虾青素对幽门螺杆菌感染AGS细胞自噬及凋亡的抑制作用

目的探讨虾青素对幽门螺杆菌(Hp)感染AGS细胞自噬和凋亡的影响。方法选取胃上皮细胞株AGS细胞进行Hp感染,根据虾青素的浓度分为对照组[二甲基亚砜(DMSO)处理]、10μmol/L组、20μmol/L组、50μmol/L组。分组处理96 h后,采用免疫荧光标记检测细胞Hp外膜蛋白(OMP)表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测相关基因微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、LC3-Ⅰ、Beclin1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA表达,Western blot法检测细胞自噬和凋亡相关蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果 Hp在AGS细胞质中弥散分布,Hp感染AGS细胞成功。虾青素可抑制Hp的增殖,10、20、50μmol/L组细胞凋亡率均低于对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。Beclin1、LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ比值(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)、Bax蛋白及mRNA的表达随着虾青素浓度的增高而逐渐降低,Bcl-2蛋白及mRNA表达随着虾青素浓度的增高而逐渐升高,与对照组相比,差异有统计学意义(P 0.01)。虾青素10、20、50μmol/L组白细胞介素-17(IL-17)含量均低于对照组,差异有统计学意义(P 0.05),且随着虾青素浓度的增高,IL-17含量逐渐下降。结论随着虾青素浓度的增高,Hp感染的AGS细胞的自噬及凋亡能力减弱。     

98例胃肠胰神经内分泌肿瘤的临床病理特征及生存分析

目的:探讨98例胃肠胰神经内分泌肿瘤的临床、病理特点及预后因素,以提高对该疾病的认识及诊治水平。方法:选取 2008年1月至2016年6月新疆医科大学附属肿瘤医院收治98例资料完整的胃肠胰神经内分泌肿瘤患者的临床资料,对其临床表现、病理特征、生存等进行回顾性分析。结果:本组患者共98例（男67例,女31例）,平均年龄（54.5±12.8）岁,发病部位最常见于胃(33/98,33.7%),其次直肠(31/98、31.6%)。肿瘤大小0.2至9.2厘米（平均:1.2厘米）。平均随访时间为18个月（范围1~101个月）。患者1年、3 年和5年总生存率分别为80.6％、64.1％、56.2％。单因素分析显示肿瘤部位、大小、分级、淋巴结转移、远处转移及手术方式是预后不良的预测因子,多因素分析未发现任何独立的危险因素。结论:胃肠胰神经内分泌肿瘤是一种少见的疾病,临床表现不典型,最常见的发生部位是胃,多为高度恶性肿瘤;其次多见于直肠,多为低度恶性肿瘤。胃肠胰神经内分泌肿瘤以手术治疗为主。     

siRNA沉默HIF-2α对缺氧培养的BGC-823胃癌细胞中VEGF表达的影响

目的:观察乏氧培养条件下胃腺癌细胞系BGC-823中HIF-2α和VEGF的表达,探讨HIF-2α在低氧条件下对胃癌血管生成的调控作用.方法:采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法分别检测低氧状态下HIF-2α和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达.进一步采用化学合成小干扰RNA(siRNA)介导的RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)转染BGC-823细胞.观察转染后HIF-2 α沉默效果.结果:与常氧时比较,缺氧后BGC-823细胞HIF-2α、VEGF的mRNA水平稳定,而蛋白的表达水平均明显升高(P＜0.05),siRNA转染BGC-823后能够显著下调HIF-2α的基因表达,同时VEGF基因的表达也受到明显抑制.结论:缺氧可促使BGC-823细胞HIF-2α在蛋白水平表达升高,并通过激活VEGF的机制调控胃癌血管生成,切断HIF-2α途径可能会有效阻止胃癌血管生成.     

胃癌BGC-823细胞中HIF-1α、HIF-2α对PKM2的调控作用

目的研究siRNA特异性沉默人胃癌BGC-823细胞中缺氧诱导因子(HIF-1α、HIF-2α)后PKM2的表达情况,探索HIF-1α、HIF-2α对胃癌细胞内PKM2的调控作用。方法用Realtime RT-PCR及Western blot法检测转染HIF-1α、HIF-2α及Control siRNA后细胞内PKM2表达情况。结果 RNA干扰技术能有效沉默BGC-823细胞中的HIF-1α、HIF-2α。转染HIF-1α、HIF-2αsiRNA后,PKM2在mRNA及蛋白表达水平均下降(P<0.05),其中siRNA抑制HIF-1α后,PKM2下调最明显;转染Control siRNA后,PKM2在mRNA及蛋白表达水平均无明显变化(P>0.05)。结论 HIF-1α和HIF-2α均参与调控PKM2的表达,其中HIF-1α起主要调控作用,HIF-1α、HIF-2α与PKM2共同促进肿瘤的Warburg效应。