ILC2及Tfh的活性与肺腺癌免疫抑制状态的相关性研究

为探讨ILC2和滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell, Tfh）是否协同促进并维持肺腺癌免疫抑制状态,选择肺腺癌患者为研究对象,采用FACS检测患者外周血中ILC2和Tfh的比例;qRT-PCR检测外周血ILC2及Tfh相关因子的表达水平,并对ILC2及Tfh进行相关性分析。结果显示,与对照组比较,肺腺癌患者外周血中ILC2的比例及其相关因子IL-33、IL-25、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）、IL-13、IL-5及IL-4 mRNA的表达水平均升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXC趋化因子受体5（CXC chemokine receptor 5, CXCR5）⁺T细胞及PD-1⁺CXCR5⁺Tfh的比例升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXCR5^-T细胞的比例下调（P<0.01）,Tfh相关...     

常州地区过敏性鼻炎儿童吸入性过敏原分析

目的：分析常州地区过敏性鼻炎患儿吸入性过敏原检测结果及不同年龄组过敏原分布情况。方法采用德国敏筛过敏原检侧系统（Allergy Screen）测定473例0～12岁过敏性鼻炎患儿血清中过敏原特异性 IgE 抗体水平。根据年龄分为婴幼儿组（0～3岁）、学龄前儿童（4～6岁）和学龄儿童（7～12岁）,并比较不同年龄组过敏原阳性率及变化趋势。结果473例患儿过敏原阳性340例（71.9％）,前三位过敏原分别是户尘螨（55.6％）、混合真菌（25.8％）和屋尘（18.8％）,随年龄增长阳性率均呈升高趋势。其中户尘螨（χ2＝21.061,P ＝0.000）、屋尘（χ2＝15.111,P ＝0.000）和猫狗毛皮屑（χ2＝7.597,P ＝0.022）组间分布比较差异有统计学意义。单一过敏原阳性率最高（38.5％）,第二位为双重过敏原阳性（23.7％）。单一过敏原阳性前三位与各类过敏原总体阳性排序相同。最常见双重过敏原是户尘螨＋屋尘组合,多重过敏原阳性率组间分布差异有统计学意义（χ2＝13.399,P ＝0.001）。结论常州地区过敏性鼻炎患儿吸入性过敏原以户尘螨、混合真菌和屋尘为主,阳性率随年龄增长呈上升趋势,不同年龄组过敏原构成有差异,单一过敏原阳性最常见,其次为双重过敏原阳性。     

人T-bet基因的克隆及序列分析

目的：克隆人T-bet基因全长编码区的cDNA，并进行豁定和测序分析，为从转录水平研究Th1／Th2平衡及其与免疫相关性疾病发生发展的关系奠定基础。方法：采用RT-PCR方法，从人外周血淋巴细胞获得T-bet基因的cDNA；连接至pGEM-Teasy载体，导入大肠杆菌DH5α并选择阳性克隆；应用M13F／R通用引物进行双向反应测序，以作序列鉴定。结果：扩增得到的T-bet基因cDNA全长1670 bp，包括编码区1607 bp，编码530个氨摹酸残基，与Genbank中发表的序列完全一致。结论：获得了人T-bet基网的克隆，为进一步研究其生物学功能构建了基础平台，为寻找多种免疫性疾病的有效治疗提供新思路。     

1817例女性人乳头瘤病毒感染现状分析

目的探讨常州地区女性人乳头瘤病毒(HPV)的感染类型、主要亚型及年龄分布等情况。方法采集2015年10月至2016年7月1 718例该院门诊妇科患者宫颈上皮细胞标本,采用PCR-反向点杂交法对其进行28种基因分型的检测。结果 (1)1 718例女性患者,HPV阳性检出率为34.23%。(2)单一型感染率为23.57%(405/1 718),包括高危型HPV感染率为17.17%(295/1 718),低危型HPV感染率为5.18%(89/1 718),疑似高危型HPV感染为1.22%(21/1 718);多重感染为10.94%(188/1 718)。(3)最常见高危型为HPV52型,阳性率为16.16%(95/588);低危型感染以HPV61型为主,阳性率为4.08%(24/588);各年龄组之间HPV阳性率比较,差异无统计学意义(P0.05)。61~70岁年龄组的多重感染率与其他年龄组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论常州地区女性HPV阳性检出率较高,以单一型感染和高危型感染为主,最常见的高危型为HPV52型,其次为16、58型。不同年龄组HPV感染类型略有差异。     

T-bet、GATA3及相关因子的表达与胃癌及转移的相关性研究

目的：分析胃癌患者Th1和Th2两类细胞因子的基因表达与转录因子T-bet和GATA3表达的相关性,从细胞因子与转录因子角度考证胃癌患者Th1/Th2细胞分化趋势,探讨p53与T-bet的相关性,了解T-bet与肿瘤转移之间的关系。方法：利用荧光定量PCR技术检测55例胃癌患者及45例正常人外周血单个核细胞（PBMC）中T-bet、GATA3转录因子和IFN-γ、IL-4等细胞因子的水平,应用免疫组化法检测胃癌组织中p53的表达状况。结果：55例胃癌患者T-bet、GATA3、IFN-γ、IL-4的表达率依次为51%（28/55）、78%（43/55）、27%（15/55）、69%（38/55）。定量PCR结果显示,病人组的T-bet和IFN-γ明显低于正常对照组（P〈0.01）,而GATA3和IL-4则明显高于正常对照组（P〈0.01）。T-bet与IFN-γ在病人体内的mRNA表达存在正相关性（P〈0.01）,正常人则没有。GATA3与IL-4的表达在两组中均呈明显正相关（P〈0.01和P〈0.05）,且在p53阳性的患者中,T-bet的表达率较低,而GATA3的表达率较高。结论：胃癌患者有明显Th2漂移现象,且p53的表达与T-bet的表达呈负相关。     

Irisin与急性冠脉综合征的相关性研究

目的 探究血清鸢尾素(Irisin)与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)的相关性。方法 选取2013年9月至2014年3月于同济大学附属第十人民医院心脏中心住院患者182例,其中男性108例,女性74例;根据入院检测心肌肌钙蛋白T(cTNT)的水平,分为正常对照组(cTNT 0~0.014ng/ml)、心肌损伤组(cTNT 0.015~0.05ng/ml)、急性冠脉综合征组(cTNT>0.051ng/ml)。ACS组根据责任血管分为左前降支(left anterior descending branch, LAD)病变组及非左前降支病变组。所有的受试者均进行病史采集、体格检查、血生化指标及血清Irisin水平测定。结果采用单因素方差分析、t检验和Person相关分析进行统计学分析。结果 ACS组的血清Irisin水平较对照明显升高[(145.35±10.11) ng/ml vs (102.68±5.60) ng/ml,P<0.01],左前降支病变组(LAD病变)较非左前降支病变组(非LAD病变)Irisin水平升高[(123.86±8.05) ng/ml vs (108.27±5.72) ng/ml,P<0.05]。Irisin与N-端脑钠肽前体(NT-proBNP)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、空腹血糖(FBG)呈正相关(分别r=0.259,P<0.01;r=0.445,P<0.01;r=0.179,P<0.05)。结论 Irisin在ACS时明显升高,对ACS有预测和诊断意义,有望成为ACS治疗的新型分子靶点。     

人T-bet基因转染U937探讨T-bet对白血病细胞的影响

目的 探讨人T-bet基因在白血病细胞株U937中的表达及其对IFN-γ分泌的影响,寻求通过免疫调节改善白血病患者机体免疫状态的可能性.方法 采用电穿孔技术将重组人pIRES-eGFP-Tbet(pIRES-eGFP-hTbet)质粒转染U937细胞,RT-PCR检测转染前后U937细胞T-bet的mRNA水平;westen-blot检测表达的T-bet蛋白;ELISA检测其分泌IFN-γ的水平.试验中同时设立pIRES-eGFP质粒为对照.结果 电穿孔转染U937细胞后,在荧光显微镜下观察到带荧光的细胞(转染细胞),其荧光细胞阳性率80%左右,提示转染成功;转染T-bet的U937细胞,分别经RT-PCR及westen-blot检测到T-bet的mRNA和表达的蛋白,而未经转染或转染对照质粒pIRES-eGFP的细胞,均未见目的基因的转录和蛋白表达;T-bet转染细胞的培养上清中含有较高水平的IFN-γ,而转染前及对照质粒转染的细胞IFN-γ的分泌水平极低.结论 通过电穿孔方法 成功将人T-bet基因转染到白血病细胞株U937中,并检测到大量IFN-γ的产生.T-bet是免疫应答调节的重要转录因子,对其研究将有助于进一步探讨T-bet基因或其表达产物作为Th1应答的调节剂用于临床血液病治疗的可能性.     

CpG-ODN对婴幼儿喘息性支气管炎外周血单个核细胞T-bet表达的影响

目的：探讨CpG-ODN干预对婴幼儿喘息性支气管炎外周血单个核细胞（PBMC）T-bet表达和IFN-γ分泌的影响。方法：对28例喘息性支气管炎（喘支组）患儿于急性期和恢复期分别抽取抗凝静脉血并分离PBMC,以终浓度为10μg/ml的B型CpG-ODN刺激48小时,分别应用RT-PCR和Western blot检测CpG-ODN刺激前后患儿PBMC的T-bet mRNA和蛋白表达情况,以ELISA检测PBMC培养上清IFN-γ的变化,同时设立26例健康婴儿对照组。结果：与正常对照组比较,喘支患儿PBMC表达T-bet mRNA及蛋白明显减少（P〈0.05）,应用CpG-ODN刺激后,两组小儿PBMC表达T-bet均显著上调,但产生IFN-γ无明显增多,对照序列ODN对T-bet表达及IFN-γ的分泌无明显影响。相关分析表明,喘支患儿T-bet mRNA与IFN-γ分泌呈正相关（r=0.57,P〈0.01）,CpG-ODN刺激后,二者相关性明显下降（r=0.19,P〉0.05）。结论：T-bet在喘支患儿PB-MC中表达减少,提示T-bet表达缺陷参与了喘支的免疫病理,B型CpG-ODN作为一种免疫调节剂,可有效上调T-bet的表达,但不能诱导IFN-γ的产生。