培美曲塞与吉非替尼联合应用对肺腺癌细胞放射增敏的基础研究

目的：观察培美曲塞二钠与EGFR抑制剂吉非替尼单独及联合使用对肺癌细胞放射增敏作用,探讨其作用机制。方法：1、使用噻唑蓝比色法(MTT),检测培美曲塞二钠和EGFR抑制剂吉非替尼各自对人肺腺癌细胞株A549细胞的抑制作用,分别计算出两种药物的IC20和IC50,接着参照各自IC20的药物浓度及预实验结果确定作为放射增敏的浓度。2、采用体外培养克隆形成实验,检测培美曲塞二钠和EGFR抑制剂吉非替尼联合放射线对人肺腺癌细胞株A549细胞的抑制作用,计算其存活分数,同时绘制细胞存活曲线。3、使用流式细胞术,检测细胞周期和细胞凋亡的变化。4、提取蛋白,使用Western-blot,检测Akt和pAkt的表达变化,进一步探索两药联合及放射增敏效应的可能作用机制及细胞信号通路。结果：1．MTT结果显示培美曲塞二钠和吉非替尼对人肺腺癌细胞株A549细胞具有抑制增殖作用,随剂量增加而增强。培美曲塞二钠的IC50为(1485.326) ng/ml;吉非替尼的IC50为(7.196) uM。2．体外培养克隆形成实验分析显示,放疗+两药联用组的Dq、D0及SF2均明显低于单纯放疗组、放疗+培美曲塞二钠组及放疗+吉非替尼组;培美曲塞二钠和吉非替尼SER分别为1.17和1.48,两药联合 SER为2.62。两药联用的放射增敏效应明显高于各自单药的放射增敏效应,两药联合使用可以进一步提高放射增敏作用。3．流式细胞术检测细胞周期结果显示培美曲塞二钠和吉非替尼可以使细胞阻滞在G1/G0期;与放射线联合作用后,使S期细胞比例减少,两药合用作用更明显。检测凋亡结果显示培美曲塞二钠和吉非替尼均可以提高放射线诱导的凋亡,但两药联用可以使其凋亡率达到最高,提示两药联合作用可以进一步提高放射线诱导的细胞凋亡。4．Western- blot结果显示,药物作用前后、照射前后及药物增敏照射后Akt在蛋白表达水平没有明显改变;培美曲塞二钠和吉非替尼均能抑制p-Akt的表达;与单纯照射组相比,培美曲塞二钠和吉非替尼联合照射组p-Akt蛋白的表达减低,两药联用并联合照射组p-Akt/Akt的比值最低。结论：培美曲塞二钠和吉非替尼各自均有放射增敏的作用,两药联合使用可以明显提高放射效应。其机制可能涉及到使细胞周期中对放射线不敏感的S期细胞减少到最低,同时进一步增强了放射线诱导的细胞凋亡;另外可以推断培美曲塞二钠和吉非替尼两药都可抑制PI3K/Akt信号转导通路,为两药联合应用进一步提高放射增敏效应的可能的机制之一。     

从畜禽肉中分离出带耶尔森氏菌HP1毒力岛的ESIEC大肠杆菌

ESIEC是新发现一种产志贺毒素且具侵袭力的致泻大肠杆菌 ,是一种新的病原菌 ,所以我们对 9株 ESIEC培养条件、生化特性及小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力岛进行了检测 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1.1　样品来源　生鸡肉、生猪肉、生牛肉样品采自屠宰场、集贸市场、食品商店、个     

252锎(Cf)中子腔内后装加外照射治疗子宫颈癌的临床观察

背景与目的：宫颈癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤。放疗是主要治疗手段，宫颈癌的放疗多以内照射加外照射。内照射国内外多采用^192Ir或^137Cs高剂量率γ射线腔内后装治疗。^252锎（Cf）近距离治疗妇科恶性肿瘤开始于20世纪60年代后期。本文旨在观察^252锎（Cf）腔内后装加盆腔外照射治疗子宫颈癌的疗效以及并发症的发生情况，并对治疗方案进行总结。方法：43例未接受过任何治疗的子宫颈癌患者中，Ⅱa期5例，Ⅱb期24例，Ⅲa期9例，1Ih期5例。均采用^252锎（Cf）腔内后装和盆腔外照射同时进行的方法治疗。其中，中子腔内后装治疗，宫旁A点剂量为8～12Gy／次，1次／周，共进行4—5次，使宫旁A点累积剂量达30—40Gy；^60Coγ射线外照射，全盆腔野前后对穿照射，B点每次吸收剂量2Gy／次，4次／周，5—7周，外照射25—30Gy后改的、后四野至总剂量40-50Gy。腔内照射当日不行体外照射，中子治疗第二天开始外照射，全程总剂量70—80Gy。结果：43例患者随访3年，2年局部病灶控制率为100％（43／43），2年总生存率为93．0％（40／43）；3年局部病灶控制率为93．0％（40／43），3年总生存率为88．4％（38／43）。远期并发症：阴道挛缩、粘连4．6％（2／43），迁延型放射性直肠炎发生卒为2.3％（1／43）。结论：^252锎（Cf）中子腔内后装放射加盆腔外照射治疗宫颈癌，患者能较好耐受，且具有局部病灶控制率高、并发症发生率低等特点，具有一定临床应用前景。     

三维适形放疗联合不同化疗方案治疗中晚期食管癌的临床研究

目的：比较分析放疗同期多西紫杉醇、顺铂方案化疗与顺铂、5-氟尿嘧啶方案化疗的疗效及毒副反应。方法：回顾性分析2005年6月-2008年6月期间,42例放疗同期化疗的食管癌病例,临床分期Ⅱ-Ⅲ期。均为CT定位,常规分割,三维适形放疗,总剂量60-68Gy。均于放疗第1、28天联合化疗,根据同期化疗方案的不同分为两组：22例联合多西紫杉醇加顺铂方案,为TP组;20例联合顺铂加氟尿嘧啶方案,为DF组。结果：所有患者均随访至2010年12月,随访率100%。两组有效率：TP组81.8%、DF组75.0%（P〉0.05）。1、2年局部控制率：TP组86.4%、63.6%;DF组80.0%、60.0%（P〉0.05）。1、2年生存率：TP组81.8%、59.1%;DF组80%、50%（P〉0.05）。急性毒副反应,白细胞减少发生率TP组明显高于DF组;胃肠道反应发生率TP组明显低于DF组。结论：适形放疗同步多西紫杉醇、顺铂方案化疗治疗食管癌较顺铂、氟尿嘧啶方案可提高有效率、局部控制率和生存率。骨髓抑制发生率较高,但经积极治疗后可耐受,能够继续完成治疗。     

比亚芬在乳腺癌术后放疗中预防皮肤反应的疗效观察

目的观察比亚芬预防乳腺癌改良根治术后胸壁放射性皮肤损伤的效果。方法57例乳腺癌改良根治术后患者随机分两组,治疗组29例在第1次放疗后给予比亚芬涂抹照射野皮肤,对照组28例做常规放疗皮肤护理。结果治疗组和对照组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级放射性皮肤损伤的发生率分别为55．2％、34．5％、10．3％和17．9％、42．9％、39．3％;累积剂量25Gy时急性放射性皮肤损伤的发生率分别为75．0％和48.3％。两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论早期使用比亚芬能有效降低乳腺癌改良根治术后胸壁放射性皮肤损的程度,延缓损伤发生的时间。     

非小细胞肺癌脑转移患者放疗后的生存状况及预后分析

目的:探讨非小细胞肺癌脑转移放疗后生存状况及预后的相关因素。方法:回顾性分析本院2004年9月-2007年12月58例非小细胞肺癌脑转移患者的临床资料,Kaplan Meier法进行生存率统计,并进行Log-rank时序检验,利用比例风险模型(Cox模型)进行多因素分析,筛选相关因素。结果:非小细胞肺癌脑转移患者放疗后的1年生存率为37.9%,2年生存率13.8%。单因素分析结果显示,患者的KPS评分、脑转移数目、有无颅外转移、原发病灶控制情况及放疗方法对生存期有影响(P<0.05),多因素分析显示,KPS评分、脑转移灶数目是预后的独立因素(P<0.05)。结论:患者的KPS评分、脑转移灶数目、原发病灶控制情况、有无颅外转移及放疗方式是非小细胞肺癌脑转移的预后因素。KPS≥70分,脑转移灶为单发是肺癌脑转移患者良好的独立预后因素,这些患者的生存期较长,是潜在的治疗获益者。     

2009年北京市昌平区甲型H1N1流行性感冒病毒监测结果分析

目的及时了解北京市昌平区2009年流感样病例中甲型H1N1流感病毒感染情况。方法依据《甲型H1N1流感病毒RT-PCR检测技术标准操作规程》,应用一组寡核苷酸引物和双重标记的TaqMan(探针,对呼吸道鼻咽拭子标本中的甲型H1N1流感病毒核酸进行定性检测[实时荧光定量(RT-PCR)法检测甲型H1N1流感病毒]。结果2009年5月18日至11月29日共检测流感样病例标本3647份,检测出甲型H1N1流感病毒核酸阳性标本214份(阳性检测率为5.87%),7月27日检出首例甲型H1N1流感病毒核酸阳性标本,9月14-27日阳性检出数最多(112例)。发病年龄集中在5~岁、10~岁、15~岁和20~岁组,发病人群学生占76.62%,97.40%的病例具有发热症状,其次为咳嗽(42.86%)和咽痛(31.17%)等。结论2009年昌平区流感样病例中甲型H1N1流感病毒感染以学生为主,发病具有明显年龄、人群差异。开展甲型H1N1流感病毒核酸检测,有助于了解甲型H1N1流感病毒感染情况,为临床的诊治以及合理制定甲型H1N1流感病毒防控策略提供依据。     

北京市昌平区食源性金黄色葡萄球菌药敏分析及分子流行病学特征研究

目的 对北京市昌平区2011-2014年分离获得的74株食源性金黄色葡萄球菌耐药谱、毒力因子编码基因携带情况和分子流行病学特征进行研究分析,为金黄色葡萄球菌食源性疾病的预防控制提供参考。方法 依据GB 4789.10-2010进行菌株分离和鉴定,用全自动微生物鉴定及药敏分析系统VITEK2 Compact进行16种药物敏感性试验,并使用检测试剂盒进行－内酰胺酶的检测;利用PCR方法检测分离菌株肠毒素,杀白细胞素和耐热磷酸酶等毒力因子编码基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对分离株进行分子分型。结果 74株金黄色葡萄球菌中68株(91.89%)有不同程度的耐药,其中对青霉素耐药率(87.84%)最高,其次为红霉素(44.59%)和克林霉素(39.19%)。毒力因子检测结果显示肠毒素阳性率64.86%(48/74),产2种以上肠毒素菌株占72.92%(35/48)。耐热磷酸酶阳性率89.19%,杀白细胞素编码基因lukF阳性率77.03%。PFGE分型结果显示除9株菌不可分型外,其余65株菌分为40个不同型别,无优势型别。结论 昌平区2011-2014年分离的食源性金黄色葡萄球菌具有较强的耐药性、分子多态性和毒力因子携带率较高的特征,说明这些菌株可以导致潜在的食品安全问题。     

老年非小细胞肺癌的生存状况及预后分析

目的 探讨老年非小细胞肺癌患者生存状况及预后相关因素,为临床治疗提供参考依据。方法 回顾性分析87例老年非小细胞肺癌患者的临床资料,利用Kaplan-Meier法进行生存率统计,并进行Log-rank时序检验,利用比例风险模型(Cox模型)进行多因素分析,筛选出相关因素。结果 87例老年非小细胞肺癌患者1、2、4年生存率分别为52.9%、26.2%、2.8%,中位生存时间为14个月。单因素分析结果显示,患者的KPS评分、TNM分期、靶向治疗、治疗方式对生存期有影响(P<0.05),多因素分析显示KPS评分、治疗方式是预后的独立因素(P<0.05)。结论 KPS≥70分、能够耐受综合治疗的老年患者应当积极治疗,这些患者的生存期较长,是潜在的治疗获益者。