携带可调控人胰岛素基因的腺病毒载体的构建和鉴定

目的:构建携带葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)启动子控制下的人胰岛素基因的腺病毒载体。方法:将GIP- hIns基因自pCDNA3-GIP-hIns质粒中酶切下来,克隆至切除CMV启动子的pCA13-△CMV质粒中,形成转移质粒 pCA13-GIP-hIns,然后与质粒pBHGE3共转染至293细胞株,在其中同源重组形成腺病毒颗粒。采用PCR方法对重组体进行鉴定,同时测定病毒滴度。体外转染STC-1细胞,并采用RT-PCR检测感染腺病毒的细胞内有无hIns mRNA 的转录。结果:由pCA13-GIP-hIns和pBHGD共转染至293细胞后,可得到阳性重组体Ad.GIP-hIns,经PCR检测表明已含有GIP-hIns基因。纯化所得腺病毒滴度约为1×1011 pfu／ml。RT—PCR证实在感染重组体腺病毒Ad．GIP— hIns的细胞中有相应mRNA的转录。结论:成功构建了携带GIP启动子控制下的人胰岛素基因的腺病毒载体,为进一步胰岛素基因治疗糖尿病的实验研究奠定了基础。     

脂质体阿霉素及其靶向治疗研究进展

阿霉素 (ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ)是临床常用的蒽环类抗肿瘤药物 ,抗瘤谱广、疗效好 ,可以治疗多种肿瘤。然而该药在杀伤肿瘤细胞的同时 ,也产生全身严重的不良反应 ,如心脏损害、骨髓抑制等 ,治疗指数低 ,临床应用受到限制[1] 。多年来人们一直在寻找降低毒副反应的有效方法 ,如调整给药方案、联合用药、改变药物剂型等。近年来由于药物载体研究的飞速发展 ,在这方面取得了很大成功。自从 196 5年Ｂａｎｇｈａｍ发现脂质体 (ｌｉｐｏｓｏｍｅ)以来[2 ] ,脂质体作为药物载体的研究引起了人们极大的兴趣。脂质体的主要成分是磷脂 ,磷脂分子中…     

新型冠状病毒肺炎疫情常态化防控期间安全开展普外科手术策略

随着新型冠状病毒奥密克戎变异株在全球范围广泛流行,疫情常态化防控进入一个新的阶段。普外科由于疾病范围广、急危重症多,是疫情期间社会面就医需求最为迫切的主要专科之一。基于现有的研究证据和临床实践经验,提出安全开展普外科手术的对策。首先,宏观策略上,病房应进行分区布置,并合理制定急诊和择期手术病人收治流程。其次,术中防护的技术细节方面,需重点注意防护装备穿脱、手术烟雾处理、手术标本转运等关键环节。最后,还应重视职业暴露的预防和处置。     

回眸2019--聚焦胃肿瘤的研究进展

目前胃部肿瘤以胃癌、胃肠间质瘤和胃神经内分泌肿瘤最为常见。2019年胃癌的腹腔镜手术方面,一系列的研究成果均显示,微创手术在早期胃癌治疗中的安全性以及进展期胃癌的肿瘤学疗效都与传统开放手术相似,为腹腔镜手术在胃癌治疗中的推广提供了高级别循证医学依据。胃癌综合治疗方面,也有重大研究结果公布,我国的临床研究也逐渐得到国际上的认可和关注。靶向治疗和免疫治疗的应用虽有进展,但在胃癌术后的一线治疗尚未能得到认可。胃肠间质瘤领域,腹腔镜手术也逐渐得到推广,晚期耐药患者手术治疗仍有其价值。胃神经内分泌肿瘤方面,最新研究显示,手术方式应根据肿瘤特性来加以选择,胃癌若合并神经内分泌肿瘤成分则可能预后更差。     

胃肠外科近20年进展和发展趋势

进入21世纪已经20年了,回顾胃肠外科发展历程,疾病谱的改变对胃肠外科医师提出了更高的要求。微创技术、代谢外科、围手术期综合管理和外科质量控制、专业化和多学科团队等全新的理念和治疗模式不断出现并迅速推广,不仅推动了胃肠外科的发展,也是胃肠外科发展的趋势。     

血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌中的研究进展

肿瘤的生长和转移需要新生血管的形成[1] ,而血管的形成又受多种相关因子的调节 ,血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)又称血管渗透因子 (vascularpermeabilityfactor ,VPF)就是其中最重要的因子之一。它对于血管内皮细胞的增殖及新生血管的构建 ,作用较强 ,特异性较高。目前在很多肿瘤组织中都发现VEGF有高水平的表达。本文就VEGF在乳腺癌中的表达与调控 ,及其对乳腺癌的诊断、治疗和评价预后的作用作一综述。1　VEGF1.1　VEGF的结构1989年Leung等[2 ] 从牛垂体滤泡星状细胞培养物中纯化分离到一种肝素结…     

不同AKT基因的表达对胰岛素瘤βTC-6细胞功能的影响

目的:探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导损伤的胰岛素瘤βTC-6细胞功能与AKT基因各异构体(AKT1/ AKT2/AKT3)表达的关系。方法:应用实时荧光定量RT-PCR技术,检测体外培养条件下STZ诱导的βTC-6细胞损伤前后不同时间点,Insulin基因和AKT基因的表达变化。结果:在STZ作用前和作用后24 h、72 h,βTC-6细胞的AKT基因表达水平呈下降趋势,其中,AKT1基因表达水平与对照组相比呈显著下降(P<0.05),在STZ作用后72 h则更为显著(P<0.01)。AKT2和AKT3基因表达水平亦呈下降趋势,但与对照组相比均无显著差异。Insulin基因表达水平亦下降,且在STZ作用后72 h与对照组相比有显著差异(P<0.05)。结论:βTC-6细胞功能与AKT基因的表达相关,并且Insulin基因的表达与AKT1 基因的表达呈正向关系。     

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结直肠癌肝转移的发病率及死亡率逐年升高,多学科综合治疗团队(multidisciplinary team,MDT)对提高病人存活率、改善预后起着重要作用。较传统单一学科诊疗模式,MDT为病人提供了全方位个体化的高质量诊疗。此外,MDT对于医学教育与科研同样有所帮助。MDT在国外已广泛开展,但在国内尚处于起步阶段,缺乏相应的标准。因此,需要重视并规范化开展结直肠癌肝转移的多学科综合治疗。     

如何切实有效地开展胃肠肿瘤的转化医学研究

转化医学作为医学发展的新理念,虽然定义尚未明确,但其作为连接临床医学和实验室之间的桥梁,重要性已日益凸显。胃肠外科的发展始终体现着转化医学的理念。为开展转化医学研究,胃肠外科医师必须学习从临床中寻找研究问题,完整收集临床资料,重视团队协作,特别是跨学科的合作,同时充分利用各种资源。通过转化医学研究,胃肠外科医师能够进一步提高我国胃肠道肿瘤的综合诊治水平,提高患者长期生存率。     

联合激动Toll样受体的树突细胞对小鼠结肠癌生长的影响

目的 观察联合激动Toll样受体(TLRs)的树突细胞对小鼠结肠癌的杀伤作用以及荷瘤小鼠的生存时间.方法 用转染人癌胚抗原(CEA)的MC38小鼠结肠癌细胞株(MC38-CEA)和MC38细胞株(1×106个/只)皮下注射人CEA转基因小鼠,7d后将不同的树突状细胞(DC)疫苗(1×106个/只)于对侧皮下注射小鼠,每周2次测量各组小鼠肿瘤的垂直直径,并记录小鼠的生存时间,绘制各组肿瘤生长曲线和小鼠生存曲线.结果 在预防性疫苗干预的MC38-CEA肿瘤模型中,第41天联合TLR且荷载CEA肽段的DC(TLR-DC+ CEA)组小鼠肿瘤平均体积(1091.20±226.12) mm3明显小于其余各组(P＜0.01),并且存活期明显优于其余各组(P＜0.01);在治疗性疫苗干预时,第41天TLR-DC+ CEA组小鼠肿瘤平均体积(6487.20±1024.47) mm3,小于磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(9361.20±2654.64) mm3(P＜0.05),而与其余对照组差异无统计学意义(P＞0.05);在小鼠MC38肿瘤模型中,各组肿瘤平均体积差异无统计学意义(P＞0.05),且各组小鼠存活期差异无统计学意义(P＞0.05).结论 联合激动TLR的DC疫苗能抑制表达CEA的小鼠结肠癌生长并延长小鼠生存期.