆脂瘤上皮中的XIAP蛋白表达明显下调(Z=-2.411,P<0.05)。②在胆脂瘤上皮中,细胞凋亡显著高于正常上皮组织(Z=-2.712,P<0.01)。③在胆脂瘤上皮中,XIAP的表达与凋亡呈负相关(rp=-0.527,P<0.01)。结论XIAP在胆脂瘤中的表达明显下调,与胆脂瘤上皮的凋亡密切相关,提示XIAP可能参与胆脂瘤上皮的凋亡调控过程,在胆脂瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

Survivin及Livin在中耳胆脂瘤组织中的表达及相关性研究

目的 探讨Survivin及Livin在中耳胆脂瘤组织中的表达及相关性。方法采用PV-9000二步法免疫组化法检测60例胆脂瘤中耳炎患者(实验组)和20例正常人(对照组)外耳道骨部皮肤组织中凋亡抑制蛋白Survivin和Livin的表达。结果实验组组织中Survivin和Livin蛋白表达的阳性率分别为26.7%和16.7%,明显低于对照组的65.0%和55.0%,差异有统计学意义,P<0.01(χ2=9.538,11.386)。胆脂瘤组织中survivin与livin蛋白(γ=0.614,P<0.01)的表达呈显著正相关。结论胆脂瘤组织中Survivin与livin蛋白的表达明显下调,可能在胆脂瘤的发生、发展中起协同作用。     

慢病毒介导的解整合素-金属蛋白酶17RNA干扰对气道上皮细胞MMP-9表达及NF-κB活性的影响

目的探讨脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的TNF-α/NF-κB信号转导机制及慢病毒介导的解整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)RNA干扰(RNAi)对MMP-9表达的影响。方法构建ADAM17 siRNA慢病毒载体、包装重组慢病毒。以NF-κB抑制剂(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)或TNF-α拮抗剂(etanercept)预处理HBE4-E6/E7细胞,以LPS刺激HBE4-E6/E7细胞24 h。以重组慢病毒感染HBE4-E6/E7细胞72 h后,以LPS或TNF-α刺激HBE4-E6/E7细胞24 h。以半定量RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达;以酶联免疫吸附试验检测TNF-α蛋白含量;以Western blot检测MMP-9蛋白表达;以凝胶阻滞分析实验检测NF-κB活性。结果 LPS或TNF-α刺激均明显增加HBE4-E6/E7细胞MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05);etanercept和PDTC均明显抑制LPS诱导的MMP-9表达及NF-κB活性(P<0.05)。慢病毒介导的ADAM17 RNAi明显降低LPS诱导的HBE4-E6/E7细胞上清液中TNF-α蛋白含量(P<0.05),亦明显降低MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05),但不能降低TNF-α诱导的MMP-9mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P>0.05)。PDTC明显抑制TNF-α诱导的MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05)。结论 TNF-α/NF-κB信号通路参与调控LPS诱导的气道上皮细胞MMP-9的表达,ADAM17通过调节TNF-α释放在其信号通路上游起到重要作用。     

匹伐他汀对人主动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶9表达的影响

目的 观察匹伐他汀对入主动脉肿瘤坏死因子( TNF-α)刺激血管平滑肌细胞(VSMCs)基质金属蛋白酶9(M MP-9)表达的影响.方法 研究对象:血管平滑肌细胞取自择期开放手术腹主动脉瘤标本,经洗涤、剪切、消化、离心后培养,实验使用第三代细胞.实验分4组,除对照组外,各组分别加入不同浓度TNF-α(1×103、10×103和100×103 ng/L),孵育24h后,测定MMP-9蛋白和mRNA表达,实验重复3次.实验分为6组,各组均加入TNF-α( 100×103 ng/L),干预组分别加入不同浓度匹伐他汀(0.1 ×103、1×103、10×103、100×103和500×103 ng/L),共同孵育24h,测定各组MMP-9 mRNA和蛋白质表达,实验重复3次.免疫组织化学鉴定为VSMCs.通过蛋白质印迹法检测TNF-α对MMP-9蛋白表达的影响、反转录多聚酶链反应观察TNF-α对MMP-9 mRNA表达的影响以及不同浓度匹伐他汀的干预作用.结果 与对照组比较,不同浓度TNF-α(1×103、10×103和100×103 ng/L)分别使VSMCs、MMP-9蛋白表达约增加71％、113％和116％,mRNA表达分别约增加27％、42％和80％.TNF-α呈剂量依赖方式刺激VSMCs MMP-9 mRNA和蛋白表达,差异有统计学意义(P＜0.01)；与对照组相比,不同浓度的匹伐他汀(0.1×103、1 ×103、10×103、100×103和500×103 ng/L)分别使TNF-α( 100 ng/L)刺激VSMCs MMP-9蛋白表达降低10.0％、10.3％、22.1％、28.9％和36.7％,高浓度的拮抗作用显示出统计学差异(P＜0.01)；对mRNA表达也显现相似的效果,匹伐他汀各组mRNA分别减少26％、29％、32％、37％46％(P＜0.01).结论 MMP-9在动脉粥样硬化区域过度表达、活性增强,降解细胞外基质、破坏弹力纤维,可加重临床病情；局部TNF-α可刺激MMP-9分布增加有关.匹伐他汀具有抑制TNF-α上调MMP-9表达的作用,有利于延缓动脉粥样硬化进展、稳定斑块,减少以动脉硬化为基础的急性心血管事件的发生.     

TNF-α、MMP-9在扁平苔藓皮损中的表达及意义

目的：探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在扁平苔藓发病中的作用。方法：采用免疫组织化学法和RT-PCR方法检测扁平苔藓皮损处及正常组织中TNF-α和MMP-9的表达情况。结果：两者在患者组中的表达高于正常对照组。结论：TNF-α和MMP-9可能参与了扁平苔藓的发病。     

XIAP和XAF1在中耳胆脂瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:研究凋亡抑制蛋白XIAP及其拮抗蛋白XAF1在中耳胆脂瘤中的表达及胆脂瘤上皮的凋亡情况,探讨三者之间的关系及意义。方法:采用组织芯片技术结合免疫组化法检测50例胆脂瘤标本及20例正常外耳道上皮中XIAP及XAF1的表达;采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记染色(TUNEL)技术检测两组标本的凋亡状态。结果:①胆脂瘤上皮中的XI-AP、XAF1蛋白表达显著高于正常上皮(P<0.01)。②胆脂瘤细胞凋亡显著高于正常上皮(P<0.01)。③胆脂瘤上皮中,XI-AP、XAF1二者表达呈正相关(P<0.01);XAF1表达与凋亡呈正相关(P<0.01)。结论:XIAP、XAF1在胆脂瘤中的表达同步升高,提示在胆脂瘤发病中,促凋亡与抑凋亡二者达到了新的平衡,使胆脂瘤上皮细胞过度增生但不能无限增殖。     

奥帕曲拉对大鼠心肌梗死后肿瘤坏死因子-α、基质金属蛋白酶-2的表达及心室重构的影响

目的:探讨血管肽酶抑制剂对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达以及心室重构和心室功能的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,术后24h存活大鼠分为心肌梗死组(MI组)和心肌梗死奥帕曲拉(omapatrilat,OMA)干预组(MI OMA组,OMA40mg.kg-1.d-1,饮水给药),另设sham组,sham组和MI组大鼠饲普通饮水。术后6周检测各组心室重构指标、左室血流动力学以及TNF-α、MMP-2蛋白的表达。结果:与sham组相比,心肌梗死6周末MI组大鼠TNF-α、MMP-2的表达明显增加,心室重构显著,心室功能明显降低;OMA显著降低心肌梗死后TNF-α、MMP-2的表达伴心室重构和心功能的改善。结论:血管肽酶抑制剂能够明显减轻大鼠心肌梗死后心室重构,改善心室功能,其作用可能与调节心脏TNF-α和MMP-2的表达有关。