原发性脑干损伤后延髓网状结构神经元型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶和钙结合蛋白的表达变化

目的：研究原发性脑干损伤后延髓网状结构神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和钙结合蛋白（cR）的表达变化，探讨脑干损伤短时间内的分子机制及形态学改变。方法：采用撞击法造成实验大鼠脑干损伤死亡，并分为正常对照组、1h内死亡组、伤后存活组。采用比色法检测3组延髓的一氧化氮合酶（NOS）、iNOS和结构型一氧化氮合酶（cNOS）的变化。并采用免疫组织化学SP法检测nNOS和CR的改变。结果：与正常对照组相比，1h内死亡组脑干的NOS和cNOS均升高，iNOS无显著性变化；伤后存活组NOS和iNOS升高．cNOS无显著性变化。与正常对照组比较，1h内死亡组延髓内nNOS阳性细胞数显著增多，伤后存活组则无显著性变化。与正常对照组比较，1h内死亡组和伤后存活组CR阳性细胞数明显减少，3组间两两比较差异均有显著性。结论：原发性脑干损伤导致延髓nNOS和iNOS呈现不同的变化规律，且在一定时间范围内CR表达下调。[著者文摘]     

丹东市城乡中小学健康知识现状调查

目的了解丹东市中小学健康知识知晓情况，为加强中小学健康教育提供依据。方法采取整群抽样，对丹东市城乡3145名中小学生进行问卷调查。结果中小学生健康知识问题正答率不高，城乡之间中小学生健康知识掌握情况存在一定差异。结论应加强健康教育，提高青少年健康知识水平，促进其健康成长。     

氯氮平及其代谢产物在兔体内的死后分布

目的建立氯氮平的新西兰大白兔染毒致死模型,观察氯氮平（CLP）及其代谢物在兔体内的死后分布规律。方法按LD50（270 mg.kg-1）与4 LD50（1 080 mg.kg-1）氯氮平给新西兰大白兔灌胃,待实验动物心跳呼吸等生命体征全部消失后,在死亡当时,迅速解剖动物,提取心血、尿、脑、心、肝、脾、肺、肾等组织,样本冷冻保存,经固相萃取提取后,LC/MS/MS定性、定量检测其中氯氮平（CLP）及其代谢物去甲氯氮平（DMCLP）、N-氧化氯氮平（CLP-NO）的含量。结果氯氮平及其代谢物的死后分布存在器官的依存性,肺、肝、肾等器官的分布浓度高,而玻璃体液及下肢肌分布浓度较低。随着染毒剂量的增加,CLP及其代谢物在组织中浓度（尿液除外）有所升高,CLP代谢物与原体浓度的比值随剂量的增加有所下降。结论氯氮平及其代谢物在新西兰大白兔分布不均匀,除常规的尿和血液可以作为分析的检材以外,肝、肺、肾等氯氮平及其代谢物富集的器官亦可作为检案的分析样本。氯氮平及其代谢物浓度与染毒剂量成正比,代谢物与原药浓度的比值与染毒剂量成反比。     

海洛因成瘾和正常大鼠前额叶皮质差异蛋白的分离与鉴定

目的 建立和比较海洛因成瘾与正常大鼠前额叶皮质(PFC)蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定海洛因成瘾大鼠PFC中的差异蛋白表达谱.方法 以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和海洛因成瘾大鼠的PFC蛋白质样品进行二维分离,2-D图谱经ImageMaster 2D 5.0软件分析,选取7个差异蛋白点用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱/串联质谱进行鉴定.结果 经肽指纹图谱和串联质谱分析,并在NCBInr数据库检索,选取的7个蛋白点被成功鉴定为5种蛋白:成瘾组特有的是葡萄糖调节蛋白58和26 s蛋白酶复合体亚基p40.5;成瘾组含量下调的蛋白是ATP合酶D链;Ndufa10和α-烯醇化酶在两组中发生相对分子质量和(或)等电点迁移.结论 双向电泳结合质谱分析初步鉴定了大鼠前额叶皮质中与海洛因成瘾和神经毒性相关的差异蛋白,为进一步深入研究其病理机制奠定了基础.     

盐酸地尔硫[艹卓]缓释片在健康人体内的药动学和生物等效性研究

目的研究盐酸地尔硫[艹卓]受试制剂和参比制剂的人体药动学和生物等效性。方法单剂量试验组：18名健康受试者随机交叉口服受试制剂和参比制剂,剂量为120mg。多剂量组：18名健康受试者随机交叉连续口服受试制剂和参比制剂60mg（bid,连续7d）。血样经预处理后采用HPLC紫外检测法测定地尔硫[艹卓]浓度,以计算其主要药动学参数并进行统计学分析。结果单剂量口服120mg盐酸地尔硫[艹卓]后,受试制剂和参比制剂的各主要药动学参数如下：AUC0-t分别为（901．71±270．84）和（926．82±277．02）ng·h·mL^-1,AUC0-∞分别为（974．58±292．88）和（995．85±291．13）ng·h·mL^-1,Cmax分别为（97．66±26．36）和（101．78±33．54）ng·mL^-1,tmax分别为（3．4±0．8）和（3．4±1．0）h。以AUC0-t计算受试制剂的相对生物利用度为（97．5±10．2）％。多剂量口服盐酸地尔硫[艹卓]60mg达稳态后,受试制剂和参比制剂的各主要药动学参数如下：AUC0-t^ss分别为（803．42±205．68）和（783．22±181．62）ng·mL^-1,AUC^ss分别为（566．67±128．14）和（549．59±112．58）ng·h·mL^-1、Cmax^ss分别为（84．07±21．12）和（79．09±19．12）ng·mL^-1、Cmin^ss分别为（27．34±5．81）和（27．21±5．02）ng·h·mL^-1、Cav分别为（47．222±10．678）和（45．799±9．381）ng·mL^-1、tmax分别为（3．O±O．3）和（3．1±0．4）h、DF分别为（1．19±0．26）和（1．12±0．24）,以AUC0-t^ss计算的受试制剂的相对生物利用度为（102．6±12．5）％。结论经方差分析及双单侧t检验结果显示受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

罗氏COBAS6000全自动电化学发光免疫分析仪性能验证

目的 按ISO15189要求对罗氏COBAS 6000全自动电化学发光免疫分析仪的性能进行验证. 方法 对甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)的精密度、准确度、临床可报告范围(clinical reportable range,CRR)、分析测量范围(analytical measurement ra...     

氧化应激条件下CD200对MG炎性反应的调控作用

目的探讨氧化应激条件下CD200如何参与调控MG（d＇胶质细胞）激活后的炎性反应。方法对原代培养的MG进行氧化应激处理，并利用急性分离的皮质神经元进行干预。“对照组”和“H2O2组”分别采用生理盐水和H2O2（100μmol／L）进行处理，“H2O2＋CD200组”在H2O2（100μmol／L）处理之前30min采用急性分离的神经元（约含1×10^6细胞）进行预处理。于处理后第0．5h、1h、2h、3h和4h时，采用Western blotting法对MG内p-p38 MAPK和IκB-α的蛋白表达量进行检测；以及第0h和72h时，采用ELISA法对培养介质内的TNF-α和IL-1β的含量进行检测。结果p-p38 MAPK和IκB—α的蛋白表达：“对照组”各时间点均无明显变化；“H2O2组”和“H2O2＋CD200组”0．5b时表达量亦基本相同；而3h时“H2O2组”p-p38 MAPK蛋白表达量明显高于“H2O2＋CD200组”；4h时“H2O2组”IκB-α的蛋白表达量明显低于“H2O2＋CD200组”。TNF-α和IL-1β含量：各组培养介质内0h时均未检出含有TNF-α和IL-1β；第72h时两细胞因子含量高低次序相同，即“对照组”〈“H2O2＋CD200”〈“H2O2组”。结论氧化应激条件下，CD200分子通过抑制MG胞质内p38 MARK的磷酸化，进而抑制了NF—κB的激活和炎性因子表达水平。     

4′-甲基醚金连木黄酮对棕榈酸诱导的大鼠阴茎海绵体内皮细胞功能障碍的影响

目的: 探讨双黄酮类药物4′-甲基醚金连木黄酮(4′-O-methylochnaflavone, MF)对棕榈酸诱导的大鼠阴茎海绵体内皮细胞(rat cavernous endothelial cells, RCECs)功能障碍的影响。方法: 将RCECs随机分为4组,分别为正常+牛血清白蛋白组(NC组)、棕榈酸(palmitic acid,PA)组、MF治疗组、淫羊藿次苷Ⅱ(icasiside Ⅱ,ICA Ⅱ)治疗组。采用蛋白印迹实验检测各组细胞的蛋白激酶B(protein kinase B, PKB/AKT)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达水平,使用一氧化氮荧光探针检测MF以及ICA Ⅱ对RCECs内一氧化氮含量的影响,使用CCK-8试剂盒检测MF、ICA Ⅱ对PA诱导后的RCECs增殖能力的影响。结果: 与NC组相比,MF组、ICA Ⅱ组处理后细胞内一氧化氮含量显著增加(P < 0.05),MF组的效果优于ICA Ⅱ组(P < 0.05)。与NC组相比,PA组的eNOS和AKT蛋白表达水平明显降低,提示成功构建了用于模拟高脂环境的体外RCECs内皮功能障碍模型(P < 0.05)。MF组干预后能够有效提高eNOS、AKT的表达水平,表明MF可促进恢复游离脂肪酸造成的内皮细胞损伤(P < 0.05)。CCK-8增殖实验显示PA显著降低RCECs的增殖数量(P < 0.05),而给予MF、ICA Ⅱ治疗后细胞增殖能力得到显著恢复(P < 0.05)。结论: 在RCECs中,MF与ICA Ⅱ能够有效增加细胞内一氧化氮含量,PA处理后AKT/eNOS通路的下调揭示其参与内皮细胞损伤的发生、发展,而MF的干预能够有效逆转上述变化,此外,PA诱导下RCECs的细胞增殖能力明显下降,而MF与ICA Ⅱ干预能够恢复上述变化。双黄酮类药物MF对PA诱导的RCECs细胞功能障碍有一定程度的修复作用。